Purasruoho- ja Echium-siemenöljyt astmaan (Borage)

Arvioidaksemme mekanismeja, joilla purasruohonsiemenöljy ja echium-siemenöljy estävät välittäjän muodostumista astmassa, suoritimme ristikkäisen kokeen vähentääksemme tutkimukseen tarvittavien potilaiden määrää. Kukin hoitojakso oli kuusi viikkoa ja kuuden viikon pesujakso. Yksinkertaisuuden vuoksi kaikki teholaskelmat tehdään olettamalla yksi tekijä tai ennustajamuuttuja ja yksi tulos tai tulosmuuttuja. Keskityimme muutoksiin efektorisolujen välittäjäainemuodostuksessa. Alla olevat laskelmat viittaavat siihen, että pystymme poimimaan mahdollisesti tärkeiden selittävien muuttujien kliinisesti merkitykselliset vaikutukset hyväksyttävällä tai suurella teholla.

1. Tutkimuksen suunnittelu Tavoitteena oli tutkia mekanismeja, jotka ovat taustalla purasruohonsiemenöljyn ja echium-siemenöljyn vaikutuksille efektorileukosyyttien proinflammatoriseen välittäjäainetuotantoon.

Hoitoryhmässä koehenkilöt söivät 4,0 g/vrk purasruohonsiemenöljyä ja 7,0 g/vrk echium-siemenöljyä (sisältää yhteensä noin 1,6 g/päivä GLA:ta ja ~0,9 g/päivä SDA:ta). Öljyt pakattiin kapseleihin, joista jokainen sisälsi 1 gramman öljyä. Siksi koehenkilöt nielevät 10 kapselia päivässä (3 aamulla, 3 iltapäivällä ja 4 illalla) aterioiden yhteydessä. Lumeryhmässä koehenkilöt ottivat vastaavia maissiöljyä sisältäviä kapseleita; kolme 1 gramman kapselia aamulla ja iltapäivällä ja neljä illalla aterioiden yhteydessä.

Tutkimus alkoi seulontakäynnillä. Kaikilla koehenkilöillä oli lääkärin diagnosoima astma. Kaikki suorittivat perussarjan keuhkojen toimintamittauksia. He aloittivat 2 viikon sisäänajojakson, jonka aikana he pitivät päiväkirjaa huippuvirroista, astman oireista ja beeta-agonistien käytöstä. Koehenkilöitä opastettiin huippuvirtaustekniikassa ja heitä pyydettiin suorittamaan kolme liikettä joka kerta. Manööverin katsottiin teknisesti riittäväksi, jos kolmella yrityksellä saatujen arvojen vaihtelu on 10 % keskenään ja suurin arvo kirjattiin päiväkirjaan. Koehenkilöt, joiden päiväkirjat olivat yli 80 % täydellisiä, osallistuivat tutkimukseen ja heidät määrättiin satunnaisesti aktiiviseen hoitoon tai lumelääkkeeseen. Spirometria toistettiin. Veri otettiin plasman ja leukosyyttien rasvahappokoostumuksen, LT-sukupolven ja DNA:n genotyypin määrittämiseksi LTC4S-lokuksesta. Koehenkilöille annettiin huippuvirtauspäiväkirjat, heille annettiin ohjeita asianmukaisista suorituksista tai huippuvirtausliikkeistä, ja niitä pyydettiin kirjaamaan aamu- ja iltahuippuvirtaus joka päivä (heijastaen parasta kolmesta yrityksestä joka kerta). Kolmen viikon hoidon jälkeen päiväkirjakortit kerätään ja spirometria toistetaan. Kuuden viikon hoidon jälkeen otettiin verinäyte turvallisuusseurantaa, plasman ja leukosyyttien rasvahappojen mittaamista sekä toiminnallisia analyysejä varten. Spirometria toistettiin. Koehenkilöt aloittivat sitten kuuden viikon pesujakson. Kaksi viikkoa ennen tämän ajanjakson päättymistä he alkoivat jälleen pitää päiväkirjakortteja. 6 viikon huuhtoutumisjakson päätyttyä he siirtyivät jakohoitovaiheeseen (kuusi viikkoa), joka noudatti samaa protokollaa kuin ensimmäinen hoitojakso, jossa arvioitiin rasvahappoanalyysit, solujen toimintatutkimukset, turvallisuusseuranta ja spirometria. Raskaustesti tehtiin ennen jokaista hoitojaksoa ja sen jälkeen. Meijerikortit (huippuvirtauksen seurantatuloksilla) kerätään jokaisella käynnillä (3 viikon välein tutkimuksen lumelääkkeen ja aktiivisen hoidon aikana).

