Indusoidut tolerogeeniset dendriittisolut allergisen astman modulaattoreina (MGH-002)
Huolimatta lääkityksen edistymisestä allergiset sairaudet, mukaan lukien allerginen astma, yleistyvät edelleen. Tästä syystä on tarpeen ymmärtää paremmin allergisten sairauksien mekanismeja ja uusia näkemyksiä allergisen tulehduksen moduloinnista. Tutkijat olettavat, että paljon on vielä opittavaa T-efektori- ja T-säätelysolujen käyttäytymisestä allergisissa sairauksissa. Lisäksi tutkijat olettavat, että uusia allergisen sietokyvyn mekanismeja voi olla olemassa, ja näiden mekanismien selvittäminen voi tarjota oivalluksia uusista terapeuttisista strategioista allergisten sairauksien hallitsemiseksi. Tutkijat tutkivat uudentyyppisen immuunivastetta sietävän dendriittisolun (it-DC) kykyä indusoida T-solutoleranssia allergisilla henkilöillä. Tutkijat arvioivat, onko in vitro -tuotetuilla it-DC:illä kykyä indusoida antigeenispesifisiä T-säätelysoluja ja suppressoida allergeenispesifisiä T-efektorisolujen toimintaa in vitro.
Standardoituja Cat-allergeeniuutetta ja pölypunkkien allergeeneja käytetään aiheuttamaan muutoksia hengitysteihin allergeenille altistumisen aikana. Tässä tutkimuksessa antoreitti on titratun allergeenin paikallinen annostelu yhden keuhkon yhden lohkon bronkoskooppisesti eristettyyn osaan. Biologisen lääkkeen annos määräytyy aiemman ihonpistotestin perusteella.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Yksityiskohtainen kuvaus
Tämä on yhden keskuksen avoin, kontrolloitu mekanistinen tutkimus ennen ja jälkeen allergeenin tiputuksen, jossa kutakin kohdetta käytetään omana kontrollinaan. Ekspression tutkimusmittausten luotettavuus saadaan aikaan vertaamalla toistuvia mittauksia. Lisäkontrollit saadaan mittaamalla sellaisten markkerien ilmentymistä, joilla tiedetään olevan stabiili ekspressio, mukaan lukien solun rakenneproteiinit ja kemokiinimarkkerit, joiden tutkijat tietävät indusoituvan tässä kokeellisessa paradigmassa aiemmista tutkimuksistamme. Tämä on tutkiva tutkimus. Koehenkilöt saavat tutkimustuotteen, joko standardoitua kissan allergeeniuutetta tai standardisoitua pölypunkki-allergeenia (Dermatophagoides farinae tai D. pteronyssinus). Yhdellekään kohteelle ei anneta lumelääkettä. On olemassa 2 kohorttia, allergiset astmaatikot (AA) ja terveet kontrollit (HC). Tärkeimmät vertailut ovat primaaristen ja toissijaisten tulosmittausten mittaaminen: (1) laimennusaine versus allergeenialtistettu keuhkosegmentti kullakin astmapotilaalla ja (2) näiden vasteiden vertailu allergisilla astmaatikoilla (AA) ja terveillä kontrolleilla (HC) .
Tutkijat rekisteröivät 20 AA-kohdetta (10 kappaleessa 1 ja 10 kappaleessa 2) ja 10 HC-kohdetta (raita 1). Satunnaistamista ei tule. Allergeenin valinta määräytyy allergisilla ihotesteillä. Kun kohde on allerginen sekä kissalle että pölypunkille, yksi valitaan siten, että kussakin kohortissa on edustava näyte kissojen ja pölypunkkien aiheuttamista haasteista. Raidan 1 10 allergista astmaa (AA) ja HC-potilasta käyvät läpi alustavat seulontatestit ja tarjoavat 200 ml verta DC- ja T-solututkimuksiin yhdellä kertaa. Radan 1 koehenkilöille ei tehdä bronkoskopiaa, bronkoalveolaarista huuhtelua tai segmentaalista allergeenialtistusta. Raidan 2 10 allergista astmaa (AA) koehenkilöä läpikäy SAC joko standardoidulla kissa- tai punkkiallergeenilla. Nämä koehenkilöt luovuttavat myös 200 ml verta kahdesti vähintään 4 viikon ja enintään 12 viikon välein.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Vaihe
- Vaihe 1
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
Massachusetts
-
Boston, Massachusetts, Yhdysvallat, 02114
- Massachusetts General Hospital
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
Allergista astmaa sairastavat (AA-potilaat):
- Kaikilla koehenkilöillä on lähtötason FEV1 vähintään 75 % ennustetusta arvosta keuhkoputkia laajentavan lääkkeen antamisen jälkeen.
