Células dendríticas tolerogénicas inducidas como moduladores del asma alérgica (MGH-002)
A pesar de los avances en los medicamentos, las enfermedades alérgicas, incluido el asma alérgica, continúan aumentando en prevalencia. Por esta razón, existe la necesidad de una mejor comprensión de los mecanismos de las enfermedades alérgicas y nuevos conocimientos sobre la modulación de la inflamación alérgica. Los investigadores plantean la hipótesis de que queda mucho por aprender sobre el comportamiento de las células T efectoras y T reguladoras en las enfermedades alérgicas. Además, los investigadores plantean la hipótesis de que pueden existir nuevos mecanismos de tolerancia alérgica, y la elucidación de estos mecanismos puede proporcionar información sobre nuevas estrategias terapéuticas para controlar las enfermedades alérgicas. Los investigadores investigarán la capacidad de inducción de tolerancia de células T en sujetos alérgicos por un nuevo tipo de célula dendrítica inmunotolerante (it-DC). Los investigadores evaluarán si las CD it generadas in vitro tienen la capacidad de inducir células T reguladoras específicas de antígeno y suprimir la función de células efectoras T específicas de alérgeno in vitro.
Se utilizará extracto estandarizado de alérgenos de gatos y alérgenos de ácaros del polvo para generar cambios en las vías respiratorias que ocurren durante la exposición al alérgeno. Para esta investigación, la vía de administración será la aplicación tópica del alérgeno titulado a un subsegmento broncoscópico aislado de un lóbulo de un pulmón. La dosis del biológico se determinará a partir de pruebas cutáneas previas.
Descripción general del estudio
Estado
Intervención / Tratamiento
Descripción detallada
Este es un estudio mecánico controlado, de etiqueta abierta y de un solo centro antes y después de la instilación de alérgenos que utiliza a cada sujeto como su propio control. La fiabilidad de las mediciones de expresión del estudio se logra comparando mediciones repetidas. Se proporcionan controles adicionales al medir la expresión de marcadores que se sabe que tienen una expresión estable, incluidas las proteínas estructurales celulares y los marcadores de quimiocinas que los investigadores saben que se inducen en este paradigma experimental de nuestros estudios anteriores. Este es un estudio de investigación. Los sujetos recibirán un producto en investigación, ya sea extracto de alérgeno de gato estandarizado o alérgeno de ácaros del polvo estandarizado (Dermatophagoides farinae o D. pteronyssinus). Ningún sujeto recibirá un placebo. Hay 2 cohortes, asmáticos alérgicos (AA) y controles sanos (HC). Las principales comparaciones serán la medición de las medidas de resultado primarias y secundarias en: (1) diluyente versus segmentos del pulmón expuestos al alérgeno en cada sujeto asmático y (2) comparación de estas respuestas en asmáticos alérgicos (AA) y controles sanos (HC) .
Los investigadores inscribirán a 20 sujetos AA (10 en el Pista 1 y 10 en el Pista 2) y 10 sujetos HC (Pista 1). No habrá aleatorización. La elección del alérgeno se determinará mediante pruebas cutáneas de alergia. Cuando un sujeto es alérgico tanto a los gatos como a los ácaros del polvo, se seleccionará uno con el objetivo de tener una muestra representativa de los desafíos de los gatos y los ácaros del polvo en cada cohorte. Los 10 sujetos asmáticos alérgicos (AA) y sujetos HC en el Track 1 se someterán a pruebas de detección preliminares y proporcionarán 200 ml de sangre para estudios de células T y DC en una ocasión. Los sujetos de la pista 1 no se someterán a broncoscopia, lavado broncoalveolar o desafío alergénico segmentario. Los 10 sujetos asmáticos alérgicos (AA) en el Seguimiento 2 se someterán a SAC con alérgenos estandarizados de gatos o ácaros. Estos sujetos también donarán 200 ml de sangre en dos ocasiones separadas por un mínimo de 4 semanas y no más de 12 semanas.
Tipo de estudio
Inscripción (Actual)
Fase
- Fase 1
Contactos y Ubicaciones
Ubicaciones de estudio
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Massachusetts
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Boston, Massachusetts, Estados Unidos, 02114
- Massachusetts General Hospital
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Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
Acepta Voluntarios Saludables
Géneros elegibles para el estudio
Descripción
Criterios de inclusión:
Sujetos con asma alérgica (sujetos AA):
- Todos los sujetos tendrán un FEV1 inicial no inferior al 75 % del valor previsto después de la administración del broncodilatador.
- Todos los sujetos tendrán un historial clínico de síntomas alérgicos a alérgenos de gatos o ácaros del polvo y una prueba de punción positiva para alérgenos (3 mm de diámetro mayor que el control de diluyente)
- Ausencia de fumar cigarrillos durante toda la vida (total de por vida de < 5 paquetes-año y ninguno en 5 años).
- Dispuesto y capaz de dar su consentimiento informado.
- Expresó el deseo de participar en una entrevista con el investigador principal.
- Edad entre 18 y 50 años.
