Lavage der Gebärmutterhöhle zur Diagnose des serösen tubalen intraepithelialen Karzinoms (LUSTIC)

Der Begriff "hochgradiges seröses Karzinom" (HGSC) beschreibt eine Gruppe von Eierstock-, Eileiter- und Bauchfellkrebs mit einem aggressiven biologischen Verhalten. HGSC ist die häufigste Todesursache durch gynäkologische Malignität in westlichen zivilisierten Ländern. Betroffene Frauen haben in der Regel zum Zeitpunkt der Diagnose eine Erkrankung im fortgeschrittenen Stadium mit Metastasen in der gesamten Bauchhöhle. Fünf-Jahres-Überlebensraten liegen im Bereich von 10 bis 30 Prozent. Die Spezifität aktueller diagnostischer Instrumente (CA-125 und transvaginaler Ultraschall) ist gering und ineffektiv bei der Früherkennung von HGSC, um die klinischen Ergebnisse zu verbessern. Die definitive Diagnose von HGSC beruht hauptsächlich auf einer chirurgischen Bestätigung. Diese Befunde unterstreichen die Notwendigkeit eines wirksamen Tests zur Früherkennung von HGSC. In der Allgemeinbevölkerung liegt das Lebenszeitrisiko bei 1,5 Prozent.

Frauen mit Keimbahnmutationen im BRCA1- und BRCA2-Gen oder einer starken Familiengeschichte von epithelialem Eierstockkrebs tragen ein hohes Risiko für die Entwicklung von Brustkrebs und/oder HGSC. Familiäre oder vererbte Syndrome machen etwa 13 Prozent der Fälle von invasivem epithelialem Eierstock- und Eileiterkrebs aus. Das Lebenszeitrisiko für Eierstockkrebs beträgt 35 bis 46 Prozent bei Frauen mit BRCA1-Genmutationen und 13 bis 23 Prozent bei Frauen mit BRCA2-Mutationen. Auch in dieser Population mit hohem Risiko für HGSC ist die Spezifität von CA-125 und transvaginaler Sonographie immer noch zu gering und unwirksam, um die klinischen Ergebnisse zu verbessern.

In den letzten Jahren häuften sich wissenschaftliche Beweise dafür, dass sich ein großer Teil der nicht nur familiären HGSC primär in der Schleimhaut des Eileiters entwickelt, die dem Müllerschen Epithel ähnelt. Diese Vorläuferläsionen werden "seröse tubale intraepitheliale Karzinome" (STICs) genannt und sind durch p53-Überexpression in der Immunhistochemie und einen hohen Ki-67-Markierungsindex gekennzeichnet, was auf einen hohen Proliferationsindex hinweist. Bei über 90 Prozent tragen STICs Mutationen im TP53-Tumorsuppressorgen.

Heute ist die risikomindernde bilaterale Salpingo-Oophorektomie (rrBSO) der effektivste Ansatz zur Verringerung des HGSC-Risikos bei Frauen mit hohem Risiko. Unter den Frauen mit erhöhtem HGSC-Risiko (die meisten mit BRCA-Mutationen), die sich einer rrBSO unterzogen haben, wurde bei 4 bis 17 Prozent ein STIC oder sogar eine invasive Neubildung festgestellt, und etwa 80 Prozent dieser Neubildungen befinden sich im ampullären Teil des Eileiters.

Jüngste Ergebnisse haben das maligne Potenzial von STICs hervorgehoben. Auf histopathologischem Präparat lässt sich häufig eine intraluminale Ausscheidung von Tumorzellen aus STICs im Eileiter nachweisen. Diese Ausscheidung von Tumorzellen aus STICs scheint ein Risikofaktor für eine frühe transperitoneale Metastasierung zu sein, die häufig bei HGSC gefunden wird. Es besteht ein starker klinischer Bedarf für das Screening auf STICs, da sie die Vorläuferläsion von HGSC sind. Diese Fakten unterstreichen die Bedeutung eines effektiven – nicht-invasiven – Tests zur Früherkennung von STICs.

Die Eierstockoberfläche, die Eileiter, die Gebärmutterhöhle und die Bauchhöhle bilden alle zusammen ein kommunizierendes Kompartiment. Die physiologische Funktion der bewimperten Auskleidung der Eileiter besteht darin, das Ei nach der Ovulation in die Gebärmutterhöhle zu transportieren, was es wahrscheinlich macht, dass abgeblätterte Zellen von STICs in der Gebärmutterhöhle gefunden werden können.

