PGC-1 ja mitokondrioiden toimintahäiriöt diabeteksessa
Tutkimuksen yleiskatsaus
Yksityiskohtainen kuvaus
Tutkijoiden aikaisemmassa tutkimuksessa on keskitytty määrittämään muutoksia luurankolihasten insuliiniherkkyyden muutoksia ennustavien tumakoodattujen mitokondriogeenien ilmentymisessä. Tavoitteena on määritellä mitokondrioiden toimintahäiriön ja luurankolihaksen insuliiniresistenssin välisen yhteyden taustalla olevat molekyylimekanismit.
Tämän tutkimuksen tarkoituksena on selvittää, vähentääkö kokeellinen lipidien ylitarjonta mitokondrioiden hengitystoimintaa. Käytämme mitokondriohengitystutkimuksia in vitro sekä massaspektrometriaa ja proteomiikkaanalyysiä testataksemme hypoteesia, että kokeellinen lipidien ylitarjonta:
- Vähentää mitokondrioiden hengitystä vasteena lipidipolttoaineille.
- Vähentää mitokondrioiden proteiinien määrää.
- Muuttaa proteiinien fosforylaatiota elektroninkuljetusketjussa.
Tutkittavana on kolme ryhmää: laihat, terveet kontrollihenkilöt (n=12), lihavat ei-diabeettiset (n=12) ja tyypin 2 diabetes mellitus (n=12) sairastavat yhteensä 36 henkilöä. Kaksikymmentä henkilöä on suorittanut tutkimuksen Arizona State Universityssä; loput 16 tutkittavaa kerätään Mayo Clinicissä Arizonassa.
Koehenkilöt tulevat Mayo Clinicille 2 kertaa. Tutkimuspäivänä 1 koehenkilöt seulotaan sairaushistorialla ja fyysisellä kokeella sekä 75 g:n suun kautta otettavalla glukoosinsietotestillä, mitataan kehon rasvaprosentti ja EKG:llä. Tutkimuspäivänä 2 koehenkilöt ilmoittavat klinikalle yön yli paaston jälkeen. Naishenkilöt tekevät virtsaraskaustestin. Lihasbiopsia tehdään pienen näytteen ottamiseksi yhdestä reidestä. Lipidi-infuusio suoritetaan 5 tunnin ajan (60 ml/h), ja verinäytteet otetaan 8 välein infuusion aikana. Viiden tunnin jakson lopussa otetaan toinen lihasbiopsia toisesta reidestä. Rasvainfuusio lopetetaan, koehenkilöille tarjotaan lounas ja heidän sallitaan poistua klinikalta.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Vaihe
- Ei sovellettavissa
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
Arizona
-
Scottsdale, Arizona, Yhdysvallat, 85259
- Mayo Clinic in Arizona
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- Tutkittavien on kyettävä kommunikoimaan mielekkäästi tutkijan kanssa ja heillä on oltava laillinen pätevyys antaa kirjallinen tietoinen suostumus.
- Koehenkilöt voivat olla kumpaa tahansa sukupuolta iän mukaan kussakin protokollassa kuvatulla tavalla. Naispuolisten koehenkilöiden on oltava ei-imettäviä, ja he ovat kelvollisia vain, jos heillä on negatiivinen raskaustesti koko tutkimusjakson ajan.
- Koehenkilöiden iän tulee vaihdella kussakin erityisessä protokollassa kuvatulla tavalla.
Koehenkilöillä on oltava seuraavat laboratorioarvot:
- Hematokriitti ≥ 35 tilavuus-%
- Seerumin kreatiniini ≤ 1,6 mg/dl
- Aspartaattiaminotransferaasi (AST) (SGOT) < 2 kertaa normaalin yläraja
- Alaniiniaminotransferaasi (ALT) (SGPT) < 2 kertaa normaalin yläraja
- Alkalinen fosfataasi < 2 kertaa normaalin yläraja
- Triglyseridit < 150 mg/dl.
- Protrombiiniaika (PT) 11,7-14,3 sekuntia (Intralipid/hepariini-infuusion aikana PT määritetään varmistamaan, että se on < 1,5-2,0 kertaa normaaliarvo.)
- Osittainen tromboplastiiniaika (PTT) 23,0-37,0 sekuntia.
Poissulkemiskriteerit:
- Koehenkilöt eivät saa saada mitään seuraavista lääkkeistä: tiatsidi- tai furosemididiureetit, beetasalpaajat tai muut krooniset lääkkeet, joilla tiedetään olevan haitallisia vaikutuksia glukoosin sietokykyyn, ellei potilas ole käyttänyt stabiilia annosta tällaisia aineita viimeisten kolmen kuukauden aikana pääsy tutkimukseen. Koehenkilöt voivat ottaa vakaan annoksen estrogeenia tai muuta hormonaalista korvaushoitoa, jos potilas on käyttänyt näitä aineita edellisten kolmen kuukauden ajan. Systeemisiä glukokortikoideja käyttävät potilaat eivät kuulu tähän.
- Potilaat, joilla on ollut kliinisesti merkittävä sydänsairaus (New Yorkin sydänluokitus korkeampi kuin aste II; enemmän kuin epäspesifisiä ST-T-aallon muutoksia EKG:ssä), perifeerinen verisuonisairaus (historian kyynärsairaus) tai keuhkosairaus (hengästys rasituksessa) yhden lennon tai vähemmän; epänormaalit hengitysäänet auskultaatiossa) ei tutkita.
- Äskettäinen systeeminen tai keuhkoembolia, hoitamaton korkean riskin proliferatiivinen retinopatia, äskettäinen verkkokalvon verenvuoto, hallitsematon verenpaine, systolinen verenpaine > 180, diastolinen verenpaine > 105, autonominen neuropatia, leposyke > 100, elektrolyyttihäiriöt.
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Ensisijainen käyttötarkoitus: Perustiede
- Jako: Ei satunnaistettu
- Inventiomalli: Rinnakkaistehtävä
- Naamiointi: Ei mitään (avoin tarra)
Aseet ja interventiot
Osallistujaryhmä / Arm |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Kokeellinen: Liikalihavat ei-diabeettiset kohteet
Kaikille tämän käsivarren henkilöille tehdään lipidi-infuusio ja lihaskoepalat.
|
Koehenkilöille tehdään lihasbiopsia, lipidi-infuusio 5 tunnin ajan (60 ml/h) ja lihasbiopsia lipidi-infuusion jälkeen.
|
|
Kokeellinen: Tyypin 2 diabeetikot
Kaikille tämän käsivarren henkilöille tehdään lipidi-infuusio ja lihaskoepalat.
|
Koehenkilöille tehdään lihasbiopsia, lipidi-infuusio 5 tunnin ajan (60 ml/h) ja lihasbiopsia lipidi-infuusion jälkeen.
|
|
Kokeellinen: Terveet kontrollikohteet
Kaikille tämän käsivarren henkilöille tehdään lipidi-infuusio ja lihaskoepalat.
|
Koehenkilöille tehdään lihasbiopsia, lipidi-infuusio 5 tunnin ajan (60 ml/h) ja lihasbiopsia lipidi-infuusion jälkeen.
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Mitokondriaalinen hengitys
Aikaikkuna: Tutkimuspäivä 2, lihasbiopsia noin 6 tuntia lipidi-infuusion aloittamisen jälkeen
|
Mitokondriohengitys mitataan mikropolarografialla.
|
Tutkimuspäivä 2, lihasbiopsia noin 6 tuntia lipidi-infuusion aloittamisen jälkeen
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Mitokondrioiden proteiinipitoisuus
Aikaikkuna: Tutkimuspäivä 2, lihasbiopsia noin 6 tuntia lipidi-infuusion aloittamisen jälkeen
|
Proteiinipitoisuus määritetään Lowryn menetelmällä.
75 mikrogrammaa lihaslysaattiproteiineja erotetaan 10 % natriumdodekyylisulfaattipolyakryyliamidigeelillä ja visualisoidaan sitten Coomassie-värillä.
Geelikaista leikataan kuutioiksi, pilkotaan trypsiinillä ja puhdistetaan, sitten määritetään proteiinien runsaus spektrilaskennan avulla.
|
Tutkimuspäivä 2, lihasbiopsia noin 6 tuntia lipidi-infuusion aloittamisen jälkeen
|
|
Proteiinien fosforylaatio
Aikaikkuna: Tutkimuspäivä 2, lihasbiopsia noin 6 tuntia lipidi-infuusion aloittamisen jälkeen
|
Fosfopeptidit mitataan massaspektrometrialla.
|
Tutkimuspäivä 2, lihasbiopsia noin 6 tuntia lipidi-infuusion aloittamisen jälkeen
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Yhteistyökumppanit
Tutkijat
- Päätutkija: Lawrence Mandarino, Ph.D, Mayo Clinic
Julkaisuja ja hyödyllisiä linkkejä
Hyödyllisiä linkkejä
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Arvio)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Arvio)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- 11-006065 Aim 5
- R01DK066483 (Yhdysvaltain NIH-apuraha/sopimus)
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .