Kohdunontelon huuhtelu seroosin munanjohtimen intraepiteliaalisen karsinooman diagnosoimiseksi (LUSTIC)

Termi "korkean asteen seroosisyöpä" (HGSC) kuvaa ryhmää munasarja-, munanjohtimen ja vatsakalvon syöpiä, joilla on aggressiivinen biologinen käyttäytyminen. HGSC on yleisin gynekologisten pahanlaatuisten kasvainten aiheuttama kuolinsyy läntisissä sivistysmaissa. Naisilla, joilla on tauti, on yleensä pitkälle edennyt sairaus, jossa etäpesäkkeet ovat levinneet koko vatsaonteloon diagnoosin aikaan. Viiden vuoden eloonjäämisaste on 10-30 prosenttia. Nykyisten diagnostisten työkalujen (CA-125 ja transvaginaalinen ultraääni) spesifisyys on alhainen ja tehoton HGSC:n havaitsemiseen riittävän aikaisessa vaiheessa kliinisten tulosten parantamiseksi. HGSC:n lopullinen diagnoosi perustuu enimmäkseen kirurgiseen vahvistukseen. Nämä havainnot osoittavat tehokkaan testin tarvetta HGSC:n varhaiseen havaitsemiseen. Yleisessä väestössä elinikäinen riski on 1,5 prosenttia.

Naisilla, joilla on ituradan mutaatioita BRCA1- ja BRCA2-geenissä tai joilla on vahva suvussa epiteelin munasarjasyöpä, on suuri riski saada rintasyöpä ja/tai HGSC:n kehittyminen. Perinnölliset tai perinnölliset oireyhtymät aiheuttavat noin 13 prosenttia invasiivisista epiteelin munasarjojen ja munanjohtimien syövistä. Munasarjasyövän elinikäinen riski on 35-46 prosenttia naisilla, joilla on BRCA1-geenimutaatioita, ja 13-23 prosenttia naisilla, joilla on BRCA2-mutaatioita. Jälleen, jopa tässä populaatiossa, jossa on korkea HGSC-riski, CA-125:n ja transvaginaalisen ultraäänitutkimuksen spesifisyys on edelleen liian alhainen ja tehoton parantamaan kliinisiä tuloksia.

Viime vuosina lisääntynyt tieteellinen näyttö on osoittanut, että suuri osa ei pelkästään suvun HGSC:stä kehittyy ensisijaisesti munanjohdin limakalvossa, joka muistuttaa Müllerin epiteeliä. Näitä esiastevaurioita kutsutaan "seroosiksi munanjohtimien intraepiteliaalisiksi karsinoomiksi" (STIC) ja niille on tunnusomaista p53:n yli-ilmentyminen immunohistokemiassa ja korkea Ki-67-leimausindeksi, joka osoittaa korkeaa proliferaatioindeksiä. Yli 90 prosentissa STIC-soluista on mutaatioita TP53-kasvainsuppressorigeenissä.

Nykyään riskiä vähentävä kahdenvälinen salpingoooforektomia (rrBSO) on tehokkain tapa vähentää HGSC-riskiä suuren riskin naisilla. Naisista, joilla on lisääntynyt HGSC-riski (useimmilla BRCA-mutaatioilla), joille tehtiin rrBSO, 4–17 prosentilla todetaan STIC- tai jopa invasiivinen kasvain, ja noin 80 prosenttia näistä kasvaimista on munanjohtimen ampullaarisessa osassa.

Viimeaikaiset löydökset korostivat STIC:ien pahanlaatuista potentiaalia. Histopatologisessa näytteessä voidaan usein osoittaa, että munanjohtimessa on solujen sisäistä irtoamista STIC-soluista. Tämä kasvainsolujen irtoaminen STIC-soluista näyttää olevan riskitekijä varhaiselle transperitoneaaliselle etäpesäkkeelle, jota esiintyy usein HGSC:ssä. STIC:ien seulonnalle on olemassa vahva kliininen tarve, koska ne ovat HGSC:n esiastevaurio. Nämä tosiasiat korostavat tehokkaan - ei-invasiivisen - testin tärkeyttä STIC-bakteerien varhaisessa havaitsemisessa.

Munasarjan pinta, munanjohtimet, kohtuontelo ja vatsaontelo muodostavat yhdessä kommunikoivan osaston. Putkien värekarvaisen limakalvon fysiologinen tehtävä on kuljettaa muna kohdun onteloon ovulaation jälkeen, mikä tekee todennäköiseksi, että STIC-soluista hilseileviä soluja löytyy kohdun ontelosta.

