Lavage van de baarmoederholte voor de diagnose van sereus tubaal intra-epitheliaal carcinoom (LUSTIC)

De term "hooggradig sereus carcinoom" (HGSC) beschrijft een groep eierstok-, eileider- en peritoneale kankers met een agressief biologisch gedrag. HGSC is de belangrijkste doodsoorzaak door gynaecologische maligniteit in westerse geciviliseerde landen. Getroffen vrouwen hebben meestal een vergevorderd stadium van de ziekte met uitgezaaide verspreiding door de buikholte op het moment van diagnose. De overlevingspercentages na vijf jaar liggen tussen de 10 en 30 procent. De specificiteit van de huidige diagnostische hulpmiddelen (CA-125 en transvaginale echografie) is laag en niet effectief om HGSC vroeg genoeg te detecteren om de klinische resultaten te verbeteren. De definitieve diagnose van HGSC is meestal afhankelijk van chirurgische bevestiging. Deze bevindingen onderstrepen de noodzaak van een effectieve test voor vroege detectie van HGSC. In de algemene bevolking is het levenslange risico 1,5 procent.

Vrouwen met kiembaanmutaties in het BRCA1- en BRCA2-gen of een sterke familiegeschiedenis van epitheliale eierstokkanker hebben een hoog risico op de ontwikkeling van borstkanker en/of HGSC. Familiale of erfelijke syndromen zijn goed voor ongeveer 13 procent van de gevallen van invasieve epitheliale eierstok- en eileiderkanker. Het levenslange risico op eierstokkanker is 35 tot 46 procent bij vrouwen met BRCA1-genmutaties en 13 tot 23 procent bij vrouwen met BRCA2-mutaties. Nogmaals, zelfs in deze populatie met een hoog risico op HGSC, is de specificiteit van CA-125 en transvaginale echografie nog steeds te laag en niet effectief om de klinische resultaten te verbeteren.

In de afgelopen jaren is er steeds meer wetenschappelijk bewijs dat een groot deel van niet alleen familiale HGSC zich voornamelijk ontwikkelt in de bekleding van de eileider, die lijkt op het epitheel van Müller. Deze voorloperlaesies worden "sereuze tuba-intra-epitheliale carcinomen" (STIC's) genoemd en worden gekenmerkt door overexpressie van p53 op immunohistochemie en een hoge Ki-67-labelindex die wijst op een hoge proliferatie-index. In meer dan 90 procent dragen STIC's mutaties in het TP53-tumorsuppressorgen.

Wat vandaag betreft, is risicoverlagende bilaterale salpingo-ovariëctomie (rrBSO) de meest effectieve benadering om het risico op HGSC bij vrouwen met een hoog risico te verminderen. Van de vrouwen met een verhoogd risico op HGSC (de meesten met BRCA-mutaties) die rrBSO ondergingen, bleek 4 tot 17 procent een STIC of zelfs invasief neoplasma te hebben, en ongeveer 80 procent van deze neoplasmata bevindt zich in het ampullaire deel van de eileider.

Recente bevindingen benadrukten het kwaadaardige potentieel van STIC's. Op histopathologische monsters kan vaak intraluminale uitscheiding van tumorcellen van STIC's worden aangetoond in de eileider. Dit afstoten van tumorcellen van STIC's lijkt een risicofactor te zijn voor vroege transperitoneale metastase die vaak wordt aangetroffen in HGSC. Er is een sterke klinische behoefte aan screening op STIC's, aangezien deze de voorloper van HGSC zijn. Deze feiten onderstrepen het belang van een effectieve - niet-invasieve - test voor vroege detectie van STIC's.

Het eierstokoppervlak, de eileiders, de baarmoederholte en de buikholte vormen samen een communicerend compartiment. De fysiologische functie van de trilharenbekleding van de buisjes is om het ei na de ovulatie naar de baarmoederholte te transporteren, waardoor het waarschijnlijk wordt dat geëxfolieerde cellen van STIC's in de baarmoederholte kunnen worden gevonden.

