Лаваж полости матки в диагностике серозного тубального интраэпителиального рака (LUSTIC)

Термин «серозная карцинома высокой степени злокачественности» (HGSC) описывает группу рака яичников, труб и брюшины с агрессивным биологическим поведением. HGSC является основной причиной смерти от гинекологических злокачественных новообразований в западных цивилизованных странах. Пораженные женщины, как правило, имеют поздние стадии заболевания с метастатическим распространением по всей брюшной полости на момент постановки диагноза. Пятилетняя выживаемость находится в диапазоне от 10 до 30 процентов. Специфичность современных диагностических инструментов (CA-125 и трансвагинальное УЗИ) низка и неэффективна для достаточно раннего выявления HGSC для улучшения клинических результатов. Окончательный диагноз HGSC в основном зависит от хирургического подтверждения. Эти результаты подчеркивают необходимость эффективного теста для раннего выявления HGSC. В общей популяции пожизненный риск составляет 1,5 процента.

Женщины с мутациями зародышевой линии в гене BRCA1 и BRCA2 или сильным семейным анамнезом эпителиального рака яичников имеют высокий риск развития рака молочной железы и/или развития HGSC. На семейные или наследственные синдромы приходится примерно 13% случаев инвазивного эпителиального рака яичников и фаллопиевых труб. Пожизненный риск рака яичников составляет от 35 до 46 процентов у женщин с мутациями гена BRCA1 и от 13 до 23 процентов у женщин с мутациями BRCA2. Опять же, даже в этой популяции с высоким риском HGSC специфичность CA-125 и трансвагинального УЗИ все еще слишком низка и неэффективна для улучшения клинических результатов.

За последние годы накопилось все больше научных данных о том, что большая часть не только семейных HGSC развивается в первую очередь в слизистой оболочке маточной трубы, которая напоминает мюллеров эпителий. Эти предшествующие поражения называются «серозными внутриэпителиальными карциномами маточных труб» (STIC) и характеризуются сверхэкспрессией p53 на иммуногистохимии и высоким индексом мечения Ki-67, указывающим на высокий индекс пролиферации. Более чем в 90% случаев STIC несут мутации в гене-супрессоре опухоли TP53.

На сегодняшний день двусторонняя сальпингоофорэктомия (rrBSO) для снижения риска является наиболее эффективным подходом к снижению риска HGSC у женщин с высоким риском. Среди женщин с повышенным риском HGSC (большинство с мутациями BRCA), перенесших rrBSO, от 4 до 17 процентов обнаруживают STIC или даже инвазивное новообразование, и примерно 80 процентов этих новообразований находятся в ампулярной части фаллопиевой трубы.

Недавние результаты выявили злокачественный потенциал STIC. В гистопатологическом образце часто можно продемонстрировать внутрипросветное выделение опухолевых клеток из STIC в маточной трубе. Это выделение опухолевых клеток из STIC, по-видимому, является фактором риска раннего трансперитонеального метастазирования, часто обнаруживаемого при HGSC. Существует острая клиническая потребность в скрининге STIC, поскольку они являются предшественниками HGSC. Эти факты подчеркивают важность эффективного неинвазивного теста для раннего выявления STIC.

Поверхность яичников, фаллопиевы трубы, полость матки и брюшная полость вместе образуют сообщающийся отдел. Физиологическая функция реснитчатой ​​выстилки труб заключается в транспортировке яйцеклетки в полость матки после овуляции, что делает вероятным обнаружение в полости матки отслоившихся клеток STIC.

Многообещающий подход к выявлению STICs был разработан Paul Speiser и Robert Zeillinger (Группа молекулярной онкологии, отделение общей гинекологии и гинекологической онкологии, Медицинский университет Вены, Австрия). Этот подход называется методом ALPINE (Австрийская процедура лаважа для обнаружения трубных интраэпителиальных новообразований) (рукопись готовится). Для облегчения быстрого и легкого промывания полости матки и проксимальных труб был разработан специальный катетер (MEDICOPLAST, MF 13005, катетер для промывания матки и труб). Техника ALPINE включает лаваж полости матки и проксимальных отделов маточных труб и последующий анализ этой лаважной жидкости на наличие предраковых и злокачественных клеток.

Для доказательства принципа, что опухолевые клетки от рака яичников выделяются и могут быть обнаружены в промывных водах полости матки, промывные воды матки были собраны перед хирургическим вмешательством по подозрению на злокачественное новообразование яичников в нашем учреждении и в Католическом университете Лёвен, Отделение гинекологической онкологии. , Бельгия. После подтверждения малигнизации в опухолевой ткани определяли генетические изменения в генах TP53 и KRAS. В группе из 9 пациентов с эпителиальным раком яичников (ЭРЯ) и 1 метастазами в яичники перстневидной карциномы наличие этих генетических изменений исследовали в образцах лаважа с использованием цифровой капельной ПЦР (ddPCR). В опухолевой ткани этих больных выявлено 10 генетических изменений, причем 9/10 (90%) этих изменений выявлено и в соответствующем препарате лаважа.

Кроме того, был установлен метод фильтрации с последующим иммунофлуоресцентным окрашиванием p53, что подтвердило наличие опухолевых клеток в образце лаважа еще у одного пациента.

На следующем этапе группа Берта Фогельштейна (Университет Джона Хопкинса, Балтимор, США) проанализировала образцы лаважа 23 пациентов с карциномой яичника и, если применимо, соответствующую ткань опухоли с помощью глубокого секвенирования. Наличие генетических изменений, характерных для рака яичников, удалось подтвердить в 18/23 (78,3%) образцах лаважа, включая как ранние, так и запущенные стадии.

Эти результаты являются доказательством того, что раковые клетки яичников попадают в фаллопиевы трубы и полость матки, и их можно собрать с помощью нашей методики ALPINE. Тот факт, что клетки рака яичников выявлялись с высокой чувствительностью в лаваже полости матки и проксимальных труб, свидетельствует о перспективности данного подхода в ранней диагностике. Поэтому исследователи уверены, что этот метод может быть использован для выявления предраковых изменений и у пациентов высокого риска.

Цель исследования:

Настоящее исследование направлено на ответ на научный вопрос, попадают ли отслоившиеся клетки STIC в полость матки через фаллопиевы трубы и можно ли обнаружить эти клетки в лаважной жидкости из полости матки и проксимальных отделов фаллопиевых труб.

Методы:

Чтобы ответить на этот вопрос, исследователи изучат 20 образцов лаважа и их 20 соответствующих STIC-положительных образцов тканей у женщин, которые выбрали rrBSO из-за повышенного риска HGSC (в основном с мутацией BRCA), без истории окклюзии маточных труб для стерилизации. Женщины, которые решили удалить фаллопиевы трубы, но сохранили яичники, также имеют право на участие в исследовании, как и женщины, которые выбрали rrBSO в сочетании с гистерэктомией.