- Una metacolina PC20 < 16 mg/ml.
- Asma de gravedad definida como: que no requiere más que la terapia del paso 3 (Pautas del NHLBI, 2007), bien controlada y con una puntuación de prueba de control del asma (ACT) validada de > 19 durante un mes antes de la visita de selección, y capaz de tolerar una interrupción de 2 semanas de corticosteroides inhalados antes de la Visita 2.
Sujetos de control sanos (sujetos HC):
Los sujetos de control normales serán individuos que gozan de buena salud general, edad y sexo coincidentes con el grupo asmático, de 18 a 50 años y no alérgicos, es decir, completamente negativos en el panel de pruebas cutáneas por punción sin antecedentes de rinitis alérgica o asma, sin antecedentes de síntomas alérgicos causados por la exposición a alérgenos de gatos o ácaros del polvo, no fumadores de cigarrillos de por vida (definido como un total de por vida de menos de 5 paquetes-año y ninguno en 5 años), espirometría normal (es decir, FEV1 y FVC de al menos el 90 % del valor teórico) y con metacolina PC20 > 16 mg/ml.
Criterio de exclusión:
Sujetos con asma alérgica (sujetos AA):
- Mujeres en edad fértil que están embarazadas (según las pruebas de beta-HCG en orina), son sexualmente activas y no usan métodos anticonceptivos, buscan quedar embarazadas o están amamantando.
- La presencia de un episodio asmático espontáneo o evidencia clínica de infección del tracto respiratorio superior en las 6 semanas previas.
- Participación en un estudio de investigación que involucre un fármaco o producto biológico durante los 30 días anteriores al estudio.
- Intolerancia al albuterol, atropina, lidocaína, fentanilo o midazolam.
- Antihistamínicos dentro de los 7 días de la visita de selección.
- Presencia de diabetes mellitus, insuficiencia cardíaca congestiva, arritmias ventriculares, antecedentes de accidente cerebrovascular, insuficiencia renal, antecedentes de anafilaxia o cirrosis.
- Uso de esteroides sistémicos, mayor uso de esteroides inhalados, bloqueadores beta e inhibidores de la MAO o una visita por una exacerbación del asma dentro del mes anterior a la visita de selección.
- Uso de antibióticos para enfermedades respiratorias dentro de 1 mes de la visita de caracterización o una infección del tracto respiratorio dentro de las 6 semanas de las visitas de broncoscopia.
- Antecedentes de insuficiencia respiratoria relacionada con el asma que requiera intubación.
- Reacción positiva en la prueba cutánea cuantitativa hasta una concentración de alérgeno de 0,056 BAU o AU/ml.
- Sujetos con alta posibilidad de mala adherencia al estudio.
- Tener un historial de tabaquismo en los últimos 5 años o > 5 paquetes por año en total.
- Tener exposición pasiva al humo del cigarrillo o mascotas peludas de interior, excepto en el caso del perro, si el sujeto no es alérgico al perro y el sujeto tiene una prueba cutánea negativa al perro.
- Otras enfermedades pulmonares, como sarcoidosis, bronquiectasias o infección pulmonar activa.
- Uso de Xolair (omalizumab - anticuerpo monoclonal anti-IgE) durante 6 meses.
- Inmunoterapia con extracto de gato o ácaros del polvo ahora o en el pasado.
- Uso de aspirina profiláctica para enfermedades cardiovasculares.
- No hablantes de inglés.
- Pesa menos de 110 libras
- Hematocrito <0,36 para mujeres, <0,38 para hombres.
Sujetos de control normales sanos (sujetos HC):
- Antecedentes de alergia, asma, enfermedad nasal o sinusal.
- Criterios de exclusión #1, 3-8 y 10-20 de (A.) arriba.
Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
- Propósito principal: Ciencia básica
- Asignación: N / A
- Modelo Intervencionista: Asignación de un solo grupo
- Enmascaramiento: Ninguno (etiqueta abierta)
Armas e Intervenciones
Grupo de participantes/brazo |
Intervención / Tratamiento |
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Experimental: Asmáticos alérgicos, no alérgicos no asmáticos (HC)
Pista 1: Los sujetos adultos que son asmáticos alérgicos o no asmáticos no alérgicos (Controles saludables) no recibirán una provocación segmentaria con alérgenos en el pulmón, pero se les extraerá sangre en 1 punto de tiempo.
Pista 2: los sujetos adultos que son asmáticos alérgicos recibirán una prueba de alérgeno segmentaria en el pulmón y se les extraerá sangre en 2 puntos de tiempo.
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El primer día de broncoscopia, primero se realizará BAL en lingual sin instilación de diluyente o alérgeno.
Se instila una alícuota de 2 ml de diluyente isotónico en el lóbulo superior derecho. El procedimiento se repite en el lóbulo medio derecho con la instilación de 2 ml de solución estandarizada de alérgeno para gatos o ácaros.