- Kaikilla koehenkilöillä on sekä kliininen historia allergisista oireista kissa- tai pölypunkki-allergeenille että positiivinen allergeenipistotesti (halkaisija 3 mm suurempi kuin laimennusainekontrolli)
- Elinikäinen tupakoimattomuus (elinikä yhteensä < 5 pakkausvuotta ja ei yhtään 5 vuoden aikana).
- Halukas ja kykenevä antamaan tietoisen suostumuksen.
- Ilmaisi halunsa osallistua haastatteluun päätutkijan kanssa.
- Ikä 18-50 vuotta.
- A metakoliini PC20 < 16 mg/ml.
- Astma, jonka vaikeusaste määritellään seuraavasti: joka ei vaadi enempää kuin vaiheen 3 hoitoa (NHLBI Guidelines, 2007), hyvin hallinnassa ja jonka validoitu astmakontrollitestin (ACT) pistemäärä on > 19 kuukauden ajan ennen seulontakäyntiä ja joka sietää inhaloitavien kortikosteroidien käytön keskeytys 2 viikkoa ennen käyntiä 2.
Terveet kontrollikohteet (HC-kohteet):
Normaalit kontrollikoehenkilöt ovat henkilöitä, joiden yleinen terveys, ikä ja sukupuoli vastaavat astmaa sairastavia, 18-50-vuotiaita ja ei-allergisia, eli täysin negatiivisia pistos-ihotestien paneelissa, joilla ei ole aiemmin ollut allergista nuhaa tai astmaa, ei historiaa. kissojen tai pölypunkkien allergeenialtistuksen aiheuttamat allergiset oireet, elinikäiset tupakoimattomat savukkeet (määritelty elinaikana yhteensä alle 5 pakkausvuotta ja ei yhtään 5 vuoden aikana), normaali spirometria (ts. FEV1 ja FVC vähintään 90 % ennustetusta) ja metakoliini PC20 > 16 mg/ml.
Poissulkemiskriteerit:
Allergista astmaa sairastavat (AA-potilaat):
- Hedelmällisessä iässä olevat naiset, jotka ovat raskaana (virtsan beeta-HCG-testin perusteella), ovat seksuaalisesti aktiivisia eivätkä käytä ehkäisyä, suunnittelevat raskautta tai imettävät.
- Spontaani astmakohtaus tai kliininen näyttö ylähengitystieinfektiosta viimeisten 6 viikon aikana.
- Osallistuminen lääkettä tai biologista ainetta sisältävään tutkimukseen tutkimusta edeltäneiden 30 päivän aikana.
- Albuterolin, atropiinin, lidokaiinin, fentanyylin tai midatsolaamin intoleranssi.
- Antihistamiinit 7 päivän sisällä seulontakäynnistä.
- Diabetes mellitus, sydämen vajaatoiminta, kammiorytmihäiriöt, aivoverenkiertohäiriö, munuaisten vajaatoiminta, anafylaksia tai kirroosi.
- Systeemisten steroidien käyttö, inhaloitavien steroidien, beetasalpaajien ja MAO-estäjien lisääntynyt käyttö tai käynti astman pahenemisvaiheessa 1 kuukauden sisällä seulontakäynnistä.
