Lavagem da Cavidade Uterina para o Diagnóstico de Carcinoma Intraepitelial Tubário Seroso (LUSTIC)

O termo "carcinoma seroso de alto grau" (HGSC) descreve um grupo de cânceres ovarianos, tubários e peritoneais com comportamento biológico agressivo. HGSC é a principal causa de morte por malignidade ginecológica em países ocidentais civilizados. As mulheres afetadas geralmente apresentam doença em estágio avançado com disseminação metastática por toda a cavidade abdominal no momento do diagnóstico. As taxas de sobrevivência de cinco anos estão na faixa de 10 a 30 por cento. A especificidade das ferramentas de diagnóstico atuais (CA-125 e ultrassonografia transvaginal) é baixa e ineficaz na detecção precoce de HGSC para melhorar os resultados clínicos. O diagnóstico definitivo de HGSC depende principalmente da confirmação cirúrgica. Esses achados sublinham a necessidade de um teste eficaz para a detecção precoce de HGSC. Na população em geral, o risco ao longo da vida é de 1,5 por cento.

Mulheres com mutações germinativas nos genes BRCA1 e BRCA2 ou um forte histórico familiar de câncer epitelial de ovário apresentam alto risco de câncer de mama e/ou desenvolvimento de HGSC. As síndromes familiares ou hereditárias representam aproximadamente 13% dos casos de câncer epitelial invasivo de ovário e de trompas de Falópio. O risco vitalício de câncer de ovário é de 35 a 46 por cento em mulheres com mutações no gene BRCA1 e 13 a 23 por cento naquelas com mutações no gene BRCA2. Novamente, mesmo nessa população com alto risco para HGSC, a especificidade do CA-125 e da ultrassonografia transvaginal ainda é muito baixa e ineficaz para melhorar os resultados clínicos.

Nos últimos anos, evidências científicas crescentes conglomeraram que uma grande proporção de HGSC não apenas familiar se desenvolve principalmente no revestimento da trompa de Falópio, que se assemelha ao epitélio Mülleriano. Essas lesões precursoras são chamadas de "carcinomas intraepiteliais tubários serosos" (STICs) e são caracterizadas pela superexpressão de p53 na imuno-histoquímica e alto índice de marcação de Ki-67, indicando um alto índice de proliferação. Em mais de 90%, os STICs carregam mutações no gene supressor de tumor TP53.

Atualmente, a salpingo-ooforectomia bilateral com redução de risco (rrBSO) é a abordagem mais eficaz para reduzir o risco de HGSC em mulheres de alto risco. Entre as mulheres com risco aumentado de HGSC (a maioria com mutações BRCA) que foram submetidas a rrBSO, 4 a 17 por cento têm STIC ou mesmo neoplasia invasiva, e aproximadamente 80 por cento dessas neoplasias estão na parte ampular da trompa de falópio.

Descobertas recentes destacaram o potencial maligno dos STICs. No espécime histopatológico, o derramamento intraluminal de células tumorais de STICs pode ser frequentemente demonstrado na trompa de Falópio. Este derramamento de células tumorais de STICs parece ser um fator de risco para metástase transperitoneal precoce freqüentemente encontrada em HGSC. Há uma forte necessidade clínica de triagem para STICs, uma vez que são a lesão precursora de HGSC. Esses fatos reforçam a importância de um teste eficaz - não invasivo - para a detecção precoce de STICs.

A superfície ovariana, as trompas de Falópio, a cavidade uterina e a cavidade peritoneal formam um compartimento comunicante. A função fisiológica do revestimento ciliado das trompas é transportar o óvulo para a cavidade uterina após a ovulação, tornando assim provável que células esfoliadas de STICs possam ser encontradas na cavidade uterina.

Uma abordagem promissora para a detecção de STICs foi estabelecida por Paul Speiser e Robert Zeillinger (Grupo de Oncologia Molecular, Departamento de Ginecologia Geral e Oncologia Ginecológica, Universidade Médica de Viena, Áustria). Essa abordagem é chamada de técnica ALPINE (Austrian Lavage Procedure for the Detection of tubal Intraepitelial Neoplasms) (manuscrito em preparação). Para facilitar a lavagem rápida e fácil da cavidade uterina e das trompas proximais, foi desenvolvido um cateter especial (MEDICOPLAST, MF 13005, cateter para lavagem uterina e tubária). A técnica ALPINE inclui uma lavagem da cavidade uterina e das trompas de falópio proximais e análise subsequente desse fluido de lavagem para a presença de células pré-malignas e malignas.

Para a prova do princípio de que as células tumorais do câncer de ovário são eliminadas e podem ser encontradas nas lavagens da cavidade uterina, as lavagens uterinas foram coletadas antes de uma intervenção cirúrgica para suspeita de malignidade ovariana em nossa instituição e na Universidade Católica de Leuven, Divisão de Oncologia Ginecológica , Bélgica. Após a confirmação da malignidade, as alterações genéticas nos genes TP53 e KRAS foram determinadas no tecido tumoral. Em um conjunto de 9 pacientes com câncer epitelial de ovário (EOC) e 1 metástase ovariana de um carcinoma em anel de sinete, a presença dessas alterações genéticas foi examinada em amostras de lavagem, usando PCR de gotículas digitais (ddPCR). 10 alterações genéticas foram identificadas no tecido tumoral desses pacientes e 9/10 (90%) dessas alterações também foram detectadas no espécime de lavagem correspondente.

Além disso, uma abordagem de filtro, seguida de coloração de imunofluorescência p53, foi estabelecida, confirmando a presença de células tumorais na amostra de lavagem de um paciente adicional.

Em uma etapa seguinte, amostras de lavado de 23 pacientes com carcinoma de ovário e, se aplicável, tecido tumoral correspondente, foram analisadas por sequenciamento profundo pelo grupo de Bert Vogelstein (Johns Hopkins University, Baltimore, EUA). A presença de alterações genéticas, indicativas de câncer de ovário, pôde ser confirmada em 18/23 (78,3%) espécimes de lavado, incluindo estágios iniciais e avançados.

Esses resultados são a prova de que as células de câncer de ovário são eliminadas nas trompas de falópio e na cavidade uterina e podem ser coletadas por meio de nossa técnica ALPINE. O fato de células de câncer de ovário terem sido detectadas com alta sensibilidade na lavagem da cavidade uterina e das trompas proximais mostra que essa abordagem tem potencial no diagnóstico precoce. Portanto, os investigadores estão confiantes de que este método também pode ser aplicado na detecção de alterações pré-malignas em pacientes de alto risco.

Objetivo do estudo:

O presente estudo visa responder à questão científica, se as células esfoliadas dos STICs são transportadas para a cavidade uterina através da trompa de Falópio e se é possível detectar essas células no fluido de lavagem da cavidade uterina e das trompas de Falópio proximais.

Métodos:

Para responder a essa questão, os pesquisadores estudarão 20 amostras de lavagem e suas 20 amostras de tecido STIC-positivo correspondentes em mulheres que optam por rrBSO devido ao risco aumentado de HGSC (principalmente portadoras de uma mutação BRCA), sem histórico de oclusão tubária para esterilização. As mulheres que optam por remover as trompas de falópio, mas os ovários preservados, também são elegíveis para o estudo, assim como as mulheres que optam por rrBSO mais histerectomia.