Lehmänmaidon ja kananmunan yliherkkyys aikuisilla

Tausta

Muna-, maito- ja vilja-allergiat ovat suomalaisten lasten tärkeimmät ruoka-aineallergiat, länsimaissa esiintyvyys on 1-4 %. Joillakin ihmisillä ruoka-aineallergia säilyy aikuisikään asti. IgE-välitteisen maito- ja muna-allergian hoidon peruslähtökohta on välttämisruokavalio ja adrenaliiniruiskun kantaminen allergisen reaktion varalta. Välttämisruokavalio on erittäin vaikeaa ja sillä on kielteisiä vaikutuksia elämänlaatuun. Maidon tai kananmunan vahingossa nauttiminen voi aiheuttaa hengenvaarallisia reaktioita, jopa kuoleman. Viimeaikaiset tutkimukset viittaavat siihen, että spesifinen oraalinen toleranssin induktio (SOTI) tarjoaa hoitovaihtoehdon lapsille, joilla on jatkuvaa allergiaa ja korkea onnistumisprosentti.

On selvää, että oraalisella immunoterapialla on vaikutusta maito- ja munaspesifisiin immuunivasteisiin, mutta tämän hoidon mekanismeja on tutkittu vain vähän ja sen vaikutuksia solu- ja molekyylitasolla ei käytännössä tunneta. Ei ole myöskään laboratoriotutkimuksia tehon seuraamiseksi tai lopputuloksen ennustamiseksi etukäteen tai hoidon alkuvaiheessa. Humoraalisista IgE-, IgG4- ja Immunoglobuliini A (IgA) -vasteista tai yksittäisten tärkeimpien lehmänmaidon ja munan allergeenikomponenttien aiheuttamista soluvälitteisistä tai sytokiinivasteista ei ole saatavilla tutkimustietoa oraalisen immunoterapian aikana. Hoidon lopputuloksen ennustamiseen ei ole työkaluja.

Tavoitteet

Tutkimuksen tavoitteena on spesifinen suun toleranssin induktio aikuisilla, jotka ovat allergisia lehmänmaidolle tai kananmunalle. Suun kautta otettava immunoterapia sisältää hyvin pienten allergeenimäärien ottamista ja määrän hitaasti lisäämistä. Näin ollen eliminaatiodieetti voidaan peruuttaa kokonaan tai osittain ilman vakavien allergisten reaktioiden pelkoa. Tavoitteena on myös tutkia vasta-ainevälitteisen ja soluvälitteisen immuunivasteen muutoksia lehmänmaidon ja kananmunan allergeeneihin yksittäisille aineosille toleranssin induktion aikana ja verrata niitä hoidon vaikutuksiin.

Materiaalit ja menetelmät

Tutkimukseen otetaan mukaan 40 aikuista potilasta, joilla on joko maito- tai munaallergia. Kelpoisuuskriteerit ovat: 1) yli 16-vuotiaat aikuiset, 2) kohonneet seerumin spesifisen IgE-tasot (≥ 5 kU/l, (kiloyksikköä litrassa) maitoa tai munaa) tai positiivinen ihopistotesti (≥ 5 mm, maito- tai muna) ja 3) positiivinen maito- tai muna-haaste. Rekrytoidut koehenkilöt, jotka täyttävät pääsykriteerit, satunnaistetaan toleranssin induktioryhmään, joka saa maitoa tai kananmunaa (n = 20), tai kontrolliryhmään, jota seurataan välttämisruokavaliolla (n = 20). Suun kautta annettava immunoterapia käsittää aluksi hyvin pienen määrän allergeenia ottamista ja sen määrän lisäämistä asteittain, kunnes ylläpitoannos saavutetaan. Lisäannostusta seurataan sairaalassa. Tämän jälkeen potilas jatkaa päivittäistä maidon tai kananmunan käyttöä kotona.

Ihopistokokeet maito- tai munaspesifisillä allergeenikomponenteilla tehdään, oirekyselylomake täytetään ja verinäytteitä otetaan ennen tutkimuksen aloittamista, kun ylläpitoannos saavutetaan ja 12 kuukauden kuluttua tutkimuksen aloittamisesta. Potilaskäynnit tehdään poliklinikalla osana normaalia rutiinia.

Kaupallisesti saatavilla olevat (Thermo Fisher Scientific Phadia) spesifiset allergeenikomponentit tutkitaan (IgE ja IgG4) sekä IgA, IgA1 ja IgA2. Lehmänmaidon allergeenikomponentit ovat: alfa-laktalbumiini, beeta-laktoglobuliini, kaseiini, laktoferriini ja naudan seerumialbumiini ja munan allergeenikomponentit ovat: ovomukoidi, ovalbumiini, konalbumiini ja lysotsyymi.

Mononukleaariset leukosyytit eristetään verinäytteistä ja viljellään 37 °C:n inkubaattorissa, jossa on 10^6 solua millilitrassa RPMI-elatusainetta (Roswell Park Memorial Institute Medium), joka sisältää 5 % autologista plasmaa ja lehmänmaidon allergeenikomponentteja: alfa-laktalbumiinia, beeta-laktoglobuliinia. , naudan seerumin albumiini, kaseiini ja laktoferriini tai munan allergeenikomponentit: ovomukoidi, ovalbumiini, konalbumiini ja lysotsyymi. Mitogeeniä käytetään positiivisena kontrollina ja väliainetta ilman stimulaatiota negatiivisena kontrollina. Maidon ja munan allergeenikomponentit puhdistetaan Detoxi-Gel Endotoxin Removal Gel -kolonneilla (Thermo Scientific Pierce Chemicals) endotoksiinien vaikutusten poistamiseksi solustimulaation aikana. Lymfoproliferaatiota tutkitaan käyttämällä kolmea rinnakkaista näytettä ja sytokiinien ilmentymistä kahdella rinnakkaisnäytteellä (Luminex/Lincoplex: interleukiini-4 (IL-4), IL-5, IL-10, IL-12, IL-13, IL-17, IL-18, IL-22, IL-23, IL-27, gamma-interferoni (IFN-y), tuumorinekroositekijä (TNF) ja transformoiva kasvutekijä beeta (TGF-β)).

Eettiset näkökohdat

Opiskelu noudattaa biolääketieteellisessä tutkimuksessa käytettyjä ohjeita ja määräyksiä. Turun yliopiston eettinen toimikunta hyväksyi tutkimuksen 15.2.2011. Jokainen osallistuja antaa kirjallisen tietoisen suostumuksen. Tutkimukseen osallistuminen on vapaaehtoista ja se voidaan keskeyttää ilman syytä milloin tahansa tutkimuksen aikana, eikä kieltäytyminen tai lopettaminen vaikuta potilaan muuhun hoitoon. Potilasnäytteet ja kerätyt tiedot käsitellään ja säilytetään biolääketieteellisessä tutkimuksessa käytettyjen ohjeiden ja määräysten mukaisesti.

Arvio, aikataulu ja tulokset

Potilaskäynnit tehdään poliklinikoilla osana normaalia allergiapotilaiden vastaanottoa, eikä niistä aiheudu potilaille lisäkustannuksia. Vasta-ainevälitteisten ja soluvälitteisten immuunivastetutkimuksiin liittyvät kulut katetaan ulkopuolisella rahoituksella. Selvitys alkaa syksyllä 2014 ja sen on määrä valmistua keväällä 2016. Tulokset julkaistaan ​​kansainvälisissä tieteellisissä julkaisuissa.