- Antibioottien käyttö hengitystiesairauksien hoidossa 1 kuukauden sisällä karakterisointikäynnistä tai hengitystieinfektio 6 viikon kuluessa bronkoskooppikäynneistä.
- Aiemmin astmaan liittyvä hengitysvajaus, joka vaatii intubaatiota.
- Kvantitatiivinen ihopistotestin positiivinen reaktio allergeenipitoisuuteen 0,056 BAU tai AU/ml.
- Koehenkilöt, joilla on suuri todennäköisyys huonosti noudattaa tutkimusta.
- olet tupakoinut viimeisten 5 vuoden aikana tai yhteensä > 5 pakkausvuotta.
- Tupakansavulle altistuminen tai sisäkarvainen lemmikkieläin paitsi koiran tapauksessa, jos kohde ei ole allerginen koiralle ja koehenkilöllä on negatiivinen ihotesti koiralle.
- Muut keuhkosairaudet, kuten sarkoidoosi, bronkiektaasi tai aktiivinen keuhkosairaus.
- Xolairin (omalitsumabi - monoklonaalinen anti-IgE-vasta-aine) käyttö 6 kuukauden ajan.
- Immunoterapia kissan tai pölypunkkiuutteella nyt tai aiemmin.
- Ennaltaehkäisevän aspiriinin käyttö sydän- ja verisuonitauteihin.
- Ei-englanninkieliset.
- Paino alle 110 kiloa
- Hematokriitti <0,36 naisilla, <0,38 miehillä.
Terveet normaalit kontrollikohteet (HC-kohteet):
- Aiempi allergia, astma, nenä- tai poskiontelosairaus.
- Poissulkemiskriteerit #1, 3-8 ja 10-20 edellä (A.).
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Ensisijainen käyttötarkoitus: Perustiede
- Jako: Ei käytössä
- Inventiomalli: Yksittäinen ryhmätehtävä
- Naamiointi: Ei mitään (avoin tarra)
Aseet ja interventiot
Osallistujaryhmä / Arm |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Kokeellinen: Allergiset astmaattikot, ei-allergiset ei-astmaatikot (HC)
Raita 1: Aikuiset, jotka ovat allergisia astmaatikoita tai ei-allergisia ei-astmaatikoita (terveet verrokit), eivät saa segmentaalista allergeenialtistusta keuhkoihin, mutta heiltä otetaan veri kerrallaan.
Raita 2: Aikuiset, jotka ovat allergisia astmaatikoita, saavat segmentaalisen allergeenialtistuksen keuhkoihin ja heidän verensä otetaan 2 ajankohdassa.
|
Ensimmäisenä bronkoskopiapäivänä BAL suoritetaan ensin kielessä ilman laimennusainetta tai allergeenia tiputtamalla.
2 ml:n erä isotonista laimennusainetta tiputetaan oikeaan ylälohkoon. Toimenpide toistetaan oikeaan keskilohkoon tiputtamalla 2 ml standardoitua kissan tai punkin allergeeniliuosta.
Ensin annetaan allergeenin testiannospitoisuus, joka koostuu 2 ml:sta allergeenia 1/10 (Cat, D.farinae) tai
1/30th(D.pteronyssinus)the
kynnyspitoisuus.Jos silmämääräisessä tarkastuksessa bronkoskoopin läpi ei ole merkkejä limakalvotulehduksesta 2 minuutin kuluttua, toinen segmentaalinen allergeenialtistus tehdään oikeaan keskilohkoon käyttämällä 2 ml täyden annoksen allergeenia kynnyspitoisuudella (Cat, D.farinae). )tai 1/3 kynnyspitoisuudesta (D.pteronyssinus).
Tämä annos määräytyy kvantitatiivisella ihopistotestillä. Toinen bronkoskoopia suoritetaan 24 tuntia allergeeniuutteen ja laimennusaineen toimittamisen jälkeen BAL-nesteen saamiseksi RUL:sta ja RML:stä.