Paul Speiser ja Robert Zeillinger (Molecular Oncology Group, Yleisen gynekologian ja gynekologisen onkologian osasto, Wienin lääketieteellinen yliopisto, Itävalta) ovat kehittäneet lupaavan lähestymistavan STIC-bakteerien havaitsemiseen. Tätä lähestymistapaa kutsutaan ALPINE-tekniikaksi (Austrian Lavage Procedure for the Detection of munanjoen intraepiteliaaliset kasvaimet) (käsikirjoitus valmisteilla). Kohdunontelon ja proksimaalisten putkien nopean ja helpon huuhtelun helpottamiseksi kehitettiin erityinen katetri (MEDICOPLAST, MF 13005, katetri kohdun ja munanjohtimien huuhteluun). ALPINE-tekniikka sisältää kohdun ontelon ja proksimaalisten munanjohtimien huuhtelun ja tämän huuhtelunesteen myöhemmän analyysin pahanlaatuisten ja pahanlaatuisten solujen esiintymisen varalta.

Periaatteen osoittamiseksi, että munasarjasyövän kasvainsoluja erittyy ja niitä voidaan löytää kohdunontelon huuhtelunesteissä, kohdun huuhteluvedet kerättiin ennen kirurgista toimenpidettä munasarjasyövän epäilyn vuoksi laitoksessamme ja Leuvenin katolisen yliopiston gynekologisen onkologian osastossa. , Belgia. Pahanlaatuisuuden vahvistamisen jälkeen kasvainkudoksessa määritettiin geneettiset muutokset TP53- ja KRAS-geeneissä. Sarjassa, jossa oli 9 epiteelin munasarjasyöpäpotilasta (EOC) ja 1 sinettirengaskarsinooman munasarjaetäpesäke, näiden geneettisten muutosten esiintyminen tutkittiin huuhtelunäytteissä käyttämällä digitaalista pisara-PCR:ää (ddPCR). Näiden potilaiden kasvainkudoksesta havaittiin 10 geneettistä muutosta ja 9/10 (90 %) näistä muutoksista havaittiin myös vastaavassa huuhtelunäytteessä.

Lisäksi perustettiin suodatinlähestymistapa, jota seurasi p53-immunofluoresenssivärjäys, mikä vahvisti kasvainsolujen läsnäolon yhden lisäpotilaan huuhtelunäytteessä.

Seuraavassa vaiheessa Bert Vogelsteinin ryhmä (Johns Hopkins University, Baltimore, USA) analysoi 23 munasarjasyöpäpotilaan huuhtelunäytteet ja soveltuvin osin vastaavan kasvainkudoksen syväsekvensoinnilla. Munasarjasyöpään viittaavien geneettisten muutosten esiintyminen voitiin vahvistaa 18/23:ssa (78,3 %) huuhtelunäytteessä, joka sisälsi sekä varhaisen että pitkälle edenneen vaiheen.

Nämä tulokset ovat todiste siitä, että munasarjasyöpäsolut erittyvät munanjohtimiin ja kohdun onteloon, ja ne voidaan kerätä ALPINE-tekniikkamme avulla. Se tosiasia, että munasarjasyöpäsolut havaittiin erittäin herkästi kohdunontelon ja proksimaalisten putkien huuhtelussa, osoittaa, että tällä lähestymistavalla on potentiaalia varhaisessa diagnoosissa. Siksi tutkijat uskovat, että tätä menetelmää voitaisiin soveltaa myös korkean riskin potilaiden pahanlaatuisten muutosten havaitsemiseen.

Tutkimuksen tavoite:

Tällä tutkimuksella pyritään vastaamaan tieteelliseen kysymykseen, kulkeutuuko STIC-soluista hilseileviä soluja munanjohtimien kautta kohdun onteloon ja onko mahdollista havaita ne solut kohdun ontelon ja proksimaalisten munanjohtimien huuhtelunesteestä.

Menetelmät:

Tämän kysymyksen ratkaisemiseksi tutkijat tutkivat 20 huuhtelunäytettä ja niiden 20 vastaavaa STIC-positiivista kudosnäytettä naisilla, jotka valitsivat rrBSO:n lisääntyneen HGSC-riskin vuoksi (jotka kantavat useimmiten BRCA-mutaatiota), joilla ei ole aiemmin ollut munanjohtimien tukkeutumista sterilointia varten. Naiset, jotka päättävät poistaa munanjohtimet mutta säilyttää munasarjat, voivat myös osallistua tutkimukseen, samoin kuin naiset, jotka valitsevat rrBSO:n ja kohdunpoiston.