Indurre la quiescenza immunitaria per prevenire l'infezione da HIV nelle donne (IIQ)

Gli investigatori arruoleranno 80 lavoratrici sessuali non femminili a basso rischio HIV negative e 80 lavoratrici sessuali HIV negative da Nairobi, Kenya e seguite per un periodo di 3 mesi.

Durante il primo mese, i campioni saranno prelevati su base mensile

• sangue,
• campioni vaginali: cytobrush/scarper e lavanda cervico-vaginale (CVL). Questo viene fatto per determinare i livelli basali di attivazione immunitaria sistemica e mucosale di ogni donna. In questo modo, ogni donna agisce come il proprio controllo, riducendo così la variazione tra controllo e partecipante.

Saranno valutati il ​​livello di chemochine/citochine, così come l'attivazione immunitaria cellulare e le cellule T regolatrici.

Al secondo mese: le donne saranno divise in due diversi bracci (somministrazione orale di idrossiclorochina: 200 mg/giorno o acido acetilsalicilico 81 mg/giorno) e seguite, su base mensile, per ulteriori 8 settimane.

Durante questo periodo, verranno prelevati mensilmente campioni di sangue e vaginali (cytobrush / raschietto e CVL) gli investigatori. Misureranno il cambiamento nell'attivazione immunitaria sistemica e mucosale.

Il fenotipo della quiescenza immunitaria (diminuzione dell'attivazione immunitaria delle cellule T, minore espressione di attivazione di geni immunitari ed espressione di citochine/chemochine pro-infiammatorie) sarà valutato mediante citometria a flusso, microarray e tecnologia multiplex bead array.

Ecco come verranno prelevati i campioni:

1. Verrà raccolto un campione di muco cervicale utilizzando un batuffolo di cotone ruotato di 360º nell'orifizio cervicale e un secondo tampone utilizzato per raccogliere le secrezioni dal fornice vaginale posteriore. Entrambi i tamponi verranno trasferiti in un'unica fiala contenente 5 ml di soluzione salina tamponata con fosfato (PBS) che verrà trasportata al laboratorio per essere testata e coltivata per infezioni a trasmissione sessuale come gonorrea, clamidia ecc.
2. Le cellule cervicali saranno raccolte utilizzando uno spazzolino e una spatola di legno. Entrambi i campioni verranno trasferiti in una provetta conica da 15 ml contenente 5 ml di PBS. Questo campione verrà utilizzato per caratterizzare le popolazioni cellulari nel campione.
3. Il lavaggio vaginale della cervice verrà eseguito lavando l'endocervice con 2 ml di PBS 1x sterile. Il liquido verrà raccolto dal fornice posteriore. I campioni saranno posti in una provetta conica, centrifugati per rimuovere i detriti cellulari e il supernatante sarà conservato a -70°C e spedito in azoto liquido secco a Winnipeg, Manitoba. Tali campioni verranno utilizzati per il rilevamento del fattore solubile innato (chemochine, citochine, anticorpi, proteine ​​innate, ecc.

4. Verranno prelevati 30 ml di sangue venoso. (Le cellule mononucleate del sangue periferico saranno estratte per l'analisi dell'attivazione immunitaria, il DNA sarà utilizzato per l'espressione dei geni immunitari, il plasma sarà utilizzato per la rilevazione delle proteine ​​e del fattore solubile innato.)

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