Muut nimet:
Koehenkilöiltä otetaan 200 (40 teelusikallista) ml verta erilaisten leukosyyttipopulaatioiden keräämiseksi.
Toinen 200 ml verta otetaan Track 2 -henkilöiltä 4 viikkoa myöhemmin T-lymfosyyttien eristämiseksi toiminnallisia tutkimuksia varten.
Muut nimet:
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
It-DC:n vaikutus allergeenispesifisten efektori-T-solujen fenotyyppiin, toimintaan, lisääntymiseen ja eloonjäämiseen.
Aikaikkuna: 24 tuntia
|
Luomme indusoituja tolerogeenisiä dendriittisoluja (it-DC:itä) in vitro perifeerisen veren monosyyteistä ja dendriittisoluista, jotka on eristetty kustakin allergisesta astmaattisesta henkilöstä, ja arvioimme niiden kykyä (a) vaimentaa efektori-CD4+ T-solujen (Teff) vasteita ja/tai (b) indusoivat T-säätelysoluja (Treg) Teff-soluista sekä CD4+-naiivisia ja muisti-T-soluja. T-soluvasteiden heikkeneminen (a) arvioidaan proliferaatiomäärityksillä ja sytokiinituotannolla. Lisäksi it-DC:n indusoimien Tregien (b) toiminnallisuuden arvioimiseksi yhteisviljelysuppressiomäärityksillä, joissa käytetään kissan tai pölypunkkien allergeenispesifisiä Teff-soluja, jotka on eristetty BAL:sta segmentaalisen allergeenialtistuksen (SAC) jälkeen vastesoluina, tutkitaan. Reagoivien Teff-solujen prosentuaalinen suppressio arvioidaan tutkimalla Teff-solujen lisääntymistä ja eloonjäämistä/apoptoosia sekä sytokiinien tuotantoa. (Huomaa: SAC-näytteet terveistä kontrolleista eivät ole mukana primaarisessa analyysissä.) |
24 tuntia
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Perifeerisen veren DC-alaryhmien prosenttijakauma
Aikaikkuna: 4 viikkoa
|
Määritämme kunkin ääreisveren DC-alajoukon esiintymistiheyden allergisista astmaatikoista 0 ja 4 viikon kohdalla käyttämällä solupinnan värjäys/virtaussytometria-analyysiä.
Tulokset ilmaistaan kunkin DC-alajoukon prosentuaalisena jakautumana DC-varastossa.
|
4 viikkoa
|
|
Naiivien T-solujen (Tn) ja muisti-T-solujen (Tmem) proliferaation prosentuaalinen suppressio it-DC-indusoiduilla Tregeillä kustakin koehenkilöstä.
Aikaikkuna: 4 viikkoa
|
Jokaisesta allergisesta astmaatikosta peräisin olevien it-DC-indusoitujen Tregien kyky suppressoida autologisten CD4+ Tn- ja Tmem-solujen proliferaatiota vasteena anti-CD3:lle arvioidaan ja ilmaistaan proliferaation prosentuaalisena suppressiona käyttämällä in vitro -proliferaatiomääritystä.
|
4 viikkoa
|
|
Erot allergeenispesifisten Teff-solujen lisääntymisessä BAL:sta ja verestä.
Aikaikkuna: 4 viikkoa
|
Mittaamme proliferatiivisia vasteita it-DC-yhteisviljelymäärityksissä allergeenispesifisillä CD4+ Teff -soluilla, jotka on saatu allergisten astmaattisten koehenkilöiden BAL:sta verrattuna samojen koehenkilöiden ja 10 terveen kontrollin verestä peräisin oleviin CD4+ Tmem -soluihin.
|
4 viikkoa
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Yhteistyökumppanit
Tutkijat
- Päätutkija: Andrew D Luster, M.D., Ph.D., Massachusetts General Hospital
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Arvio)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- 2012P0001076
- 1U19AI095261 (Yhdysvaltain NIH-apuraha/sopimus)
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .