Sköljning av livmoderhålan för diagnos av serös tubal intraepitelial karcinom (LUSTIC)

Termen "höggradigt seröst karcinom" (HGSC) beskriver en grupp av äggstockscancer, tubal och peritoneal cancer med ett aggressivt biologiskt beteende. HGSC är den vanligaste dödsorsaken till följd av gynekologisk malignitet i västerländska civiliserade länder. Kvinnor som drabbas har vanligtvis en sjukdom i framskridet stadium med metastaserad spridning i bukhålan vid tidpunkten för diagnos. Femårsöverlevnad ligger i intervallet 10 till 30 procent. Specificiteten hos nuvarande diagnostiska verktyg (CA-125 och transvaginal ultraljud) är låg och ineffektiva för att upptäcka HGSC tidigt nog för att förbättra kliniska resultat. Definitiv diagnos av HGSC förlitar sig mest på kirurgisk bekräftelse. Dessa fynd understryker behovet av ett effektivt test för tidig upptäckt av HGSC. I den allmänna befolkningen är livstidsrisken 1,5 procent.

Kvinnor med könslinjemutationer i BRCA1- och BRCA2-genen eller en stark familjehistoria av epitelial äggstockscancer har en hög risk för bröstcancer och/eller HGSC-utveckling. Familjärt eller ärftligt syndrom står för cirka 13 procent av fallen av invasiv epitelial äggstockscancer och äggledare. Livstidsrisken för äggstockscancer är 35 till 46 procent hos kvinnor med BRCA1-genmutationer och 13 till 23 procent hos de med BRCA2-mutationer. Återigen, även i denna population med hög risk för HGSC, är specificiteten för CA-125 och transvaginal ultraljud fortfarande för låg och ineffektiv för att förbättra kliniska resultat.

Under de senaste åren har ökande vetenskapliga bevis konglomerat att en stor del av inte bara familjär HGSC utvecklas främst i slemhinnan i äggledaren, som liknar Müllerian epitel. Dessa prekursorlesioner kallas "serösa tubala intraepitelial karcinom" (STICs) och kännetecknas av p53-överuttryck på immunhistokemi och högt Ki-67-märkningsindex, vilket indikerar ett högt proliferationsindex. Hos över 90 procent bär STICs på mutationer i TP53-tumörsuppressorgenen.

För idag är riskreducerande bilateral salpingo-ooforektomi (rrBSO) den mest effektiva metoden för att minska risken för HGSC hos högriskkvinnor. Bland kvinnor med en ökad risk för HGSC (de flesta med BRCA-mutationer) som genomgått rrBSO, visar sig 4 till 17 procent ha en STIC eller till och med invasiv neoplasm, och cirka 80 procent av dessa neoplasmer finns i den ampulära delen av äggledaren.

Nyligen genomförda fynd lyfte fram den maligna potentialen hos STIC. På histopatologiska prover kan intraluminal utsöndring av tumörceller från STIC ofta påvisas i äggledaren. Denna utsöndring av tumörceller från STIC verkar vara en riskfaktor för tidig transperitoneal metastasering som ofta finns i HGSC. Det finns ett starkt kliniskt behov av screening för STIC, eftersom de är prekursorskadan till HGSC. Dessa fakta understryker vikten av ett effektivt - icke-invasivt - test för tidig upptäckt av STIC.

Ovarieytan, äggledarna, livmoderhålan och bukhålan bildar tillsammans ett kommunicerande fack. Den fysiologiska funktionen hos den cilierade slemhinnan i rören är att transportera ägget in i livmoderhålan efter ägglossning, vilket gör det troligt att exfolierade celler från STIC kan hittas i livmoderhålan.

Ett lovande tillvägagångssätt för detektering av STIC har etablerats av Paul Speiser och Robert Zeillinger (Molecular Oncology Group, Institutionen för allmän gynekologi och gynekologisk onkologi, Medical University of Wien, Österrike). Detta tillvägagångssätt kallas ALPINE-tekniken (österrikisk sköljningsprocedur för detektion av tubala intraepitelial neoplasmer) (manuskript under förberedelse). För att underlätta en snabb och enkel sköljning av livmoderhålan och proximala rör utvecklades en speciell kateter (MEDICOPLAST, MF 13005, kateter för livmoder- och tubalsköljning). ALPINE-tekniken inkluderar sköljning av livmoderhålan och proximala äggledare och efterföljande analys av denna sköljvätska med avseende på förekomsten av premaligna och maligna celler.

För principbeviset att tumörceller från äggstockscancer fälls ut och kan hittas i sköljningar av livmoderhålan, samlades livmodersköljningar in före ett kirurgiskt ingrepp för misstänkt ovariemalignitet vid vår institution och vid katolska universitetet i Leuven, avdelningen för gynekologisk onkologi , Belgien. Efter att malignitet bekräftats, bestämdes genetiska förändringar i TP53- och KRAS-generna i tumörvävnad. I en uppsättning av 9 patienter med epitelial äggstockscancer (EOC) och 1 äggstocksmetastaser av ett signetringkarcinom undersöktes förekomsten av dessa genetiska förändringar i sköljprover med användning av digital dropp-PCR (ddPCR). 10 genetiska förändringar identifierades i tumörvävnad hos dessa patienter och 9/10 (90%) av dessa förändringar upptäcktes också i motsvarande sköljprov.

Dessutom etablerades ett filtertillvägagångssätt, följt av p53-immunfluorescensfärgning, vilket bekräftar närvaron av tumörceller i sköljprovet från ytterligare en patient.

I ett nästa steg analyserades sköljprover av 23 äggstockscancerpatienter, och om tillämpligt motsvarande tumörvävnad, genom djupsekvensering av gruppen Bert Vogelstein (Johns Hopkins University, Baltimore, USA). Förekomsten av genetiska förändringar, som tyder på äggstockscancer, kunde bekräftas i 18/23 (78,3 %) sköljprov inklusive både tidiga och avancerade stadier.

Dessa resultat är bevis på att äggstockscancerceller fälls in i äggledarna och livmoderhålan och kan samlas in genom vår ALPIN-teknik. Det faktum att äggstockscancerceller upptäcktes med hög känslighet vid sköljning av livmoderhålan och proximala rör visar att detta tillvägagångssätt har potential vid tidig diagnos. Därför är utredarna övertygade om att denna metod också skulle kunna användas för att upptäcka premaligna förändringar hos högriskpatienter.

Syfte med studien:

Den aktuella studien syftar till att besvara den vetenskapliga frågan, om exfolierade celler från STICs transporteras in i livmoderhålan via äggledaren, och om det är möjligt att upptäcka dessa celler i sköljvätskan från livmoderhålan och proximala äggledare.

Metoder:

För att ta itu med denna fråga kommer utredarna att studera 20 sköljprover och deras 20 motsvarande STIC-positiva vävnadsprover hos kvinnor som väljer rrBSO på grund av ökad risk för HGSC (mestadels bärande på en BRCA-mutation), utan en historia av tubal ocklusion för sterilisering. Kvinnor som väljer att få äggledarna borttagna men äggstockarna bevarade är också berättigade till studien, liksom kvinnor som väljer rrBSO plus hysterektomi.