Индуцированные толерогенные дендритные клетки как модуляторы аллергической астмы (MGH-002)
Несмотря на достижения в области медицины, распространенность аллергических заболеваний, в том числе аллергической астмы, продолжает расти. По этой причине существует потребность в лучшем понимании механизмов аллергических заболеваний и новых взглядах на модулирование аллергического воспаления. Исследователи предполагают, что многое еще предстоит узнать о поведении Т-эффекторных и Т-регуляторных клеток при аллергических заболеваниях. Кроме того, исследователи предполагают, что могут существовать новые механизмы аллергической толерантности, и выяснение этих механизмов может дать представление о новых терапевтических стратегиях контроля аллергических заболеваний. Исследователи изучат способность индукции толерантности к Т-клеткам у субъектов с аллергией новым типом иммунных толерантных дендритных клеток (it-DC). Исследователи оценят, обладают ли генерированные in vitro it-DC способностью индуцировать антиген-специфические Т-регуляторные клетки и подавлять функцию аллерген-специфических Т-эффекторных клеток in vitro.
Стандартизированный экстракт кошачьего аллергена и аллергены пылевых клещей будут использоваться для создания изменений в дыхательных путях, которые происходят во время воздействия аллергена. Для этого исследования способ введения будет заключаться в местном нанесении титрованного аллергена на бронхоскопически изолированный подсегмент одной доли одного легкого. Доза биологического препарата будет определена на основе предшествующего кожного прик-теста.
Обзор исследования
Статус
Подробное описание
Это одноцентровое открытое контролируемое механистическое исследование до и после введения аллергена, в котором каждый субъект используется в качестве собственного контроля. Надежность исследования измерений экспрессии достигается путем сравнения повторных измерений. Дополнительный контроль обеспечивается путем измерения экспрессии маркеров, которые, как известно, имеют стабильную экспрессию, включая клеточные структурные белки и маркеры хемокинов, которые, как известно исследователям, индуцируются в этой экспериментальной парадигме из наших предыдущих исследований. Это исследовательское исследование. Субъекты получат исследуемый продукт, либо стандартизированный экстракт аллергена кошки, либо стандартизированный аллерген пылевого клеща (Dermatophagoides farinae или D. pteronyssinus). Ни одному субъекту не будет дано плацебо. Есть 2 когорты, аллергические астматики (AA) и здоровые контроли (HC). Основными сравнениями будут измерения первичных и вторичных показателей исхода в: (1) сегментах легкого, подвергнутых воздействию разбавителя, по сравнению с пораженными аллергеном сегментами легких у каждого субъекта астмы и (2) сравнение этих ответов у аллергических астматиков (AA) и у здоровых людей (HC). .
Исследователи зарегистрируют 20 субъектов AA (10 на уровне 1 и 10 на уровне 2) и 10 субъектов HC (направление 1). Рандомизации не будет. Выбор аллергена будет определяться кожными аллергическими пробами. Если у субъекта аллергия как на кошку, так и на пылевого клеща, будет выбран один из них с целью получения репрезентативной выборки заражений кошками и пылевыми клещами в каждой когорте. 10 субъектов с аллергической астмой (АА) и субъектами с НС в Треке 1 пройдут предварительные скрининговые тесты и сдадут 200 мл крови для исследования ДК и Т-клеток за один раз. Субъекты группы 1 не будут подвергаться бронхоскопии, бронхоальвеолярному лаважу или провокации сегментарным аллергеном. 10 субъектов, страдающих аллергической астмой (АА) в Треке 2, пройдут SAC либо со стандартизированным аллергеном кошки, либо с аллергеном клеща. Эти субъекты также будут сдавать по 200 мл крови дважды с промежутком не менее 4 недель и не более 12 недель.
Тип исследования
Регистрация (Действительный)
Фаза
- Фаза 1
Контакты и местонахождение
Места учебы
-
-
Massachusetts
-
Boston, Massachusetts, Соединенные Штаты, 02114
- Massachusetts General Hospital
-
-
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
Принимает здоровых добровольцев
Полы, имеющие право на обучение
Описание
Критерии включения:
Субъекты с аллергической астмой (субъекты АА):
- У всех субъектов исходный ОФВ1 будет не менее 75 % от прогнозируемого значения после введения бронхолитиков.
- Все субъекты должны иметь в анамнезе аллергические симптомы на аллерген кошки или пылевого клеща и положительный прик-тест на аллерген (диаметр на 3 мм больше, чем контрольный образец с разбавителем).
- Пожизненное отсутствие курения сигарет (общий срок жизни < 5 пачек-лет и ни одного за 5 лет).
- Желание и возможность дать информированное согласие.
