Zmodyfikowane limfocyty naciekające guz w przypadku przerzutowego czerniaka

Tło:

• Podawanie limfocytów naciekających guz (TIL) i interleukiny w dużych dawkach (IL)-2 po limfodeplecji może pośredniczyć w trwałych całkowitych odpowiedziach u pacjentów z opornym na leczenie czerniakiem. Przeszkody w podawaniu tej terapii obejmują brak ustalenia TIL in vitro u około 20% pacjentów, duże opóźnienia między resekcją guza a ustaleniem TIL skutkujące złymi cechami TIL do terapii i niekwalifikacją pacjenta z powodu progresji oraz wymagania dotyczące dużej liczby komórek odżywczych dla ekspansji TIL do liczb terapeutycznych.
• Linię komórkową K562 zaprojektowano tak, aby eksprymowała cząsteczkę kostymulującą 4-1BBL i CD64 (receptor Fc o wysokim powinowactwie do obciążania przeciwciałami, takimi jak OKT3). K562.CD64.4-1BBL Engineered Cells with Costimulation Enhancement (ECCE) zastąpiło do 75% komórek zasilających w rozszerzeniach TIL na dużą skalę. ECCE dodany do zawiesin komórek nowotworowych zapewniał kostymulację trans, co skutkowało szybkim i niezawodnym wzrostem limfocytów nawet z guzów bez wzrostu TIL w standardowych warunkach.
• Sklonowany K562.CD64.4-1BBL-7F11 Linia ECCE została wyprodukowana zgodnie z warunkami Dobrej Praktyki Wytwarzania (GMP) i wygenerowano główny bank komórek. Ustanowiono zoptymalizowany protokół, aby szybko rozwinąć (REP) młody TIL przy użyciu minimalnych podajników i 7F11. Te ECCE REPed TIL zachowały rozpoznawanie guza i niektóre inne cechy standardowego TIL, ale różniły się od standardowego TIL tym, że zawierały mniej komórek CD4 + i więcej komórek NK.

Gdy 7F11ECCE dodano bezpośrednio do zawiesin pojedynczych komórek nowotworowych, młode hodowle TIL były niezawodnie generowane nawet od pacjentów, którzy w przeciwnym razie nie mieliby standardowej hodowli młodych TIL do leczenia.

Cele:

Główne cele:

• W kohorcie 1, aby ocenić, czy młode TIL, które są szybko namnażane przy użyciu 7F11 ECCE w celu zastąpienia niektórych komórek odżywczych i podawane z IL-2 pacjentom stosującym schemat kondycjonowania bez mieloablacji, spowodują kliniczną regresję guza u pacjentów z opornym na leczenie czerniakiem z przerzutami.
• W Kohorcie 2, aby ocenić, czy młody TIL wygenerowany przy użyciu kostymulacji trans z 7F11 ECCE u pacjentów, u których standardowy młody TIL nie rósł, może pośredniczyć w regresji guza po niemieloablacyjnym kondycjonowaniu z dużą dawką IL-2 u pacjentów z opornym na leczenie czerniakiem z przerzutami.
• Określenie toksyczności ECCE młodych TIL w tych schematach leczenia

Uprawnienia:

Pacjenci w wieku 18 lat lub starsi muszą mieć:

• czerniak z przerzutami;
• Stan sprawności Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) 0 lub 1
• Jedna lub więcej zmian o średnicy 2 cm lub większej odpowiednich do resekcji do hodowli TIL

Pacjenci mogą nie mieć:

• Współistniejące poważne choroby medyczne;
• Jakakolwiek forma niedoboru odporności;
• Ciężka nadwrażliwość na którykolwiek ze środków stosowanych w tym badaniu;
• Przeciwwskazania do podania dużych dawek IL-2.

Projekt:

• Pacjenci zostaną poddani resekcji w celu uzyskania guza do wytworzenia autologicznych młodych kultur TIL.
• Równoległe hodowle TIL zostaną ustanowione przy użyciu a) standardowej techniki tylko z IL-2 i b) protokołu Engineered Cells with Costimulation Enhancement (ECCE) z użyciem napromieniowanego K562.CD64.4-1BBL-7F11 (7F11) komórki.
• Po 10 do 20 dniach kultury zostaną poddane ocenie pod kątem założenia TIL. Standardowy TIL będzie stosowany preferencyjnie, a pacjenci, u których TIL ustalono standardowymi metodami, zostaną przydzieleni do Kohorty 1

• Kohorta 1:

  • TIL przejdzie ECCE REP przez ekspozycję na OKT-3, IL-2, komórki odżywcze i napromieniowane 7F11.
  • Pacjenci otrzymają cyklofosfamid (60 mg/kg mc./dobę dożylnie (iv.)) w dniach -7 i -6 oraz fludarabinę (25 mg/m^2/dobę iv.) w dniach od -5 do -1.
  • W dniu 0 pacjenci otrzymają wlew autologicznego młodego TIL, a następnie rozpoczną podawanie dużych dawek aldesleukiny (720 000 IU/kg IV co 8 godzin przez maksymalnie 15 dawek).
  • Odpowiedź kliniczna i immunologiczna zostanie oceniona po około 4-6 tygodniach od leczenia.
  • Stosując optymalny dwuetapowy projekt fazy II, początkowo włączonych zostanie 18 pacjentów, a jeśli trzech lub więcej z pierwszych 18 pacjentów uzyska odpowiedź kliniczną (odpowiedź częściowa (PR) lub odpowiedź całkowita (CR)), naliczanie będzie kontynuowane do 35 pacjentów, dążąc do uzyskania obiektywnej odpowiedzi na poziomie 30%.
• Jeśli standardowa młoda TIL nie wzrośnie, wówczas ECCE młoda TIL zostanie oceniona, a pacjenci, którzy mają dostępny ECCE TIL, zostaną przydzieleni do kohorty 2.

• Kohorta 2:

  • Hodowle od pacjentów z Kohorty 2 zostaną ocenione pod kątem ustanowienia ECCE TIL. Jeśli dostępne są odpowiednie ECCE TIL, TIL przejdzie ECCE REP przez ekspozycję na OKT-3, IL-2, komórki odżywcze i napromieniowane 7F11.
  • Pacjenci otrzymają cyklofosfamid (60 mg/kg/dzień IV) w dniach -7 i -6 oraz fludarabinę (25 mg/m^2/dzień IV) w dniach -5 do -1.
  • W dniu 0 pacjenci otrzymają wlew autologicznego młodego TIL, a następnie rozpoczną podawanie dużych dawek aldesleukiny (720 000 IU/kg IV co 8 godzin przez maksymalnie 15 dawek).
  • Odpowiedź kliniczna i immunologiczna zostanie oceniona około 4-6 tygodni po infuzji TIL.
  • Wykorzystując mały, optymalny, dwuetapowy projekt fazy II, początkowo włączonych zostanie 9 pacjentów, a jeśli u jednego lub więcej z pierwszych 9 pacjentów wystąpi odpowiedź kliniczna (PR lub CR), gromadzenie będzie kontynuowane do 24 pacjentów, celując w 25% za obiektywną odpowiedź.
• Jeśli hodowle TIL nie zostały ustalone za pomocą standardowych metod lub protokołów ECCE Young TIL, pacjenci będą kwalifikować się do ponownej resekcji i oceny TIL z innego miejsca.