Een veelbelovende aanpak voor de detectie van STIC's is vastgesteld door Paul Speiser en Robert Zeillinger (Molecular Oncology Group, Department of General Gynaecology and Gynaecological Oncology, Medical University of Vienna, Oostenrijk). Deze benadering wordt de ALPINE-techniek genoemd (Austrian Lavage Procedure for the Detection of tubal Intraepithelial Neoplasms) (manuscript in voorbereiding). Om een ​​snelle en gemakkelijke spoeling van de baarmoederholte en proximale slangen mogelijk te maken, werd een speciale katheter ontwikkeld (MEDICOPLAST, MF 13005, katheter voor baarmoeder- en eileidersspoeling). De ALPINE-techniek omvat een lavage van de baarmoederholte en proximale eileiders en daaropvolgende analyse van deze lavagevloeistof op de aanwezigheid van premaligne en kwaadaardige cellen.

Voor het principiële bewijs dat tumorcellen van eierstokkanker worden afgescheiden en teruggevonden kunnen worden in de lavages van de baarmoederholte, werden baarmoederspoelingen verzameld vóór een chirurgische ingreep wegens vermoedelijke eierstokkanker in onze instelling en aan de Katholieke Universiteit Leuven, Afdeling Gynaecologische Oncologie , België. Nadat maligniteit was bevestigd, werden genetische veranderingen in de TP53- en KRAS-genen bepaald in tumorweefsel. In een set van 9 epitheliale eierstokkankerpatiënten (EOC) en 1 eierstokmetastasen van een zegelringcarcinoom werd de aanwezigheid van deze genetische veranderingen onderzocht in lavagemonsters met behulp van digitale druppel-PCR (ddPCR). 10 genetische veranderingen werden geïdentificeerd in tumorweefsel van deze patiënten en 9/10 (90%) van deze veranderingen werden ook gedetecteerd in het overeenkomstige lavagemonster.

Verder werd een filterbenadering, gevolgd door p53-immunofluorescentiekleuring vastgesteld, waarmee de aanwezigheid van tumorcellen in het lavagemonster van één extra patiënt werd bevestigd.

In een volgende stap werden spoelmonsters van 23 patiënten met ovariumcarcinoom, en indien van toepassing corresponderend tumorweefsel, geanalyseerd door middel van deep sequencing door de groep van Bert Vogelstein (Johns Hopkins University, Baltimore, VS). De aanwezigheid van genetische veranderingen, indicatief voor eierstokkanker, kon worden bevestigd in 18/23 (78,3%) lavagemonsters, zowel in vroege als in gevorderde stadia.

Deze resultaten zijn het bewijs dat eierstokkankercellen in de eileiders en de baarmoederholte terechtkomen en kunnen worden verzameld via onze ALPINE-techniek. Het feit dat eierstokkankercellen met hoge gevoeligheid werden gedetecteerd in de lavage van de baarmoederholte en proximale buizen, toont aan dat deze benadering potentieel heeft voor vroege diagnose. Daarom zijn de onderzoekers ervan overtuigd dat deze methode ook kan worden toegepast bij het opsporen van premaligne veranderingen bij patiënten met een hoog risico.

Doel van de studie:

De huidige studie is gericht op het beantwoorden van de wetenschappelijke vraag of geëxfolieerde cellen van STIC's via de eileider in de baarmoederholte worden getransporteerd en of het mogelijk is om die cellen te detecteren in de spoelvloeistof van de baarmoederholte en proximale eileiders.

methoden:

Om deze vraag te beantwoorden, zullen de onderzoekers 20 lavagemonsters en hun 20 overeenkomstige STIC-positieve weefselmonsters bestuderen bij vrouwen die kiezen voor rrBSO vanwege een verhoogd risico op HGSC (meestal met een BRCA-mutatie), zonder een voorgeschiedenis van eileidersocclusie voor sterilisatie. Vrouwen die ervoor kiezen om de eileiders te laten verwijderen maar de eierstokken behouden, komen ook in aanmerking voor het onderzoek, evenals vrouwen die kiezen voor rrBSO plus hysterectomie.