Vyvolání imunitního klidu, aby se zabránilo infekci HIV u žen (IIQ)

Vyšetřovatelé zaregistrují 80 žen s nízkým rizikem HIV negativních sexuálních pracovnic a 80 HIV negativních prostitutek HIV negativních z Nairobi v Keni, které budou sledovány po dobu 3 měsíců.

Během prvního měsíce budou vzorky odebírány měsíčně

• krev,
• vaginální vzorky: cytobrush/scarper a cervikální vaginální laváž (CVL). To se provádí za účelem stanovení základních úrovní systémové a slizniční imunitní aktivace každé ženy. Tímto způsobem se každá žena chová jako její vlastní kontrola, čímž se snižují rozdíly mezi kontrolou a účastníkem.

Bude hodnocena hladina chemokinů/cytokinů, stejně jako buněčná imunitní aktivace a T regulační buňky.

Ve druhém měsíci: ženy budou rozděleny do dvou různých větví (perorální podávání hydroxychlorochinu: 200 mg/den nebo kyseliny acetylsalicylové 81 mg/den) a sledovány na měsíční bázi po dobu dalších 8 týdnů.

Během této doby budou vyšetřovatelům odebírány měsíční vzorky krve a vaginální vzorky (cytobrush/škrabka a CVL). Budou měřit změnu v systémové a slizniční imunitní aktivaci.

Fenotyp imunitního klidu (snížení imunitní aktivace T buněk, exprese aktivace nižších imunitních genů a exprese prozánětlivých cytokinů/chemokinů) bude hodnocen průtokovou cytometrií, microarray a technologií multiplex bead array.

Vzorky budou odebrány takto:

1. Vzorek cervikálního hlenu bude odebrán pomocí vatového tamponu otočeného o 360º v cervikálním ústí a druhého tamponu použitého k odběru sekretu ze zadního vaginálního fornixu. Oba výtěry budou přeneseny do jedné lahvičky obsahující 5 ml fosfátem pufrovaného fyziologického roztoku (PBS), který bude transportován do laboratoře k testování a kultivaci na sexuálně přenosné infekce, jako je kapavka, chlamydie atd.
2. Cervikální buňky budou odebírány pomocí malého kartáčku a dřevěné špachtle. Oba vzorky budou přeneseny do 15ml kónické zkumavky obsahující 5 ml PBS. Tento vzorek bude použit k charakterizaci buněčných populací ve vzorku.
3. Cervico vaginální laváž bude provedena promytím endocervixu 2 ml sterilního 1x PBS. Tekutina bude shromažďována ze zadního fornixu. Vzorky budou umístěny do kónické zkumavky, odstředěny, aby se odstranily buněčné zbytky, a supernatant bude skladován při -70 °C a bude odeslán v přepravce suchého kapalného dusíku do Winnipegu, Manitoba. Tyto vzorky budou použity pro detekci vrozených rozpustných faktorů (chemokiny, cytokiny, protilátky, vrozený protein atd.

4. Odebere se 30 ml žilní krve. (Mononukleární buňky periferní krve budou extrahovány pro analýzu aktivace imunity, DNA bude použita pro expresi imunitních genů, plazma bude použita pro detekci proteinů a vrozených rozpustných faktorů.)

   .