Bernagie- en Echium-zaadolie voor astma (Borage)

Om de mechanismen te evalueren waarmee bernagiezaadolie en echiumzaadolie de generatie van mediatoren bij astma blokkeren, hebben we een cross-over proefontwerp uitgevoerd om het aantal patiënten dat nodig is voor het onderzoek te verminderen. Elke behandelingsperiode was zes weken met een uitwasperiode van zes weken. Voor de eenvoud worden alle vermogensberekeningen gemaakt uitgaande van een enkele factor of voorspellende variabele en een enkel resultaat of uitkomstvariabele. We hebben ons gericht op veranderingen in het genereren van mediatoren door effectorcellen. De onderstaande berekeningen suggereren dat we de resolutie hebben om klinisch betekenisvolle effecten van mogelijk belangrijke verklarende variabelen op te pikken met een acceptabel of hoog vermogen.

1. Onderzoeksopzet De doelen waren het onderzoeken van de mechanismen die ten grondslag liggen aan de effecten van bernagiezaadolie en echiumzaadolie op de pro-inflammatoire mediatorproductie door effectorleukocyten.

In de behandelingsarm consumeerden proefpersonen 4,0 g/dag bernagiezaadolie en 7,0 g/dag echiumzaadolie (met in totaal ~1,6 g/dag GLA en ~0,9 g/dag SDA). De oliën waren verpakt in capsules die elk 1 gram olie bevatten. Daarom zullen proefpersonen 10 capsules per dag innemen (3 's ochtends, 3 's middags en 4 's avonds) bij de maaltijd. In de placebo-arm namen proefpersonen bijpassende capsules met maïsolie; drie capsules van 1 gram 's ochtends en 's middags en vier 's avonds bij de maaltijd.

Het onderzoek begon met een screeningsbezoek. Alle proefpersonen hadden door een arts gediagnosticeerd astma. Allen voerden een basisset van longfunctiemetingen uit. Ze gingen een inloopperiode van 2 weken in waarin ze een dagboek bijhielden van piekstromen, astmasymptomen en gebruik van bèta-agonisten. De proefpersonen werden geïnstrueerd in de piekstroomtechniek en gevraagd om telkens drie manoeuvres uit te voeren. De manoeuvre werd technisch voldoende geacht als de variatie in de verkregen waarden bij de drie pogingen 10% van elkaar bedroeg en de hoogste waarde werd genoteerd in een dagboek. Proefpersonen van wie de dagboeken voor > 80% compleet waren, namen deel aan het onderzoek en werden willekeurig toegewezen aan actieve behandeling of placebo. Spirometrie werd herhaald. Er werd bloed afgenomen voor vetzuursamenstelling van plasma en leukocyten, LT-generatie en DNA voor genotypering op de LTC4S-locus. De proefpersonen kregen piekstroomdagboeken, werden geïnstrueerd in de juiste uitvoerings- of piekstroommanoeuvres en werden gevraagd om elke dag de ochtend- en avondpiekstroom op te nemen (elke keer als weerspiegeling van de beste van drie inspanningen). Na drie weken behandeling worden dagboekkaarten verzameld en spirometrie herhaald. Na zes weken behandeling werd bloed afgenomen voor veiligheidsbewaking, voor metingen van vetzuren in plasma en leukocyten, en voor de functionele analyses. Spirometrie werd herhaald. De proefpersonen gingen vervolgens een uitwasperiode van zes weken in. Twee weken voor het einde van deze periode begonnen ze weer met het bijhouden van dagboekkaarten. Aan het einde van de uitwasperiode van zes weken begonnen ze aan de cross-overbehandelingsfase (zes weken) die hetzelfde protocol volgde als de eerste behandelingsperiode met beoordeling van vetzuuranalyses, cellulaire functiestudies, veiligheidsmonitoring en spirometrie. Voor en na elke behandelingsperiode werden zwangerschapstesten uitgevoerd. Zuivelkaarten (met resultaten van monitoring van de piekstroom) zullen bij elk bezoek worden verzameld (intervallen van 3 weken tijdens de placebo- en actieve behandelingsarmen van het onderzoek).

3. Statistische analyses

A. Vermogensberekeningen - Voor de eenvoud worden alle vermogensberekeningen gemaakt uitgaande van een enkele factor of voorspellende variabele en een enkel resultaat of uitkomstvariabele. Hoewel een aantal gecorreleerde uitkomsten zullen worden onderzocht, zullen we ons concentreren op veranderingen in mediatorgeneratie en niveaus van enzymexpressie. De onderstaande berekeningen suggereren dat we de resolutie hebben om klinisch betekenisvolle effecten van mogelijk belangrijke verklarende variabelen op te pikken met een acceptabel of hoog vermogen.

i. Biochemische eindpunten - Power is gebaseerd op gepaarde t-tests die continue metingen van respons tussen behandeling en placebo vergelijken. We gaan ervan uit dat er 40 proefpersonen beschikbaar zullen zijn na rekening te hebben gehouden met een uitvalpercentage van 20% van onze oorspronkelijke steekproef van 50 proefpersonen. Voor het eindpunt van leukotrieenproductie door leukocyten suggereerden de powerberekeningen dat we 80% power zullen hebben om een ​​echt verschil binnen de proefpersoon te detecteren van 0,8 van de SD binnen de proefpersoon tussen behandeling en placebo met een α-waarde van 0/05. Op basis van onze eerdere studies gaan we uit van een variatiecoëfficiënt (CV) binnen het onderwerp van 13% voor het genereren van LTC4. Dit zal zich vertalen in een bij benadering detecteerbaar verschil van 10,5% in deze parameters. Met behulp van een gepaarde tweezijdige t-test en eerdere gemiddelde (standaarddeviatie) schattingen voor de placebo van 0,001464 ( .002268) en voor de bernagieolie van .000289( .000709) , zouden we 40 proefpersonen nodig hebben voor 80-90% vermogen bij een significantieniveau van 0,05 om een ​​verandering in LTC4S-transcript, eiwit en enzymatische activiteit van 50% tussen placebo- en borage-armen te detecteren.

B. Analyseplan - In eerste instantie zullen we beschrijvende statistieken (gemiddelde, standaarddeviatie, bereik) voor alle eindpunten aan behandelings- en placebogroepen presenteren. We zullen ook grafische plots presenteren van alle maatregelen in het onderzoek en voor elke groep binnen elke periode. Voor de 2x2 crossover-studie zullen we de behandeling en controle op elk eindpunt afzonderlijk vergelijken door gebruik te maken van een gegeneraliseerde gemengde modelbenadering met de voorspellers: groep (volgorde), patiënt binnen groep genest als een willekeurig effect, periode (dichotoom), behandeling (dichotoom ), en seizoensgebondenheid (dichotoom), met ongestructureerde covariantie. We zullen diagnostiek met gemengd model gebruiken, zoals residuplots, om de geschiktheid te beoordelen.