Ein vielversprechender Ansatz zum Nachweis von STICs wurde von Paul Speiser und Robert Zeillinger (Molekulare Onkologie-Gruppe, Abteilung für Allgemeine Gynäkologie und Gynäkologische Onkologie, Medizinische Universität Wien, Österreich) etabliert. Dieser Ansatz wird als ALPINE-Technik (Austrian Lavage Procedure for the Detection of tubal Intraepithelial Neoplasms) bezeichnet (Manuskript in Vorbereitung). Um eine schnelle und einfache Spülung der Gebärmutterhöhle und der proximalen Tuben zu ermöglichen, wurde ein spezieller Katheter entwickelt (MEDICOPLAST, MF 13005, Katheter für die Gebärmutter- und Eileiterspülung). Die ALPINE-Technik umfasst eine Spülung der Gebärmutterhöhle und der proximalen Eileiter und eine anschließende Analyse dieser Spülflüssigkeit auf das Vorhandensein von prämalignen und bösartigen Zellen.

Für den prinzipiellen Nachweis, dass Tumorzellen von Eierstockkrebs ausgeschieden werden und in den Lavagen der Gebärmutterhöhle gefunden werden können, wurden an unserer Einrichtung und an der Katholischen Universität Leuven, Abteilung Gynäkologische Onkologie, Gebärmutterspülungen vor einem chirurgischen Eingriff bei Verdacht auf Ovarialmalignome gesammelt , Belgien. Nach Bestätigung der Malignität wurden im Tumorgewebe genetische Veränderungen in den Genen TP53 und KRAS festgestellt. Bei einer Gruppe von 9 Patienten mit epithelialem Ovarialkarzinom (EOC) und 1 Ovarialmetastasen eines Siegelringkarzinoms wurde das Vorhandensein dieser genetischen Veränderungen in Lavage-Proben unter Verwendung von digitaler Tröpfchen-PCR (ddPCR) untersucht. 10 genetische Veränderungen wurden im Tumorgewebe dieser Patienten identifiziert und 9/10 (90%) dieser Veränderungen wurden auch in der entsprechenden Lavage-Probe nachgewiesen.

Darüber hinaus wurde ein Filteransatz, gefolgt von einer p53-Immunfluoreszenzfärbung etabliert, was das Vorhandensein von Tumorzellen in der Lavage-Probe eines weiteren Patienten bestätigte.

In einem nächsten Schritt wurden Lavage-Proben von 23 Ovarialkarzinom-Patientinnen und ggf. entsprechendes Tumorgewebe durch Tiefensequenzierung durch die Gruppe von Bert Vogelstein (Johns Hopkins University, Baltimore, USA) analysiert. Das Vorhandensein von genetischen Veränderungen, die auf Eierstockkrebs hindeuten, konnte in 18/23 (78,3 %) Lavage-Proben bestätigt werden, sowohl im frühen als auch im fortgeschrittenen Stadium.

Diese Ergebnisse sind ein Beweis dafür, dass Eierstockkrebszellen in die Eileiter und die Gebärmutterhöhle abgegeben werden und mit unserer ALPINE-Technik gesammelt werden können. Die Tatsache, dass Eierstockkrebszellen mit hoher Sensitivität in der Lavage des Cavum uteri und der proximalen Eileiter nachgewiesen wurden, zeigt, dass dieser Ansatz Potenzial für die Früherkennung hat. Daher sind die Forscher zuversichtlich, dass diese Methode auch zum Nachweis prämaligner Veränderungen bei Hochrisikopatienten eingesetzt werden könnte.

Ziel der Studie:

Die aktuelle Studie zielt darauf ab, die wissenschaftliche Frage zu beantworten, ob abgeblätterte Zellen von STICs über den Eileiter in die Gebärmutterhöhle transportiert werden und ob es möglich ist, diese Zellen in der Lavageflüssigkeit aus der Gebärmutterhöhle und den proximalen Eileitern nachzuweisen.

Methoden:

Um diese Frage zu beantworten, werden die Forscher 20 Lavage-Proben und ihre 20 entsprechenden STIC-positiven Gewebeproben bei Frauen untersuchen, die sich wegen eines erhöhten HGSC-Risikos (meistens Träger einer BRCA-Mutation) für rrBSO entscheiden, ohne dass ein Tubenverschluss in der Vorgeschichte zur Sterilisation aufgetreten ist. Frauen, die sich dafür entscheiden, die Eileiter entfernen zu lassen, aber die Eierstöcke erhalten, sind ebenfalls für die Studie geeignet, ebenso wie Frauen, die sich für rrBSO plus Hysterektomie entscheiden.