Induzindo Quiescência Imunológica para Prevenir a Infecção pelo HIV em Mulheres (IIQ)

Os investigadores irão inscrever 80 mulheres HIV negativas de baixo risco que não trabalham com sexo e 80 trabalhadoras do sexo HIV negativas de Nairóbi, Quênia, e acompanhadas por um período de 3 meses.

Durante o primeiro mês, as amostras serão coletadas mensalmente

• sangue,
• amostras vaginais: cytobrush/scarper e lavagem cérvico-vaginal (CVL). Isso é feito para determinar os níveis basais de ativação imunológica sistêmica e mucosa de cada mulher. Desta forma, cada mulher está agindo como seu próprio controle, reduzindo assim a variação entre controle e participante.

O nível de quimiocinas/citocinas, assim como a ativação imune celular e as células T reguladoras serão avaliados.

No segundo mês: as mulheres serão divididas em dois braços diferentes (administração oral de hidroxicloroquina: 200mg/dia ou ácido acetilsalicílico 81mg/dia) e acompanhadas, mensalmente, por mais 8 semanas.

Durante esse período, serão coletadas amostras mensais de sangue e vaginais (citoescova/raspador e CVL) dos investigadores. Eles medirão a mudança na ativação imune sistêmica e mucosa.

O fenótipo de quiescência imunológica (diminuição da ativação imune de células T, menor expressão de ativação de genes imunes e expressão de citocinas/quimiocinas pró-inflamatórias) será avaliado por citometria de fluxo, microarray e tecnologia multiplex bead array.

Veja como as amostras serão coletadas:

1. Uma amostra de muco cervical será coletada por meio de um swab de algodão girado 360º no orifício cervical e um segundo swab será usado para coletar secreções do fórnice vaginal posterior. Ambos os swabs serão transferidos para um único frasco contendo 5 mL de solução salina tamponada com fosfato (PBS) que será transportado ao laboratório para ser testado e cultivado para infecções sexualmente transmissíveis, como gonorréia, clamídia etc.
2. As células cervicais serão coletadas usando uma pequena escova e uma espátula de madeira. Ambas as amostras serão transferidas para um tubo cônico de 15ml contendo 5ml de PBS. Este espécime será usado para caracterizar as populações celulares no espécime.
3. A lavagem cervical vaginal será realizada lavando a endocérvix com 2 ml de PBS 1x estéril. O líquido será coletado do fórnice posterior. As amostras serão colocadas em um tubo cônico, centrifugadas para remover detritos celulares e o sobrenadante será armazenado a -70°C e enviado em um transportador seco de nitrogênio líquido para Winnipeg, Manitoba. Esses espécimes serão usados ​​para detecção de fator inato solúvel (quimiocinas, citocinas, anticorpos, proteína inata, etc.

4. Serão colhidos 30ml de sangue venoso. (Células Mononucleares do Sangue Periférico serão extraídas para análise de ativação imune, DNA será usado para expressão de genes imunes, plasma será usado para detecção de proteína e fator solúvel inato.)

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