Wywoływanie spoczynku immunologicznego w celu zapobiegania zakażeniu HIV u kobiet (IIQ)

Badacze zwerbują 80 niekobiecych osób świadczących usługi seksualne, kobiet z niskim ryzykiem zakażenia wirusem HIV i 80 kobiet z ujemnym wynikiem na obecność wirusa HIV, świadczących usługi seksualne z Nairobi w Kenii, i będą obserwowani przez okres 3 miesięcy.

W pierwszym miesiącu próbki będą pobierane co miesiąc

• krew,
• próbki pochwy: cytobrush/scarper i płukanie pochwy szyjki macicy (CVL). Ma to na celu określenie podstawowych poziomów ogólnoustrojowej i śluzówkowej aktywacji immunologicznej każdej kobiety. W ten sposób każda kobieta działa jako własna kontrola, zmniejszając w ten sposób różnice między grupą kontrolną a uczestniczką.

Oceniony zostanie poziom chemokin/cytokin, a także komórkowa aktywacja immunologiczna i limfocyty T regulatorowe.

W drugim miesiącu: kobiety zostaną podzielone na dwie różne grupy (doustne podanie hydroksychlorochiny: 200 mg/dzień lub kwasu acetylosalicylowego 81 mg/dzień) i obserwowane co miesiąc przez dodatkowe 8 tygodni.

W tym czasie badacze będą pobierać comiesięczne próbki krwi i pochwy (cytobrush/scraper i CVL). Będą mierzyć zmiany w systemowej i śluzówkowej aktywacji immunologicznej.

Fenotyp spoczynku immunologicznego (spadek aktywacji immunologicznej limfocytów T, niższa ekspresja aktywacji genów odpornościowych i ekspresja prozapalnych cytokin/chemokin) zostanie oceniony za pomocą cytometrii przepływowej, mikromacierzy i technologii multipleksowych macierzy kulek.

Oto jak będą pobierane próbki:

1. Próbka śluzu szyjkowego zostanie pobrana za pomocą bawełnianego wacika obróconego o 360º w ujściu szyjki macicy, a drugi wacik zostanie użyty do pobrania wydzieliny z tylnego sklepienia pochwy. Oba wymazy zostaną przeniesione do jednej fiolki zawierającej 5 ml soli fizjologicznej buforowanej fosforanami (PBS), która zostanie przetransportowana do laboratorium w celu zbadania i posiewu pod kątem infekcji przenoszonych drogą płciową, takich jak rzeżączka, chlamydia itp.
2. Komórki szyjki macicy zostaną pobrane za pomocą małej szczoteczki i drewnianej szpatułki. Obie próbki zostaną przeniesione do 15 ml stożkowej probówki zawierającej 5 ml PBS. Ta próbka zostanie wykorzystana do scharakteryzowania populacji komórek w próbce.
3. Płukanie pochwy szyjki macicy zostanie wykonane poprzez przemycie szyjki macicy 2 ml sterylnego 1x PBS. Płyn zostanie pobrany ze sklepienia tylnego. Próbki zostaną umieszczone w stożkowej probówce, odwirowane w celu usunięcia resztek komórkowych, a supernatant będzie przechowywany w temperaturze -70°C i wysłany w suchym ciekłym azocie do Winnipeg, Manitoba. Próbki te zostaną użyte do wykrywania wrodzonych czynników rozpuszczalnych (chemokin, cytokin, przeciwciał, wrodzonych białek itp.)

4. Zostanie pobrane 30 ml krwi żylnej. (Komórki jednojądrzaste krwi obwodowej zostaną wyekstrahowane do analizy aktywacji immunologicznej, DNA zostanie użyte do ekspresji genów odpornościowych, osocze zostanie użyte do wykrycia białek i wrodzonych rozpuszczalnych czynników).

   .