Linfociti infiltranti il ​​​​tumore modificato per il melanoma metastatico

Sfondo:

• La somministrazione di linfociti infiltranti il ​​tumore (TIL) e interleuchina (IL)-2 ad alte dosi dopo la linfodeplezione possono mediare risposte complete durature nei pazienti con melanoma refrattario. Gli ostacoli alla somministrazione di questa terapia includono l'incapacità di stabilire il TIL in vitro per circa il 20% dei pazienti, lunghi ritardi tra la resezione del tumore e l'istituzione del TIL con conseguenti attributi TIL scadenti per la terapia e ineleggibilità del paziente a causa della progressione e requisiti per un gran numero di cellule feeder per l'espansione del TIL ai numeri terapeutici.
• La linea cellulare K562 è stata progettata per esprimere la molecola di costimolazione 4-1BBL e CD64 (il recettore Fc ad alta affinità per il caricamento con anticorpi come OKT3). Il K562.CD64.4-1BBL Le celle ingegnerizzate con Costimulation Enhancement (ECCE) hanno sostituito fino al 75% delle celle di alimentazione nelle espansioni TIL su larga scala. L'ECCE aggiunto alle sospensioni di cellule tumorali ha fornito la costimolazione in trans con conseguente crescita rapida e affidabile dei linfociti anche da tumori senza crescita TIL in condizioni standard.
• Un K562.CD64.4-1BBL-7F11 clonato La linea ECCE è stata prodotta secondo le buone pratiche di fabbricazione (GMP) ed è stata generata una banca di cellule master. È stato stabilito un protocollo ottimizzato per espandere rapidamente (REP) il giovane TIL utilizzando alimentatori minimi e 7F11. Questi ECCE REPed TIL hanno mantenuto il riconoscimento del tumore e alcuni altri attributi del TIL standard, ma differivano dal TIL standard poiché contenevano meno cellule CD4+ e più cellule natural killer.

Quando 7F11ECCE è stato aggiunto direttamente alle sospensioni tumorali a cellula singola, le colture TIL giovani sono state generate in modo affidabile anche da pazienti che altrimenti non avrebbero avuto una coltura TIL giovane standard per il trattamento.

Obiettivi:

Obiettivi primari:

• Nella coorte 1, per valutare se i TIL giovani che vengono rapidamente espansi utilizzando 7F11 ECCE per sostituire alcune cellule feeder e somministrati con IL-2 in pazienti che seguono un regime di condizionamento non mieloablativo si tradurrà in una regressione clinica del tumore in pazienti con melanoma metastatico refrattario.
• Nella coorte 2, per valutare se il TIL giovane generato utilizzando in costimolazione trans con 7F11 ECCE in pazienti per i quali il TIL giovane standard non è cresciuto possa mediare la regressione del tumore dopo un condizionamento non mieloablativo con IL-2 ad alte dosi in pazienti con melanoma metastatico refrattario.
• Determinare la tossicità di ECCE young TIL in questi regimi di trattamento

Eleggibilità:

I pazienti di età pari o superiore a 18 anni devono avere:

• melanoma metastatico;
• Performance status ECOG (Eastern Cooperative Oncology Group) 0 o 1
• Una o più lesioni di 2 cm o più idonee alla resezione per coltura TIL

I pazienti potrebbero non avere:

• Principali malattie mediche concomitanti;
• Qualsiasi forma di immunodeficienza;
• Grave ipersensibilità a uno qualsiasi degli agenti utilizzati in questo studio;
• Controindicazioni per la somministrazione di IL-2 ad alte dosi.

Progetto:

• I pazienti saranno sottoposti a resezione per ottenere il tumore per la generazione di giovani colture TIL autologhe.
• Le colture TIL parallele saranno stabilite utilizzando a) la tecnica standard con solo IL-2 eb) il protocollo ECCE (Engineered Cells with Costimulation Enhancement) utilizzando K562.CD64.4-1BBL-7F11 irradiato (7F11) celle.
• Dopo 10-20 giorni le colture saranno sottoposte a valutazione per l'insediamento del TIL. Verrà utilizzato preferenzialmente il TIL standard e i pazienti con TIL stabilito con metodi standard verranno assegnati alla Coorte 1

• Coorte 1:

  • TIL subirà ECCE REP mediante esposizione a OKT-3, IL-2, cellule feeder e 7F11 irradiato.
  • I pazienti riceveranno un regime preparativo non mieloablativo di deplezione dei linfociti di ciclofosfamide (60 mg/kg/giorno per via endovenosa (IV)) nei giorni -7 e -6 e fludarabina (25 mg/m^2/giorno IV) nei giorni da -5 a -1.
  • Il giorno 0 i pazienti riceveranno l'infusione di TIL giovane autologo e quindi inizieranno l'aldesleuchina ad alte dosi (720.000 UI/kg EV ogni 8 ore per un massimo di 15 dosi).
  • La risposta clinica e immunologica sarà valutata circa 4-6 settimane dopo il trattamento.
  • Utilizzando un disegno ottimale di fase II in due fasi, inizialmente verranno arruolati 18 pazienti e se tre o più dei primi 18 pazienti avranno una risposta clinica (risposta parziale (PR) o risposta completa (CR)), l'arruolamento continuerà a 35 pazienti, mirando a un obiettivo del 30% per la risposta obiettiva.
• Se il TIL giovane standard non riesce a crescere, verrà valutato il TIL giovane ECCE ei pazienti con ECCE TIL disponibile verranno assegnati alla Coorte 2 .

• Coorte 2:

  • Le colture dei pazienti nella coorte 2 saranno valutate per l'istituzione di ECCE TIL. Se sono disponibili ECCE TIL adeguati, TIL subirà ECCE REP mediante esposizione a OKT-3, IL-2, cellule feeder e 7F11 irradiato.
  • I pazienti riceveranno un regime preparativo di deplezione linfocitaria non mieloablativa di ciclofosfamide (60 mg/kg/giorno IV) nei giorni -7 e -6 e fludarabina (25 mg/m^2/giorno IV) nei giorni da -5 a -1.
  • Il giorno 0 i pazienti riceveranno l'infusione di TIL giovane autologo e quindi inizieranno l'aldesleuchina ad alte dosi (720.000 UI/kg EV ogni 8 ore per un massimo di 15 dosi).
  • La risposta clinica e immunologica sarà valutata circa 4-6 settimane dopo l'infusione di TIL.
  • Utilizzando un piccolo disegno ottimale di fase II in due fasi, inizialmente verranno arruolati 9 pazienti e se uno o più dei primi 9 pazienti ha una risposta clinica (PR o CR), l'arruolamento continuerà a 24 pazienti, mirando a un obiettivo del 25% per una risposta obiettiva.
• Se le colture TIL non sono state stabilite con metodi standard o protocolli ECCE Young TIL, i pazienti saranno idonei per una nuova resezione e valutazione di TIL da un sito diverso.