Immunnyugalom előidézése a HIV-fertőzés megelőzése érdekében nőknél (IIQ)

A nyomozók 80 nem női szexmunkát végző, alacsony kockázatú HIV-negatív nőt és 80 HIV-negatív női szexmunkást, HIV-negatív nőt vesznek fel Nairobiból (Kenya), és 3 hónapig követik őket.

Az első hónapban havi rendszerességgel vesznek mintát

• vér,
• hüvelyminták: cytobrush/scarper és cervico vaginal lavage (CVL). Ennek célja az egyes nők szisztémás és nyálkahártya immunaktivációjának alapszintjének meghatározása. Ily módon minden nő a saját kontrolljaként működik, ezáltal csökkentve a kontroll és a résztvevő közötti eltérést.

Felmérik a kemokin/citokin szintet, valamint a celluláris immunaktivációt és a T szabályozó sejteket.

A második hónapban: a nőket két különböző karra osztják (hidroxiklorokin orális adagolása: 200 mg/nap vagy acetilszalicilsav 81 mg/nap), és havi rendszerességgel további 8 hétig követik őket.

Ez idő alatt havonta vér- és hüvelyi mintákat vesznek (citokefe/kaparó és CVL) a vizsgálóktól. Mérni fogják a változást a szisztémás és a nyálkahártya immunaktivációjában.

Az Immun Quiescence fenotípust (a T-sejtek immunaktivációjának csökkenése, az alacsonyabb immungének aktiválási expressziója és a gyulladást elősegítő citokin/kemokin expresszió) áramlási citometriával, microarray-vel és multiplex gyöngysor technológiával értékeljük.

A mintavétel módja a következő:

1. A méhnyak nyálkahártyájának mintáját 360°-ban elforgatott vattacsomóval kell gyűjteni a nyaki nyálkahártyában, és egy második törlőkendővel gyűjtik össze a váladékot a hüvely hátsó részéből. Mindkét tampont egyetlen, 5 ml foszfáttal pufferolt sóoldatot (PBS) tartalmazó injekciós üvegbe helyezik, amelyet a laboratóriumba szállítanak, ahol szexuális úton terjedő fertőzések, például gonorrhoea, chlamydia stb.
2. A méhnyaksejteket kis kefével és fa spatulával gyűjtik össze. Mindkét mintát átvisszük egy 15 ml-es kúpos csőbe, amely 5 ml PBS-t tartalmaz. Ezt a mintát fogják használni a mintában lévő sejtpopulációk jellemzésére.
3. A Cervico hüvelymosást úgy végezzük, hogy az endocervixet 2 ml steril 1x PBS-sel mossuk. A folyadék a hátsó fornixból fog összegyűjteni. A mintákat kúpos csőbe helyezik, centrifugálják, hogy eltávolítsák a sejttörmeléket, és a felülúszót -70 °C-on tárolják, és folyékony nitrogénes száraz szállítmányozóban szállítják a Manitoba állambeli Winnipegbe. Ezeket a mintákat a veleszületett oldható faktorok kimutatására használják (kemokinek, citokinek, antitestek, veleszületett fehérje stb.

4. 30 ml vénás vért vesznek. (A perifériás vér mononukleáris sejtjeit immunaktivációs analízishez, a DNS-t az immungének expressziójához, a plazmát a fehérjék és a veleszületett oldható faktorok kimutatásához használják fel.)

   .