Borage og Echium frøoljer for astma (Borage)

For å evaluere mekanismene som boragefrøolje og echiumfrøolje blokkerer mediatorgenerering ved astma, utførte vi en cross-over-forsøksdesign for å redusere antallet pasienter som trengs for studien. Hver behandlingsperiode var seks uker med en seks ukers utvaskingsperiode. For enkelhets skyld gjøres alle potensberegninger ved å anta en enkelt faktor eller prediktorvariabel og en enkelt resultat- eller utfallsvariabel. Vi fokuserte på endringer i mediatorgenerering av effektorceller. Beregningene nedenfor antyder at vi har beslutning om å fange opp klinisk meningsfulle effekter av potensielt viktige forklaringsvariabler med akseptabel eller høy effekt.

1. Studiedesign Målet var å undersøke mekanismene som ligger til grunn for effekten av boragefrøolje og echiumfrøolje på proinflammatorisk mediatorproduksjon av effektorleukocytter.

I behandlingsarmen konsumerte forsøkspersonene 4,0 g/dag boragefrøolje og 7,0 g/dag echiumfrøolje (som inneholdt totalt ~1,6 g/dag av GLA og ~0,9 g/dag av SDA). Oljene ble pakket i kapsler som hver inneholdt 1 gram olje. Derfor vil forsøkspersonene innta 10 kapsler om dagen (3 om morgenen, 3 om ettermiddagen og 4 om kvelden) med måltider. I placebo-armen tok forsøkspersonene matchende kapsler som inneholdt maisolje; tre 1 grams kapsler om morgenen og ettermiddagen, og fire om kvelden, med måltider.

Studien startet med et screeningbesøk. Alle forsøkspersoner hadde legediagnostisert astma. Alle utførte et baseline-sett med lungefunksjonsmålinger. De gikk inn i en 2-ukers innkjøringsperiode der de førte dagbok over toppstrømmer, astmasymptomer og bruk av beta-agonister. Forsøkspersonene ble instruert i peak flow-teknikk og bedt om å utføre tre manøvrer hver gang. Manøveren ble ansett som teknisk tilstrekkelig dersom variasjonen i verdiene oppnådd på de tre forsøkene er med 10 % av hverandre, og den høyeste verdien ble registrert i en dagbok. Forsøkspersoner hvis dagbøker var > 80 % komplette deltok i studien og ble tilfeldig tildelt aktiv behandling eller placebo. Spirometri ble gjentatt. Blod ble tatt for fettsyresammensetning av plasma og leukocytter, LT-generering og DNA for genotyping på LTC4S-lokuset. Forsøkspersonene ble utstyrt med peak flow dagbøker, instruert i passende ytelse eller peak flow manøvrer, og bedt om å registrere morgen og kveld topp flow hver dag (som gjenspeiler det beste av tre innsats hver gang). Etter tre ukers behandling vil dagbokkort bli samlet inn og spirometri gjentatt. Etter seks ukers behandling ble det tatt blod for sikkerhetsovervåking, for målinger av fettsyrer i plasma og leukocytter, og for funksjonsanalysene. Spirometri ble gjentatt. Forsøkspersonene gikk deretter inn i en seks ukers utvaskingsperiode. To uker før slutten av denne perioden begynte de igjen å føre dagbokkort. Ved avslutningen av den 6 uker lange utvaskingsperioden gikk de inn i kryssbehandlingsfasen (seks uker) som fulgte samme protokoll som den første behandlingsperioden med vurdering av fettsyreanalyser, cellulære funksjonsstudier, sikkerhetsovervåking og spirometri. Graviditetstesting ble utført før og etter hver behandlingsperiode. Meierikort (med resultater for peak flow monitoring) vil bli samlet inn ved hvert besøk (3 ukers intervaller under studiens placebo og aktive behandlingsarmer).

3. Statistiske analyser

en. Effektberegninger - For enkelhets skyld gjøres alle potensberegninger ved å anta en enkelt faktor eller prediktorvariabel og en enkelt resultat- eller utfallsvariabel. Mens en rekke korrelerte utfall vil bli undersøkt, vil vi fokusere på endringer i mediatorgenerering og nivåer av enzymuttrykk. Beregningene nedenfor antyder at vi har beslutning om å fange opp klinisk meningsfulle effekter av potensielt viktige forklaringsvariabler med akseptabel eller høy effekt.

Jeg. Biokjemiske endepunkter - Power er basert på sammenkoblede t-tester som sammenligner kontinuerlige mål på respons mellom behandling og placebo. Vi antar at 40 forsøkspersoner vil være tilgjengelige etter å ha tillatt en frafallsrate på 20 % fra vårt opprinnelige utvalg på 50 emner. For endepunktet for leukotrienproduksjon av leukocytter, antydet kraftberegningene at vi vil ha 80 % kraft til å oppdage en sann forskjell innen-subjektet på 0,8 av innen-subjekt SD mellom behandling og placebo med en α-verdi på 0/05. På grunnlag av våre tidligere studier antar vi en variasjonskoeffisient innen fag (CV) på 13 % for LTC4-generering. Dette vil oversettes til en omtrentlig detekterbar forskjell fra 10,5 % i disse parameterne. Ved å bruke en paret tosidig t-test og tidligere gjennomsnitt (standardavvik) estimater for placebo på 0,001464 ( .002268) og for borageoljen på .000289( .000709) , ville vi trenge 40 forsøkspersoner for 80-90 % kraft ved et signifikansnivå på 0,05 for å oppdage en endring i LTC4S-transkript, protein og enzymatisk aktivitet på 50 % mellom placebo- og boragearmer.

b. Analyseplan - I første omgang vil vi presentere beskrivende statistikk (gjennomsnitt, standardavvik, rekkevidde) for alle endepunkter til behandling og placebogrupper. Vi vil også presentere grafiske plott av alle tiltak på tvers av studien og for hver gruppe innenfor hver periode. For 2x2 crossover-studien vil vi sammenligne behandlingen og kontrollen på hvert endepunkt separat ved å bruke en generalisert blandet modelltilnærming med prediktorene: gruppe(sekvens), pasient nestet i gruppen som en tilfeldig effekt, periode(dikotom), behandling(dikotom). ), og sesongvariasjoner (dikotom), med ustrukturert kovarians. Vi vil bruke blandet modelldiagnostikk som gjenværende plott for å vurdere god passform.