Huiles de graines de bourrache et d'échium pour l'asthme (Borage)

Pour évaluer les mécanismes par lesquels l'huile de graines de bourrache et l'huile de graines d'échium bloquent la génération de médiateurs dans l'asthme, nous avons réalisé un essai croisé pour réduire le nombre de patients nécessaires à l'étude. Chaque période de traitement était de six semaines avec une période de sevrage de six semaines. Pour plus de simplicité, tous les calculs de puissance sont effectués en supposant un seul facteur ou variable prédictive et un seul résultat ou variable de résultat. Nous nous sommes concentrés sur les changements dans la génération de médiateurs par les cellules effectrices. Les calculs ci-dessous suggèrent que nous avons la résolution de détecter les effets cliniquement significatifs de variables explicatives potentiellement importantes avec une puissance acceptable ou élevée.

1. Conception de l'étude Les objectifs étaient d'examiner les mécanismes qui sous-tendent les effets de l'huile de graines de bourrache et de l'huile de graines d'échium sur la production de médiateurs pro-inflammatoires par les leucocytes effecteurs.

Dans le bras de traitement, les sujets ont consommé 4,0 g/jour d'huile de graines de bourrache et 7,0 g/jour d'huile de graines d'échium (contenant des totaux d'environ 1,6 g/jour de GLA et d'environ 0,9 g/jour de SDA). Les huiles étaient conditionnées dans des capsules contenant chacune 1 gramme d'huile. Par conséquent, les sujets ingèrent 10 gélules par jour (3 le matin, 3 l'après-midi et 4 le soir) avec les repas. Dans le bras placebo, les sujets ont pris des gélules assorties contenant de l'huile de maïs ; trois gélules de 1 gramme le matin et l'après-midi, et quatre le soir, aux repas.

L'étude a débuté par une visite de dépistage. Tous les sujets avaient un asthme diagnostiqué par un médecin. Tous ont effectué un ensemble de mesures de la fonction pulmonaire de base. Ils sont entrés dans une période de rodage de 2 semaines au cours de laquelle ils ont tenu un journal des débits de pointe, des symptômes d'asthme et de l'utilisation des bêta-agonistes. Les sujets ont reçu des instructions sur la technique du débit de pointe et ont été invités à effectuer trois manœuvres à chaque fois. La manœuvre a été considérée comme techniquement suffisante si la variation des valeurs obtenues sur les trois tentatives est de 10% les unes des autres, et la valeur la plus élevée a été enregistrée dans un journal. Les sujets dont les journaux étaient complets à plus de 80 % sont entrés dans l'étude et ont été assignés au hasard à un traitement actif ou à un placebo. La spirométrie a été répétée. Du sang a été prélevé pour la composition en acides gras du plasma et des leucocytes, la génération de LT et l'ADN pour le génotypage au locus LTC4S. Les sujets ont reçu des journaux de débit de pointe, ont été instruits des performances appropriées ou des manœuvres de débit de pointe, et ont été invités à enregistrer le débit de pointe du matin et du soir chaque jour (reflétant le meilleur des trois efforts à chaque fois). Après trois semaines de traitement, les fiches du journal seront collectées et la spirométrie répétée. Après six semaines de traitement, du sang a été prélevé pour la surveillance de la sécurité, pour les mesures des acides gras dans le plasma et les leucocytes et pour les analyses fonctionnelles. La spirométrie a été répétée. Les sujets sont ensuite entrés dans une période de sevrage de six semaines. Deux semaines avant la fin de cette période, ils ont recommencé à tenir des cartes de journal. À la fin de la période de sevrage de 6 semaines, ils sont entrés dans la phase de traitement croisé (six semaines) qui a suivi le même protocole que la première période de traitement avec évaluation des analyses d'acides gras, études de la fonction cellulaire, surveillance de la sécurité et spirométrie. Des tests de grossesse ont été effectués avant et après chaque période de traitement. Des cartes laitières (avec les résultats de la surveillance du débit de pointe) seront collectées à chaque visite (intervalles de 3 semaines pendant les bras placebo et traitement actif de l'étude).

3. Analyses statistiques

un. Calculs de puissance - Pour plus de simplicité, tous les calculs de puissance sont effectués en supposant un seul facteur ou variable prédictive et un seul résultat ou variable de résultat. Alors qu'un certain nombre de résultats corrélés seront étudiés, nous nous concentrerons sur les changements dans la génération de médiateurs et les niveaux d'expression enzymatique. Les calculs ci-dessous suggèrent que nous avons la résolution de détecter les effets cliniquement significatifs de variables explicatives potentiellement importantes avec une puissance acceptable ou élevée.

je. Paramètres biochimiques - La puissance est basée sur des tests t appariés comparant des mesures continues de réponse entre le traitement et le placebo. Nous supposons que 40 sujets seront disponibles après avoir tenu compte d'un taux d'abandon de 20 % de notre échantillon initial de 50 sujets. Pour le critère d'évaluation de la production de leucotriènes par les leucocytes, les calculs de puissance suggèrent que nous aurons une puissance de 80 % pour détecter une véritable différence intra-sujet de 0,8 de l'écart-type intra-sujet entre le traitement et le placebo avec une valeur α de 0/05. Sur la base de nos études précédentes, nous supposons un coefficient de variation (CV) intra-sujet de 13 % pour la génération LTC4. Cela se traduira par une différence détectable approximative de 10,5 % dans ces paramètres. En utilisant un test t bilatéral apparié et des estimations de la moyenne (écart type) antérieures pour le placebo de 0,001464 ( .002268) et pour l'huile de bourrache de .000289( .000709) , nous aurions besoin de 40 sujets pour une puissance de 80 à 90 % à un niveau de signification de 0,05 pour détecter un changement dans le transcrit LTC4S, les protéines et l'activité enzymatique de 50 % entre les bras placebo et bourrache.

b. Plan d'analyse - Dans un premier temps, nous présenterons des statistiques descriptives (moyenne, écart type, intervalle) pour tous les critères d'évaluation des groupes de traitement et de placebo. Nous présenterons également des tracés graphiques de toutes les mesures de l'étude et pour chaque groupe au sein de chaque période. Pour l'étude croisée 2x2, nous comparerons le traitement et le contrôle sur chaque paramètre séparément en utilisant une approche de modèle mixte généralisée avec les prédicteurs : groupe (séquence), patient niché dans le groupe comme effet aléatoire, période (dichotomique), traitement (dichotomique ), et la saisonnalité (dichotomique), avec covariance non structurée. Nous utiliserons des diagnostics de modèles mixtes tels que des parcelles résiduelles pour évaluer la qualité de l'ajustement.