Гипосенсибилизация к коровьему молоку и куриным яйцам у взрослых

Фон

Аллергия на яйца, молоко и злаки являются наиболее распространенными пищевыми аллергиями у финских детей, распространенность которых в западных странах составляет 1-4 %. У некоторых людей пищевая аллергия сохраняется и во взрослом возрасте. Основой лечения IgE-опосредованной аллергии на молоко и яйца является избегающая диета и ношение инъектора адреналина в случае аллергической реакции. Избегающая диета очень сложна и оказывает негативное влияние на качество жизни. Случайное употребление молока или яиц может вызвать опасные для жизни реакции и даже привести к смерти. Недавние исследования показывают, что индукция специфической оральной толерантности (СОТИ) представляет собой вариант лечения детей с продолжающейся аллергией с высокими показателями успеха.

Очевидно, что пероральная иммунотерапия оказывает влияние на молочно-яичный специфический иммунный ответ, но механизмы этого лечения изучены мало, а его влияние на клеточном и молекулярном уровне практически неизвестно. Нет также никаких лабораторных исследований для мониторинга эффективности или прогнозирования исхода заранее или на ранних стадиях лечения. Отсутствуют данные исследований гуморального IgE, IgG4 и иммуноглобулина A (IgA) ответов или клеточно-опосредованных или цитокиновых ответов, индуцированных отдельными основными компонентами аллергенов коровьего молока и яиц во время пероральной иммунотерапии. Не существует инструментов для прогнозирования результатов лечения.

Цели

Исследование направлено на индукцию специфической оральной толерантности у взрослых с аллергией на коровье молоко или куриные яйца. Пероральная иммунотерапия включает в себя прием очень малых количеств аллергена и их медленное увеличение. Следовательно, элиминационная диета может быть полностью или частично отменена, не опасаясь серьезных аллергических реакций. Другая цель состоит в том, чтобы изучить изменения в опосредованном антителами и клеточном иммунном ответе на отдельные компоненты аллергенов коровьего молока и яиц во время индукции толерантности и сравнить их с эффектом лечения.

Материалы и методы

В исследовании примут участие 40 взрослых пациентов с аллергией на молоко или яйца. Критерии приемлемости: 1) взрослые старше 16 лет, 2) повышенный уровень специфического IgE в сыворотке (≥ 5 кЕд/л, (килоунит на литр) молока или яйца) или положительный кожный прик-тест (≥ 5 мм, молоко или яйцо). яйцо) и 3) положительный тест на молоко или яйцо. Набранных субъектов, отвечающих критериям включения, рандомизируют в группу индукции толерантности, получающую молоко или яйцо (n = 20), или в контрольную группу, которой следует соблюдать диету избегания (n = 20). Пероральная иммунотерапия включает в себя первоначальное введение очень небольшого количества аллергена и постепенное постепенное увеличение количества до тех пор, пока не будет достигнута поддерживающая доза. Дозировку контролируют в больнице. После этого пациент продолжит ежедневное употребление молока или яиц в домашних условиях.

Перед началом исследования, при достижении поддерживающей дозы и через 12 месяцев после начала исследования проводят кожные прик-тесты со специфическими аллергенными компонентами молока или яиц, заполняют анкету по симптомам и берут образцы крови. Визиты пациентов осуществляются в поликлинике в рамках обычного распорядка дня.

Исследуются имеющиеся в продаже (Thermo Fisher Scientific Phadia) компоненты специфических аллергенов (IgE и IgG4), а также IgA, IgA1 и IgA2. Компонентами аллергенов коровьего молока являются: альфа-лактальбумин, бета-лактоглобулин, казеин, лактоферрин и бычий сывороточный альбумин, а компонентами аллергенов яиц являются: овомукоид, овальбумин, кональбумин и лизоцим.

Из образцов крови выделяют мононуклеарные лейкоциты и культивируют в инкубаторе при 37°С по 10^6 клеток на миллилитр среды RPMI (Roswell Park Memorial Institute Medium), содержащей 5% аутологичной плазмы и аллергенные компоненты коровьего молока: альфа-лактальбумин, бета-лактоглобулин. бычий сывороточный альбумин, казеин и лактоферрин, или компоненты яичного аллергена: овомукоид, овальбумин, кональбумин и лизоцим. Митоген используют в качестве положительного контроля и среду без стимуляции в качестве отрицательного контроля. Компоненты аллергенов молока и яиц очищаются с помощью колонок Detoxi-Gel Endotoxin Removal Gel (Thermo Scientific Pierce Chemicals) для удаления эффектов эндотоксинов во время стимуляции клеток. Лимфопролиферацию изучают с использованием трех параллельных образцов, а экспрессию цитокинов - с помощью двух параллельных образцов (Luminex/Lincoplex: интерлейкин-4 (ИЛ-4), ИЛ-5, ИЛ-10, ИЛ-12, ИЛ-13, ИЛ-17, IL-18, IL-22, IL-23, IL-27, гамма-интерферон (IFN-γ), фактор некроза опухоли (TNF) и трансформирующий фактор роста бета (TGF-β)).

Этические соображения

Исследование следует инструкциям и правилам, используемым в биомедицинских исследованиях. Комитет по этике Университета Турку одобрил исследование 15 февраля 2011 года. Каждый участник даст письменное информированное согласие. Участие в исследовании является добровольным и может быть приостановлено без какой-либо причины в любое время во время исследования, и отказ или прекращение не должны влиять на другое лечение пациента. Образцы пациентов и собранные данные обрабатываются и хранятся в соответствии с инструкциями и правилами, используемыми в биомедицинских исследованиях.

Оценка, график и результаты

Посещения пациентов осуществляются в амбулаторно-поликлинических учреждениях в рамках обычного приема аллергиков и не влекут за собой дополнительных затрат для пациентов. Расходы, связанные с исследованиями антитело-опосредованного и клеточно-опосредованного иммунного ответа, покрываются за счет внешнего финансирования. Исследование начнется осенью 2014 года и будет завершено весной 2016 года. Результаты будут опубликованы в международных научных журналах.