Primero se administra una concentración de dosis de prueba de alérgeno que consta de 2 ml de alérgeno al 1/10 (Cat, D.farinae) o
1/30 (D. pteronyssinus) el
concentración umbral. Si en la inspección visual a través del broncoscopio no hay evidencia de inflamación de la mucosa después de 2 minutos, se realizará una segunda provocación segmentaria con alérgeno en el lóbulo medio derecho usando 2 ml de dosis completa de alérgeno en la concentración umbral (Cat, D.farinae )o 1/3 de la concentración umbral(D.pteronyssinus).
Esta dosis se predeterminará mediante pruebas cutáneas cuantitativas. Se realiza una segunda broncoscopia 24 horas después de la administración del extracto de alérgeno y el diluyente para obtener líquido BAL de RUL y RML.
Otros nombres:
Se obtendrán 200 (40 cucharaditas) ml de sangre de los sujetos para recolectar diferentes poblaciones de leucocitos.
Se obtendrán unos segundos 200 ml de sangre de los sujetos del Track 2 4 semanas más tarde para el aislamiento de linfocitos T para estudios funcionales.
Otros nombres:
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¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Efecto de it-DC sobre el fenotipo, función, proliferación y supervivencia de células T efectoras específicas de alérgeno.
Periodo de tiempo: 24 horas
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Generaremos células dendríticas tolerogénicas inducidas (it-DC) in vitro a partir de monocitos de sangre periférica y células dendríticas aisladas de cada sujeto asmático alérgico y evaluaremos su capacidad para (a) atenuar las respuestas de células T CD4+ efectoras (Teff) y/o (b) inducir células T reguladoras (Treg) a partir de células Teff, así como células T CD4+ vírgenes y de memoria. La atenuación de las respuestas de células T (a) se evaluará mediante ensayos de proliferación y producción de citoquinas. Además, con el fin de evaluar la funcionalidad de las Treg inducidas por it-DC (b), ensayos de supresión de cocultivo utilizando células Teff específicas de alérgenos de gatos o ácaros del polvo doméstico aisladas de BAL después del desafío segmentario con alérgenos (SAC) como células de respuesta, será examinado. El porcentaje de supresión de las células Teff que responden se evaluará examinando la proliferación y supervivencia/apoptosis de las células Teff, y mediante la producción de citocinas. (Nota: las muestras de SAC de controles sanos no se incluyen en el análisis primario). |
24 horas
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Medidas de resultado secundarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Distribución porcentual de subconjuntos de CD de sangre periférica
Periodo de tiempo: 4 semanas
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Determinaremos la frecuencia de cada subconjunto de DC de sangre periférica de sujetos asmáticos alérgicos a las 0 y 4 semanas mediante tinción de superficie celular/análisis de citometría de flujo.
Los resultados se expresarán en términos de distribución porcentual de cada subconjunto de DC dentro del grupo total de DC.
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4 semanas
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Porcentaje de supresión de la proliferación de células T ingenuas (Tn) y células T de memoria (Tmem) por Tregs inducidas por it-DC de cada sujeto.
Periodo de tiempo: 4 semanas
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La capacidad de las células Treg inducidas por it-DC de cada asmático alérgico para suprimir la proliferación de células Tn y Tmem CD4+ autólogas en respuesta a anti-CD3 se evaluará y expresará como un porcentaje de supresión de la proliferación utilizando un ensayo de proliferación in vitro.
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4 semanas
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Diferencias en la proliferación de células Teff específicas de alérgenos de BAL y sangre.
Periodo de tiempo: 4 semanas
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Mediremos las respuestas proliferativas en ensayos de cocultivo it-DC por células Teff CD4+ específicas de alérgeno obtenidas del BAL de sujetos asmáticos alérgicos en comparación con las células Tmem CD4+ derivadas de sangre de los mismos sujetos y de 10 controles sanos.
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4 semanas
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Investigadores
- Investigador principal: Andrew D Luster, M.D., Ph.D., Massachusetts General Hospital
Fechas de registro del estudio
Fechas importantes del estudio
Inicio del estudio
Finalización primaria (Actual)
Finalización del estudio (Actual)
Fechas de registro del estudio
Enviado por primera vez
Primero enviado que cumplió con los criterios de control de calidad
Publicado por primera vez (Estimar)
Actualizaciones de registros de estudio
Última actualización publicada (Actual)
Última actualización enviada que cumplió con los criterios de control de calidad
Última verificación
Más información
Términos relacionados con este estudio
Palabras clave
Términos MeSH relevantes adicionales
- Enfermedades de las vías respiratorias
- Enfermedades del sistema inmunológico
- Enfermedades pulmonares
- Hipersensibilidad, Inmediata
- Enfermedades bronquiales
- Enfermedades Pulmonares Obstructivas
- Hipersensibilidad Respiratoria
- Hipersensibilidad
- Asma
- Mecanismos moleculares de acción farmacológica
- Agentes quelantes
- Agentes secuestrantes
- Dimercaprol
Otros números de identificación del estudio
- 2012P0001076
- 1U19AI095261 (Subvención/contrato del NIH de EE. UU.)
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