Gurkört och echiumfröoljor mot astma (Borage)

För att utvärdera mekanismerna genom vilka gurkörtsfröolja och echiumfröolja blockerar generering av mediator vid astma, utförde vi en cross-over-studiedesign för att minska antalet patienter som behövs för studien. Varje behandlingsperiod var sex veckor med en sexveckors tvättperiod. För enkelhetens skull görs alla effektberäkningar med antagande av en enda faktor eller prediktorvariabel och en enda resultat- eller utfallsvariabel. Vi fokuserade på förändringar i mediatorgenerering av effektorceller. Beräkningar nedan tyder på att vi har beslutsamhet att plocka upp kliniskt meningsfulla effekter av potentiellt viktiga förklaringsvariabler med acceptabel eller hög effekt.

1. Studiedesign Målen var att undersöka de mekanismer som ligger till grund för effekterna av gurkörtsfröolja och echiumfröolja på proinflammatorisk mediatorproduktion av effektorleukocyter.

I behandlingsarmen konsumerade försökspersoner 4,0 g/dag gurkörtsfröolja och 7,0 g/dag echiumfröolja (innehållande totalt ~1,6 g/dag av GLA och ~0,9 g/dag av SDA). Oljorna förpackades i kapslar som var och en innehöll 1 gram olja. Därför kommer försökspersonerna att inta 10 kapslar om dagen (3 på morgonen, 3 på eftermiddagen och 4 på kvällen) med måltider. I placeboarmen tog försökspersonerna matchande kapslar innehållande majsolja; tre 1 gram kapslar på morgonen och eftermiddagen, och fyra på kvällen, med måltider.

Studien började med ett screeningbesök. Alla försökspersoner hade astma som diagnostiserades av läkare. Alla utförde en baslinjeuppsättning av lungfunktionsmätningar. De gick in i en 2-veckors inkörningsperiod under vilken de förde dagbok över toppflöden, astmasymtom och användning av beta-agonister. Försökspersonerna instruerades i toppflödesteknik och ombads att utföra tre manövrar varje gång. Manövern ansågs tekniskt tillräcklig om variationen i värdena som erhölls vid de tre försöken är med 10 % av varandra, och det högsta värdet antecknades i en dagbok. Försökspersoner vars dagböcker var > 80 % kompletta deltog i studien och tilldelades slumpmässigt aktiv behandling eller placebo. Spirometri upprepades. Blod togs för fettsyrasammansättning av plasma och leukocyter, LT-generering och DNA för genotypning vid LTC4S-lokuset. Försökspersonerna försågs med toppflödesdagböcker, instruerades i lämpliga prestanda- eller toppflödesmanövrar och ombads att registrera toppflödet morgon och kväll varje dag (som återspeglar det bästa av tre ansträngningar varje gång). Efter tre veckors behandling kommer dagbokskort att samlas in och spirometri upprepas. Efter sex veckors behandling togs blod för säkerhetsövervakning, för mätningar av fettsyror i plasma och leukocyter samt för funktionsanalyserna. Spirometri upprepades. Försökspersonerna gick sedan in i en sexveckors tvättperiod. Två veckor före slutet av denna period började de återigen föra dagbokskort. Vid slutet av den 6 veckor långa tvättperioden gick de in i korsningsbehandlingsfasen (sex veckor) som följde samma protokoll som den första behandlingsperioden med bedömning av fettsyraanalyser, cellfunktionsstudier, säkerhetsövervakning och spirometri. Graviditetstest utfördes före och efter varje behandlingsperiod. Mejerikort (med toppflödesövervakningsresultat) kommer att samlas in vid varje besök (3 veckors intervall under studiens placebo- och aktiva behandlingsarm).

3. Statistiska analyser

a. Effektberäkningar - För enkelhetens skull görs alla effektberäkningar med antagande av en enda faktor eller prediktorvariabel och en enda resultat- eller utfallsvariabel. Medan ett antal korrelerade resultat kommer att undersökas, kommer vi att fokusera på förändringar i mediatorgenerering och nivåer av enzymuttryck. Beräkningar nedan tyder på att vi har beslutsamhet att plocka upp kliniskt meningsfulla effekter av potentiellt viktiga förklaringsvariabler med acceptabel eller hög effekt.

i. Biokemiska slutpunkter - Power baseras på parade t-tester som jämför kontinuerliga svarsmått mellan behandling och placebo. Vi antar att 40 ämnen kommer att vara tillgängliga efter att ha tillåtit en avhoppsfrekvens på 20 % från vårt ursprungliga urval på 50 ämnen. För slutpunkten för leukotrienproduktion av leukocyter antydde kraftberäkningarna att vi kommer att ha 80 % kraft för att detektera en sann skillnad inom patienten på 0,8 av SD inom patienten mellan behandling och placebo med ett α-värde på 0/05. På grundval av våra tidigare studier antar vi en variationskoefficient inom ämnet (CV) på 13% för LTC4-generering. Detta kommer att översättas till en ungefärlig detekterbar skillnad från 10,5 % i dessa parametrar. Med hjälp av ett parat tvåsidigt t-test och tidigare medelvärde(standardavvikelse) uppskattningar för placebo på 0,001464 ( .002268) och för gurkörtsoljan på .000289( .000709) , skulle vi behöva 40 försökspersoner för 80-90 % kraft vid en signifikansnivå på 0,05 för att detektera en förändring i LTC4S-transkript, protein och enzymaktivitet på 50 % mellan placebo- och gurkörtsarmarna.

b. Analysplan - Inledningsvis kommer vi att presentera beskrivande statistik (medelvärde, standardavvikelse, intervall) för alla effektmått för behandling och placebogrupper. Vi kommer också att presentera grafiska plotter av alla mått över studien och för varje grupp inom varje period. För 2x2 crossover-studien kommer vi att jämföra behandlingen och kontrollen för varje effektmått separat genom att använda en generaliserad blandad modellmetod med prediktorerna: grupp(sekvens), patient kapslad i grupp som en slumpmässig effekt, period(dikotom), behandling(dikotom). ), och säsongsvariationer (dikotom), med ostrukturerad kovarians. Vi kommer att använda blandad modelldiagnostik såsom restplots för att bedöma god passform.