Lavage af livmoderhulen til diagnosticering af serøs tubal intraepitelial carcinom (LUSTIC)

Udtrykket "højgradigt serøst carcinom" (HGSC) beskriver en gruppe af ovarie-, tubal- og peritonealcancer med en aggressiv biologisk adfærd. HGSC er den førende dødsårsag fra gynækologisk malignitet i vestlige civiliserede lande. Kvinder, der er ramt, har normalt fremskreden sygdom med metastatisk spredning i bughulen på tidspunktet for diagnosen. Fem-års overlevelsesrater er i intervallet 10 til 30 procent. Specificiteten af ​​nuværende diagnostiske værktøjer (CA-125 og transvaginal ultralyd) er lav og ineffektiv til at opdage HGSC tidligt nok til at forbedre de kliniske resultater. Den endelige diagnose af HGSC afhænger for det meste af kirurgisk bekræftelse. Disse resultater understreger behovet for en effektiv test til tidlig påvisning af HGSC. I den almindelige befolkning er livstidsrisikoen 1,5 procent.

Kvinder med kimlinjemutationer i BRCA1- og BRCA2-genet eller en stærk familiehistorie med epitelial ovariecancer har en høj risiko for brystkræft og/eller HGSC-udvikling. Familiære eller arvelige syndromer tegner sig for cirka 13 procent af tilfældene af invasiv epitelial ovarie- og æggelederkræft. Livstidsrisikoen for kræft i æggestokkene er 35 til 46 procent hos kvinder med BRCA1-genmutationer og 13 til 23 procent hos dem med BRCA2-mutationer. Igen, selv i denne population med høj risiko for HGSC, er specificiteten af ​​CA-125 og transvaginal ultralyd stadig for lav og ineffektiv til at forbedre kliniske resultater.

I løbet af de sidste år har voksende videnskabelige beviser konglomereret, at en stor del af ikke kun familiær HGSC udvikler sig primært i slimhinden i æggelederen, der ligner Müllerian epitel. Disse prækursorlæsioner kaldes "serøse tubale intraepiteliale carcinomer" (STIC'er) og er karakteriseret ved p53-overekspression på immunhistokemi og højt Ki-67-mærkningsindeks, hvilket indikerer et højt proliferationsindeks. Hos over 90 procent bærer STIC'er mutationer i TP53-tumorsuppressorgenet.

Hvad angår i dag, er risikoreducerende bilateral salpingo-ooforektomi (rrBSO) den mest effektive tilgang til at reducere risikoen for HGSC hos højrisikokvinder. Blandt kvinder med en øget risiko for HGSC (de fleste med BRCA-mutationer), som gennemgik rrBSO, viser sig 4 til 17 procent at have en STIC eller endda invasiv neoplasma, og cirka 80 procent af disse neoplasmer er i den ampulære del af æggelederen.

Nylige resultater fremhævede det maligne potentiale af STIC'er. På histopatologiske prøver kan intraluminal udskillelse af tumorceller fra STIC'er ofte påvises i æggelederen. Denne udskillelse af tumorceller fra STIC'er ser ud til at være en risikofaktor for tidlig transperitoneal metastaser, der ofte findes i HGSC. Der er et stærkt klinisk behov for screening for STIC'er, da de er forstadielæsionen til HGSC. Disse fakta understreger vigtigheden af ​​en effektiv - ikke-invasiv - test til tidlig påvisning af STIC'er.

Ovarieoverfladen, æggelederne, livmoderhulen og bughulen danner tilsammen et kommunikerende rum. Den fysiologiske funktion af den cilierede slimhinde i rørene er at transportere ægget ind i livmoderhulen efter ægløsning, hvilket gør det sandsynligt, at eksfolierede celler fra STIC'er kan findes i livmoderhulen.

En lovende tilgang til påvisning af STIC'er er blevet etableret af Paul Speiser og Robert Zeillinger (Molecular Oncology Group, Department of General Gynecology and Gynaecologic Oncology, Medical University of Vienna, Austria). Denne tilgang kaldes ALPINE-teknikken (østrigsk lavage-procedure til påvisning af tubale intraepiteliale neoplasmer) (manuskript under udarbejdelse). For at lette en hurtig og nem udskylning af livmoderhulen og proksimale rør blev der udviklet et specielt kateter (MEDICOPLAST, MF 13005, kateter til uterin- og tubaskylling). ALPINE-teknikken omfatter en udskylning af livmoderhulen og de proksimale æggeledere og efterfølgende analyse af denne skyllevæske for tilstedeværelsen af ​​præ-maligne og ondartede celler.

For principielt bevis på, at tumorceller fra kræft i æggestokkene udskilles og kan findes i udskylning af livmoderhulen, blev livmoderskylninger indsamlet før et kirurgisk indgreb for mistanke om ovarie-malignitet på vores institution og på det katolske universitet Leuven, afdeling gynækologisk onkologi , Belgien. Efter at malignitet var bekræftet, blev genetiske ændringer i TP53- og KRAS-generne bestemt i tumorvæv. I et sæt af 9 epiteliale ovariecancerpatienter (EOC) og 1 ovariemetastaser af et signetringcarcinom blev tilstedeværelsen af ​​disse genetiske ændringer undersøgt i lavageprøver ved hjælp af digital dråbe-PCR (ddPCR). 10 genetiske ændringer blev identificeret i tumorvæv hos disse patienter, og 9/10 (90%) af disse ændringer blev også påvist i den tilsvarende skylleprøve.

Endvidere blev der etableret en filtertilgang efterfulgt af p53-immunfluorescensfarvning, hvilket bekræfter tilstedeværelsen af ​​tumorceller i skylleprøven fra en yderligere patient.

I et næste trin blev skylleprøver af 23 ovariekarcinompatienter, og hvis relevant tilsvarende tumorvæv, analyseret gennem dyb sekventering af gruppen af ​​Bert Vogelstein (Johns Hopkins University, Baltimore, USA). Tilstedeværelsen af ​​genetiske ændringer, som er indikative for ovariecancer, kunne bekræftes i 18/23 (78,3%) skylleprøver inklusive både tidlige og fremskredne stadier.

Disse resultater er bevis på, at æggestokkræftceller kastes ind i æggelederne og livmoderhulen og kan opsamles gennem vores ALPINE-teknik. Det faktum, at ovariecancerceller blev påvist med høj følsomhed i udskylningen af ​​livmoderhulen og proksimale rør viser, at denne tilgang har potentiale i tidlig diagnose. Derfor er efterforskerne overbevist om, at denne metode også kan anvendes til påvisning af præmaligne forandringer hos højrisikopatienter.

Formålet med undersøgelsen:

Den aktuelle undersøgelse har til formål at besvare det videnskabelige spørgsmål, om eksfolierede celler fra STIC'er bliver transporteret ind i livmoderhulen via æggelederen, og om det er muligt at påvise disse celler i skyllevæsken fra livmoderhulen og proksimale æggeledere.

Metoder:

For at løse dette spørgsmål vil efterforskerne studere 20 skylleprøver og deres 20 tilsvarende STIC-positive vævsprøver hos kvinder, der vælger rrBSO på grund af øget risiko for HGSC (for det meste bærende på en BRCA-mutation), uden en historie med tubal okklusion til sterilisering. Kvinder, der vælger at få fjernet æggelederne, men æggestokkene bevares, er også berettigede til undersøgelsen, ligesom kvinder, der vælger rrBSO plus hysterektomi.