3. Tilastolliset analyysit

a. Teholaskelmat - Yksinkertaisuuden vuoksi kaikki teholaskelmat on tehty olettamalla yksi tekijä tai ennustajamuuttuja ja yksi tulos tai tulosmuuttuja. Vaikka useita korreloivia tuloksia tutkitaan, keskitymme muutoksiin välittäjien muodostumisessa ja entsyymien ilmentymisen tasoissa. Alla olevat laskelmat viittaavat siihen, että pystymme poimimaan mahdollisesti tärkeiden selittävien muuttujien kliinisesti merkitykselliset vaikutukset hyväksyttävällä tai suurella teholla.

i. Biokemialliset päätepisteet - Power perustuu parillisiin t-testeihin, joissa verrataan jatkuvia vastemittauksia hoidon ja lumelääkkeen välillä. Oletamme, että 40 koehenkilöä on käytettävissä sen jälkeen, kun on otettu huomioon 20 %:n keskeyttämisaste alkuperäisestä 50 kohteen otoksestamme. Leukosyyttien aiheuttaman leukotrieenituotannon päätepisteen osalta teholaskelmat ehdottivat, että meillä on 80 %:n kyky havaita todellinen yksilön sisäinen ero, joka on 0,8 yksilön sisäisestä SD:stä hoidon ja lumelääkkeen välillä α-arvolla 0/05. Aiempien tutkimuksiemme perusteella oletamme LTC4-sukupolvelle subjektin sisäiseksi variaatiokertoimeksi (CV) 13 %. Tämä tarkoittaa likimääräistä havaittavissa olevaa eroa 10,5 %:sta näissä parametreissa. Parillisen kaksipuolisen t-testin ja lumelääkettä aiemman keskihajonnan (keskihajonnan) arviot ovat 0,001464 (.002268) ja purasruohoöljylle .000289( .000709) , tarvitsisimme 40 koehenkilöä 80-90 % tehoon 0,05:n merkitsevyystasolla havaitaksemme LTC4S-transkriptin, proteiinin ja 50 %:n entsymaattisen aktiivisuuden muutoksen lume- ja purasruohohaareiden välillä.

b. Analyysisuunnitelma - Aluksi esitämme kuvaavat tilastot (keskiarvo, keskihajonta, vaihteluväli) kaikista päätepisteistä hoito- ja lumelääkeryhmille. Esitämme myös graafiset kaaviot kaikista tutkimuksista ja jokaisesta ryhmästä kunkin ajanjakson aikana. 2x2 crossover -tutkimuksessa vertaamme hoitoa ja kontrollia jokaisessa päätepisteessä erikseen käyttämällä yleistettyä sekamallin lähestymistapaa ennustajien kanssa: ryhmä (sekvenssi), potilas sisäkkäin ryhmän sisällä satunnaisena vaikutuksena, jakso (dikotomisinen), hoito (dikotomisinen). ) ja kausiluonteisuus (dikotomistinen), rakenteettoman kovarianssin kanssa. Käytämme sekamallidiagnostiikkaa, kuten jäännösdiagnostiikkaa, sopivuuden arvioimiseen.