Immuunijärjestelmän hiljentäminen HIV-tartunnan ehkäisemiseksi naisilla (IIQ)

Tutkijat rekisteröivät Nairobista Keniasta 80 ei-naispuolista seksityön vähäriskistä HIV-negatiivista naista ja 80 HIV-negatiivista HIV-negatiivista naista, ja heitä seurataan kolmen kuukauden ajan.

Ensimmäisen kuukauden aikana näytteet otetaan kuukausittain

• verta,
• emätinnäytteet: cytobrush/scarper ja cervico vaginal lavage (CVL). Tämä tehdään kunkin naisen systeemisen ja limakalvon immuuniaktivaation perustason määrittämiseksi. Tällä tavalla jokainen nainen toimii omana kontrollinaan vähentäen siten kontrollin ja osallistujan välistä vaihtelua.

Kemokiini/sytokiinitaso sekä solujen immuuniaktivaatio ja T-säätelysolut arvioidaan.

Toisena kuukautena: naiset jaetaan kahteen eri haaraan (oraalinen hydroksiklorokiini: 200 mg/vrk tai asetyylisalisyylihappo 81 mg/vrk) ja niitä seurataan kuukausittain vielä 8 viikon ajan.

Tänä aikana tutkijoilta otetaan kuukausittain veri- ja emätinnäytteet (sytoharja/kaavin ja CVL). Ne mittaavat muutosta systeemisessä ja limakalvon immuuniaktivaatiossa.

Immune Quiescence -fenotyyppi (T-solujen immuuniaktivaation väheneminen, immuunigeenien alemman aktivaation ilmentyminen ja tulehdusta edistävä sytokiini/kemokiiniekspressio) arvioidaan virtaussytometrian, mikrosiru- ja multiplex bead array -tekniikan avulla.

Näin näytteet otetaan:

1. Kohdunkaulan limanäyte otetaan käyttämällä vanupuikkoa, jota on käännetty 360º kohdunkaulan suussa, ja toisella puikolla, jota käytetään eritteiden keräämiseen emättimen takaraivosta. Molemmat vanupuikot siirretään yhteen injektiopulloon, joka sisältää 5 ml fosfaattipuskuroitua suolaliuosta (PBS), joka kuljetetaan laboratorioon testattavaksi ja viljeltäväksi sukupuoliteitse tarttuvien infektioiden, kuten tippuri, klamydia jne., varalta.
2. Kohdunkaulan solut kerätään pienellä harjalla ja puisella lastalla. Molemmat näytteet siirretään 15 ml:n kartiomaiseen putkeen, joka sisältää 5 ml PBS:ää. Tätä näytettä käytetään karakterisoimaan näytteen solupopulaatioita.
3. Cervico-emätinhuuhtelu suoritetaan pesemällä kohdunkaulan sisäosa 2 ml:lla steriiliä 1x PBS:ää. Neste kerätään takaosasta. Näytteet asetetaan kartiomaiseen putkeen, sentrifugoidaan solujätteen poistamiseksi ja supernatantti varastoidaan -70 °C:ssa ja lähetetään nestemäisellä typellä kuivassa kuljetuslaatikossa Winnipegiin, Manitobaan. Näitä näytteitä käytetään luontaisten liukoisten tekijöiden havaitsemiseen (kemokiinit, sytokiinit, vasta-aineet, synnynnäinen proteiini jne.

4. Laskimoverta otetaan 30 ml. (Perifeerisen veren mononukleaariset solut uutetaan immuuniaktivaatioanalyysiin, DNA:ta käytetään immuunigeenien ilmentämiseen, plasmaa käytetään proteiinien ja luontaisten liukoisten tekijöiden havaitsemiseen.)

   .