- Выразил желание принять участие в беседе с главным следователем.
- Возраст от 18 до 50 лет.
- Метахолин PC20 < 16 мг/мл.
- Астма тяжести определяется как: требующая терапии не более чем на 3-м этапе (Руководство NHLBI, 2007 г.), хорошо контролируемая и имеющая подтвержденный тест контроля астмы (ACT) > 19 баллов в течение одного месяца до визита для скрининга и способная переносить 2-недельная отмена ингаляционных кортикостероидов перед визитом 2.
Здоровые субъекты контроля (субъекты HC):
Нормальные контрольные субъекты будут людьми с хорошим общим состоянием здоровья, возрастом и полом, соответствующими группе астматиков, в возрасте от 18 до 50 лет и без аллергии, т. аллергических симптомов, вызванных воздействием аллергенов кошек или пылевых клещей, отказ от курения сигарет на протяжении всей жизни (определяется как общее количество сигарет в течение жизни менее 5 пачек в год и ни одного за 5 лет), нормальная спирометрия (т. ОФВ1 и ФЖЕЛ не менее 90% от должного) и метахолина PC20 > 16 мг/мл.
Критерий исключения:
Субъекты с аллергической астмой (субъекты АА):
- Женщины детородного возраста, которые беременны (на основании анализа мочи на бета-ХГЧ), ведут активную половую жизнь и не используют противозачаточные средства, планируют забеременеть или кормят грудью.
- Наличие спонтанного приступа астмы или клинических признаков инфекции верхних дыхательных путей в течение предшествующих 6 недель.
- Участие в научном исследовании с использованием лекарственного или биологического препарата в течение 30 дней до исследования.
- Непереносимость альбутерола, атропина, лидокаина, фентанила или мидазолама.
- Антигистаминные препараты в течение 7 дней после скринингового визита.
- Наличие сахарного диабета, застойной сердечной недостаточности, желудочковых аритмий, инсульта в анамнезе, почечной недостаточности, анафилаксии или цирроза в анамнезе.
- Использование системных стероидов, более частое использование ингаляционных стероидов, бета-блокаторов и ингибиторов МАО или визит по поводу обострения астмы в течение 1 месяца после скринингового визита.
- Использование антибиотиков при респираторных заболеваниях в течение 1 месяца после визита для характеристики или инфекции дыхательных путей в течение 6 недель после посещений для бронхоскопии.
- Связанная с астмой дыхательная недостаточность в анамнезе, требующая интубации.
- Положительная реакция количественного кожного прик-теста до концентрации аллергена 0,056 BAU или AU/мл.
- Субъекты с высокой вероятностью плохого соблюдения условий исследования.
- Иметь историю курения сигарет в течение последних 5 лет или > 5 пачек лет в общей сложности.
- Воздействие вторичного табачного дыма или пушистых домашних животных в помещении, за исключением собак, если у субъекта нет аллергии на собаку и у субъекта отрицательный кожный тест на собаку.
- Другие заболевания легких, такие как саркоидоз, бронхоэктазы или активная инфекция легких.
- Использование Ксолара (омализумаб - моноклональное антитело к IgE) в течение 6 мес.
- Иммунотерапия экстрактом кошачьего или пылевого клеща сейчас или в прошлом.
- Применение профилактического аспирина при сердечно-сосудистых заболеваниях.
- Не говорящие по-английски.
- Вес менее 110 фунтов
- Гематокрит <0,36 для женщин, <0,38 для мужчин.
Здоровые нормальные контрольные субъекты (HC субъекты):
- Аллергия, астма, заболевания носа или околоносовых пазух в анамнезе.
- Критерии исключения №1, 3-8 и 10-20 из (А) выше.
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
- Основная цель: Фундаментальная наука
- Распределение: Н/Д
- Интервенционная модель: Одногрупповое задание
- Маскировка: Нет (открытая этикетка)
Оружие и интервенции
Группа участников / Армия |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
Экспериментальный: Аллергический астматик, неаллергический неастматик (НС)
Дорожка 1: Взрослые субъекты, страдающие астмой с аллергией или не страдающие аллергией, не страдающие астмой (здоровая контрольная группа), не будут подвергаться сегментарной стимуляции легких аллергеном, но у них будет взята кровь в 1 момент времени.
Дорожка 2: Взрослые субъекты, страдающие аллергической астмой, получат сегментарную стимуляцию аллергеном легких и берут кровь в 2 временных точках.
|
В первый день бронхоскопии сначала проводят БАЛ на языке без инстилляции растворителя или аллергена.
Аликвоту 2 мл изотонического разбавителя закапывают в правую верхнюю долю. Процедуру повторяют в правой средней доле с закапыванием 2 мл стандартизированного раствора аллергена кошки или клеща.
