Oleje z nasion ogórecznika i żmijowca na astmę (Borage)

Aby ocenić mechanizmy, za pomocą których olej z nasion ogórecznika i olej z nasion żmijowca blokują generowanie mediatorów w astmie, przeprowadziliśmy projekt próby krzyżowej, aby zmniejszyć liczbę pacjentów potrzebnych do badania. Każdy okres leczenia wynosił sześć tygodni z sześciotygodniowym okresem wypłukiwania. Dla uproszczenia wszystkie obliczenia mocy są wykonywane przy założeniu pojedynczej zmiennej czynnikowej lub predykcyjnej oraz pojedynczej zmiennej wynikowej lub wynikowej. Skupiliśmy się na zmianach w generacji mediatorów przez komórki efektorowe. Poniższe obliczenia sugerują, że jesteśmy w stanie wychwycić klinicznie znaczące efekty potencjalnie ważnych zmiennych objaśniających z akceptowalną lub wysoką mocą.

1. Projekt badania Celem było zbadanie mechanizmów leżących u podstaw wpływu oleju z nasion ogórecznika i oleju z nasion żmijowca na wytwarzanie mediatorów prozapalnych przez leukocyty efektorowe.

W grupie leczonej badani spożywali 4,0 g dziennie oleju z nasion ogórecznika lekarskiego i 7,0 g dziennie oleju z nasion żmijowca (zawierających łącznie ~1,6 g GLA dziennie i ~0,9 g SDA dziennie). Oleje zapakowano w kapsułki, z których każda zawierała 1 gram oleju. Dlatego pacjenci będą spożywać 10 kapsułek dziennie (3 rano, 3 po południu i 4 wieczorem) z posiłkami. W ramieniu placebo badani przyjmowali pasujące kapsułki zawierające olej kukurydziany; trzy kapsułki 1 gramowe rano i po południu oraz cztery wieczorem podczas posiłków.

Badanie rozpoczęło się wizytą przesiewową. Wszyscy pacjenci mieli zdiagnozowaną przez lekarza astmę. Wszyscy wykonali podstawowy zestaw pomiarów funkcji płuc. Weszli w 2-tygodniowy okres docierania, podczas którego prowadzili dziennik przepływów szczytowych, objawów astmy i stosowania beta-agonistów. Badanych poinstruowano w technice szczytowego przepływu i poproszono o wykonanie trzech manewrów za każdym razem. Manewr uznano za technicznie wystarczający, jeżeli zmienność wartości uzyskanych w trzech próbach wynosiła 10%, a najwyższą wartość odnotowywano w dzienniczku. Pacjenci, których dzienniczki były kompletne w > 80%, weszli do badania i zostali losowo przydzieleni do grupy aktywnego leczenia lub placebo. Powtórzono spirometrię. Pobrano krew pod kątem składu kwasów tłuszczowych w osoczu i leukocytach, generacji LT i DNA do genotypowania w locus LTC4S. Osobnikom dostarczono dzienniki szczytowego przepływu, poinstruowano ich, jak wykonać odpowiednie manewry lub manewry szczytowego przepływu, i poproszono o rejestrowanie porannego i wieczornego szczytowego przepływu każdego dnia (za każdym razem odzwierciedlając najlepszy z trzech wysiłków). Po trzech tygodniach leczenia zostaną zebrane karty dzienniczka i powtórzona spirometria. Po sześciu tygodniach leczenia pobrano krew do monitorowania bezpieczeństwa, do pomiarów kwasów tłuszczowych w osoczu i leukocytach oraz do analiz czynnościowych. Powtórzono spirometrię. Następnie badani weszli w sześciotygodniowy okres wymywania. Na dwa tygodnie przed końcem tego okresu ponownie zaczęto prowadzić dzienniczki. Po zakończeniu 6-tygodniowego okresu wypłukiwania pacjenci weszli w fazę leczenia krzyżowego (sześć tygodni), która przebiegała zgodnie z tym samym protokołem, co w pierwszym okresie leczenia, z oceną analiz kwasów tłuszczowych, badaniami funkcji komórkowych, monitorowaniem bezpieczeństwa i spirometrią. Testy ciążowe wykonywano przed i po każdym okresie leczenia. Karty produktów mlecznych (z wynikami monitorowania przepływu szczytowego) będą zbierane podczas każdej wizyty (w 3-tygodniowych odstępach podczas grupy placebo i aktywnego leczenia w ramach badania).

3. Analizy statystyczne

A. Obliczenia mocy — dla uproszczenia wszystkie obliczenia mocy są wykonywane przy założeniu pojedynczej zmiennej czynnikowej lub predykcyjnej oraz pojedynczej zmiennej wynikowej lub wynikowej. Chociaż zbadanych zostanie wiele skorelowanych wyników, skupimy się na zmianach w wytwarzaniu mediatorów i poziomach ekspresji enzymów. Poniższe obliczenia sugerują, że jesteśmy w stanie wychwycić klinicznie znaczące efekty potencjalnie ważnych zmiennych objaśniających z akceptowalną lub wysoką mocą.

I. Biochemiczne punkty końcowe — moc opiera się na sparowanych testach t porównujących ciągłe pomiary odpowiedzi między leczeniem a placebo. Zakładamy, że 40 osób będzie dostępnych po uwzględnieniu 20% wskaźnika rezygnacji z naszej pierwotnej próby 50 osób. W przypadku punktu końcowego wytwarzania leukotrienów przez leukocyty obliczenia mocy sugerowały, że będziemy mieli 80% mocy do wykrycia prawdziwej różnicy wewnątrzosobniczej wynoszącej 0,8 SD wewnątrzosobniczego między leczeniem a placebo z wartością α równą 0/05. Na podstawie naszych poprzednich badań zakładamy wewnątrzobiektowy współczynnik zmienności (CV) na poziomie 13% dla generacji LTC4. Przełoży się to na przybliżoną wykrywalną różnicę w tych parametrach w porównaniu z 10,5%. Wykorzystując sparowany dwustronny test t i wcześniejsze oszacowania średniej (odchylenie standardowe) dla placebo wynoszącej 0,001464 ( .002268) oraz dla oleju z ogórecznika .000289 ( .000709) , potrzebowalibyśmy 40 osobników dla mocy 80-90% na poziomie istotności 0,05, aby wykryć zmianę transkryptu, białka i aktywności enzymatycznej LTC4S o 50% między ramionami placebo i ogórecznika.

B. Plan analizy - Na początku przedstawimy statystyki opisowe (średnia, odchylenie standardowe, zakres) dla wszystkich punktów końcowych dla grup leczenia i placebo. Przedstawimy również wykresy graficzne wszystkich miar w całym badaniu i dla każdej grupy w każdym okresie. W badaniu krzyżowym 2x2 porównamy leczenie i kontrolę dla każdego punktu końcowego oddzielnie, stosując uogólniony model mieszany z predyktorami: grupa (sekwencja), pacjent zagnieżdżony w grupie jako efekt losowy, okres (dychotomia), leczenie (dychotomia) ) i sezonowość (dychotomia), z nieustrukturyzowaną kowariancją. Wykorzystamy diagnostykę modelu mieszanego, taką jak wykresy resztkowe, aby ocenić dobroć dopasowania.