Immuunrust opwekken om HIV-infectie bij vrouwen te voorkomen (IIQ)

De onderzoekers zullen 80 niet-vrouwelijke sekswerkers met laag risico HIV-negatieve vrouwen en 80 HIV-negatieve vrouwelijke sekswerkers HIV-negatief inschrijven uit Nairobi, Kenia en gedurende een periode van 3 maanden volgen.

De eerste maand worden er maandelijks monsters genomen

• bloed,
• vaginale monsters: cytobrush/scarper en cervico vaginale lavage (CVL). Dit wordt gedaan om de basislijnniveaus van systemische en mucosale immuunactivatie van elke vrouw te bepalen. Op deze manier fungeert elke vrouw als haar eigen controle, waardoor de variatie tussen controle en deelnemer wordt verminderd.

Chemokine/cytokine-niveau, evenals cellulaire immuunactivatie en T-regulerende cellen zullen worden beoordeeld.

In maand twee: de vrouwen worden verdeeld over twee verschillende armen (orale toediening van hydroxychloroquine: 200 mg/dag of Acetylsalicylzuur 81 mg/dag) en maandelijks gevolgd gedurende nog eens 8 weken.

Gedurende deze tijd zullen de onderzoekers maandelijks bloed en vaginale monsters nemen (cytoborstel/schraper en CVL). Ze zullen veranderingen in de systemische en mucosale immuunactivatie meten.

Immuun rust fenotype (afname van T-cellen immuunactivatie, lagere expressie van activatie van immuungenen en pro-inflammatoire cytokine/chemokine-expressie) zal worden geëvalueerd door middel van flowcytometrie, microarray en multiplex bead array-technologie.

Hier is hoe monsters zullen worden genomen:

1. Er wordt een monster van cervicaal slijm afgenomen met behulp van een wattenstaafje dat 360º in de cervicale os is gedraaid, en een tweede wattenstaafje wordt gebruikt om secreties uit de achterste vaginale fornix te verzamelen. Beide uitstrijkjes worden overgebracht in een enkele injectieflacon met 5 ml fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS) die naar het laboratorium wordt vervoerd om te worden getest en gekweekt op seksueel overdraagbare aandoeningen zoals gonorroe, chlamydia enz.
2. Cervicale cellen worden verzameld met behulp van een kleine borstel en een houten spatel. Beide monsters worden overgebracht in een conische buis van 15 ml met 5 ml PBS. Dit exemplaar zal worden gebruikt om de cellulaire populaties in het monster te karakteriseren.
3. Cervico vaginale lavage wordt uitgevoerd door de endocervix te wassen met 2 ml steriele 1x PBS. De vloeistof wordt opgevangen uit de achterste fornix. Monsters worden in een conische buis geplaatst, gecentrifugeerd om celresten te verwijderen en het supernatant wordt bij -70°C opgeslagen en in een droge transporteur met vloeibare stikstof naar Winnipeg, Manitoba, vervoerd. Die monsters zullen worden gebruikt voor detectie van aangeboren oplosbare factoren (chemokines, cytokines, antilichamen, aangeboren eiwitten, enz.

4. Er wordt 30 ml veneus bloed afgenomen. (Mononucleaire cellen uit perifeer bloed zullen worden geëxtraheerd voor analyse van immuunactivatie, DNA zal worden gebruikt voor expressie van immuungenen, plasma zal worden gebruikt voor detectie van eiwitten en aangeboren oplosbare factoren.)

   .