Сначала вводят тест-дозу концентрации аллергена, состоящую из 2 мл аллергена на 1/10 (Cat, D.farinae) или
1/30 (D.pteronyssinus)
пороговая концентрация. Если при визуальном осмотре через бронхоскоп нет признаков воспаления слизистой оболочки через 2 минуты, будет проведена вторая сегментарная провокация аллергеном в правой средней доле с использованием 2 мл полной дозы аллергена в пороговой концентрации (Cat, D.farinae ) или 1/3 пороговой концентрации (D.pteronyssinus).
Эта доза будет предварительно определена с помощью количественного кожного прик-теста. Вторая бронхоскопия проводится через 24 часа после доставки экстракта аллергена и разбавителя для получения жидкости БАЛ из RUL и RML.
Другие имена:
200 (40 чайных ложек) мл крови будут получены от субъектов для сбора различных популяций лейкоцитов.
Вторые 200 мл крови будут взяты у субъектов Трека 2 через 4 недели для выделения Т-лимфоцитов для функциональных исследований.
Другие имена:
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Влияние ит-ДК на фенотип, функцию, пролиферацию и выживаемость аллерген-специфических эффекторных Т-клеток.
Временное ограничение: 24 часа
|
Мы будем генерировать индуцированные толерогенные дендритные клетки (it-DC) in vitro из моноцитов периферической крови и дендритных клеток, выделенных от каждого субъекта с аллергической астмой, и оценить их способность (а) ослаблять ответы эффекторных CD4+ Т-клеток (Teff) и/или (б) индуцируют Т-регуляторные (Treg) клетки из клеток Teff, а также CD4+ наивных Т-клеток и Т-клеток памяти. Ослабление ответов Т-клеток (а) будет оцениваться с помощью анализов пролиферации и продукции цитокинов. Кроме того, для оценки функциональности Treg, индуцированных it-DC (b), проводят анализы подавления совместного культивирования с использованием клеток Teff, специфичных для аллергенов кошачьих или клещей домашней пыли, выделенных из BAL после сегментарного заражения аллергеном (SAC) в качестве клеток-респондеров, будут осмотрены. Процентное подавление реагирующих клеток Teff будет оцениваться путем изучения пролиферации и выживания/апоптоза клеток Teff, а также продукции цитокинов. (Примечание: образцы SAC от здоровых контролей не участвуют в первичном анализе.) |
24 часа
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Процентное распределение подмножеств DC периферической крови
Временное ограничение: 4 недели
|
Мы определим частоту каждого подмножества DC периферической крови у аллергических астматиков через 0 и 4 недели, используя анализ окрашивания клеточной поверхности/проточной цитометрии.
Результаты будут выражены в виде процентного распределения каждого подмножества DC в общем пуле DC.
|
4 недели
|
|
Процентное подавление пролиферации наивных Т-клеток (Tn) и Т-клеток памяти (Tmem) с помощью Treg, индуцированных it-DC, у каждого субъекта.
Временное ограничение: 4 недели
|
Способность it-DC-индуцированных Treg от каждого аллергического астматика подавлять пролиферацию аутологичных CD4+ клеток Tn и Tmem в ответ на анти-CD3 будет оцениваться и выражаться в процентах подавления пролиферации с использованием анализа пролиферации in vitro.
|
4 недели
|
|
Различия в пролиферации аллергенспецифических клеток Teff из БАЛ и крови.
Временное ограничение: 4 недели
|
Мы будем измерять пролиферативные ответы в анализах совместного культивирования it-DC с помощью аллерген-специфических клеток CD4+ Teff, полученных из БАЛ пациентов с аллергической астмой, по сравнению с клетками CD4+ Tmem, полученными из крови, от тех же субъектов и от 10 здоровых контролей.
|
4 недели
|
Соавторы и исследователи
Спонсор
Следователи
- Главный следователь: Andrew D Luster, M.D., Ph.D., Massachusetts General Hospital
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования
Первичное завершение (Действительный)
Завершение исследования (Действительный)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (Оценивать)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Действительный)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Ключевые слова
Дополнительные соответствующие термины MeSH
- Заболевания дыхательных путей
- Заболевания иммунной системы
- Легочные заболевания
- Гиперчувствительность, немедленная
- Бронхиальные заболевания
- Заболевания легких, обструктивные
- Респираторная гиперчувствительность
- Гиперчувствительность
- Астма
- Молекулярные механизмы фармакологического действия
- Хелатирующие агенты
- Секвестрирующие агенты
- Димеркапрол
Другие идентификационные номера исследования
- 2012P0001076
- 1U19AI095261 (Грант/контракт NIH США)
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .