Borage og Echium frøolie til astma (Borage)

For at evaluere de mekanismer, hvorved boragefrøolie og echiumfrøolie blokerer mediatorgenerering i astma, udførte vi et cross-over-forsøgsdesign for at reducere antallet af patienter, der er nødvendige for undersøgelsen. Hver behandlingsperiode var seks uger med en udvaskningsperiode på seks uger. For overskuelighedens skyld er alle effektberegninger lavet under antagelse af en enkelt faktor eller prædiktorvariabel og en enkelt resultat- eller udfaldsvariabel. Vi fokuserede på ændringer i mediatorgenerering af effektorceller. Nedenstående beregninger tyder på, at vi har beslutning om at opfange klinisk meningsfulde effekter af potentielt vigtige forklaringsvariable med acceptabel eller høj effekt.

1. Studiedesign Målet var at undersøge de mekanismer, der ligger til grund for virkningerne af boragefrøolie og echiumfrøolie på proinflammatorisk mediatorproduktion af effektorleukocytter.

I behandlingsarmen indtog forsøgspersonerne 4,0 g/dag boragefrøolie og 7,0 g/dag echiumfrøolie (indeholdende i alt ~1,6 g/dag af GLA og ~0,9 g/dag af SDA). Olierne blev pakket i kapsler, som hver indeholdt 1 gram olie. Derfor vil forsøgspersoner indtage 10 kapsler om dagen (3 om morgenen, 3 om eftermiddagen og 4 om aftenen) med måltider. I placeboarmen tog forsøgspersonerne matchende kapsler indeholdende majsolie; tre 1 gram kapsler om morgenen og eftermiddagen, og fire om aftenen, med måltider.

Undersøgelsen begyndte med et screeningsbesøg. Alle forsøgspersoner havde lægediagnosticeret astma. Alle udførte et baseline sæt af lungefunktionsmålinger. De gik ind i en 2-ugers indkøringsperiode, hvor de førte en dagbog over peak flows, astmasymptomer og brug af beta-agonister. Forsøgspersonerne blev instrueret i peak flow-teknik og bedt om at udføre tre manøvrer hver gang. Manøvren blev anset for teknisk tilstrækkelig, hvis variationen i de opnåede værdier ved de tre forsøg er med 10 % af hinanden, og den højeste værdi blev registreret i en dagbog. Forsøgspersoner, hvis dagbøger var > 80 % komplette, deltog i undersøgelsen og blev tilfældigt tildelt aktiv behandling eller placebo. Spirometri blev gentaget. Der blev taget blod for fedtsyresammensætning af plasma og leukocytter, LT-generering og DNA til genotypebestemmelse på LTC4S-locuset. Forsøgspersonerne blev forsynet med peak flow-dagbøger, instrueret i den passende ydeevne eller peak flow-manøvrer og bedt om at registrere morgen- og aften peak flow hver dag (hvilket afspejler det bedste af tre indsatser hver gang). Efter tre ugers behandling vil dagbogskort blive indsamlet og spirometri gentaget. Efter seks ugers behandling blev der udtaget blod til sikkerhedsovervågning, til målinger af fedtsyrer i plasma og leukocytter og til funktionsanalyserne. Spirometri blev gentaget. Forsøgspersonerne gik derefter ind i en seks ugers udvaskningsperiode. To uger før udløbet af denne periode begyndte de igen at føre dagbogskort. Ved afslutningen af ​​den 6-ugers udvaskningsperiode gik de ind i cross-over-behandlingsfasen (seks uger), som fulgte samme protokol som den første behandlingsperiode med vurdering af fedtsyreanalyser, cellulære funktionsundersøgelser, sikkerhedsmonitorering og spirometri. Graviditetstest blev udført før og efter hver behandlingsperiode. Mejerikort (med peak flow monitoreringsresultater) vil blive indsamlet ved hvert besøg (3 ugers intervaller under studiets placebo og aktive behandlingsarme).

3. Statistiske analyser

en. Effektberegninger - For nemheds skyld er alle effektberegninger lavet under antagelse af en enkelt faktor eller prædiktorvariabel og en enkelt resultat- eller udfaldsvariabel. Mens en række korrelerede resultater vil blive undersøgt, vil vi fokusere på ændringer i mediatorgenerering og niveauer af enzymekspression. Nedenstående beregninger tyder på, at vi har beslutning om at opfange klinisk meningsfulde effekter af potentielt vigtige forklaringsvariable med acceptabel eller høj effekt.

jeg. Biokemiske endepunkter - Power er baseret på parrede t-tests, der sammenligner kontinuerlige mål for respons mellem behandling og placebo. Vi antager, at 40 forsøgspersoner vil være tilgængelige efter at have tilladt en frafaldsrate på 20 % fra vores oprindelige prøve på 50 forsøgspersoner. For endepunktet for leukotrienproduktion af leukocytter antydede styrkeberegningerne, at vi vil have 80 % kraft til at detektere en sand intern forskel på 0,8 af SD inden for patienten mellem behandling og placebo med en α-værdi på 0/05. På grundlag af vores tidligere undersøgelser antager vi en variationskoefficient inden for emnet (CV) på 13% for LTC4-generering. Dette vil oversætte til en omtrentlig detekterbar forskel fra 10,5 % i disse parametre. Ved brug af en parret tosidet t-test og tidligere middelværdi(standardafvigelse) estimater for placebo på 0,001464 ( .002268) og for borageolie på .000289( .000709) , ville vi have brug for 40 forsøgspersoner for 80-90 % kraft ved et signifikansniveau på 0,05 for at detektere en ændring i LTC4S-transkript, protein og enzymatisk aktivitet på 50 % mellem placebo- og boragearme.

b. Analyseplan - Indledningsvis vil vi præsentere beskrivende statistik (middelværdi, standardafvigelse, interval) for alle endepunkter til behandling og placebogrupper. Vi vil også præsentere grafiske plot af alle mål på tværs af undersøgelsen og for hver gruppe inden for hver periode. Til 2x2 crossover-undersøgelsen vil vi sammenligne behandlingen og kontrollen på hvert endepunkt separat ved at anvende en generaliseret blandet modeltilgang med prædiktorerne: gruppe(sekvens), patient indlejret i gruppen som en tilfældig effekt, periode(dikotom), behandling(dikotom). ), og sæsonbestemt (dikotom), med ustruktureret kovarians. Vi vil bruge blandet modeldiagnostik såsom restplot til at vurdere god pasform.