Iposensibilizzazione da latte vaccino e uova di gallina negli adulti

Sfondo

Le allergie a uova, latte e cereali sono le allergie alimentari più importanti nei bambini finlandesi, la prevalenza nei paesi occidentali è dell'1-4%. In alcuni individui l'allergia alimentare si mantiene fino all'età adulta. Il cardine del trattamento dell'allergia al latte e alle uova mediata da IgE è una dieta da evitare e il trasporto di un iniettore di adrenalina in caso di reazione allergica. La dieta da evitare è molto difficile e ha effetti negativi sulla qualità della vita. Avere accidentalmente latte o uova può causare reazioni pericolose per la vita, persino portare alla morte. Studi recenti suggeriscono che l'induzione della tolleranza orale specifica (SOTI) fornisce un'opzione di trattamento nei bambini con allergia continua con alte percentuali di successo.

È ovvio che l'immunoterapia orale ha un impatto sulle risposte immunitarie specifiche del latte e dell'uovo, ma i meccanismi di questo trattamento sono stati poco studiati ei suoi effetti a livello cellulare e molecolare sono praticamente sconosciuti. Non ci sono studi di laboratorio per monitorare l'efficacia o prevedere l'esito in anticipo o nelle prime fasi del trattamento. Non sono disponibili dati di ricerca sulle risposte umorali IgE, IgG4 e Immunoglobulina A (IgA) o sulle risposte cellulo-mediate o citochiniche indotte dai singoli principali componenti allergenici del latte vaccino e delle uova durante l'immunoterapia orale. Non esistono strumenti per prevedere l'esito del trattamento.

Obiettivi

Lo studio mira all'induzione di tolleranza orale specifica in adulti allergici al latte vaccino o all'uovo di gallina. L'immunoterapia orale comporta l'assunzione di quantità molto piccole di allergene e un aumento graduale della quantità. Di conseguenza, una dieta di eliminazione può essere annullata in tutto o in parte, senza il timore di gravi reazioni allergiche. Un altro obiettivo è esplorare i cambiamenti nella risposta immunitaria mediata da anticorpi e cellulo-mediata ai singoli componenti del latte vaccino e degli allergeni delle uova durante l'induzione della tolleranza e confrontarli con l'effetto del trattamento.

Materiali e metodi

Lo studio recluterà 40 pazienti adulti con allergia al latte o all'uovo. I criteri di ammissibilità sono: 1) adulti di età superiore a 16 anni, 2) elevati livelli sierici di IgE specifiche (≥ 5 kU/l, (kilounità per litro) latte o uovo) o un test cutaneo positivo (≥ 5 mm, latte o uovo), e 3) una sfida positiva al latte o all'uovo. I soggetti reclutati che soddisfano i criteri di ammissione vengono randomizzati in un gruppo di induzione alla tolleranza che riceve latte o uova (n = 20) o in un gruppo di controllo da seguire con una dieta da evitare (n = 20). L'immunoterapia orale prevede inizialmente l'assunzione di una quantità molto piccola di allergene e l'aumento graduale della quantità fino a raggiungere una dose di mantenimento. L'aumento del dosaggio è monitorato in ospedale. Successivamente, il paziente continuerà l'uso quotidiano di latte o uova a casa.

Prima dell'inizio dello studio, quando viene raggiunta la dose di mantenimento e dopo 12 mesi dall'inizio dello studio, vengono eseguiti prick test cutanei con componenti allergenici specifici del latte o delle uova, viene compilato un questionario sui sintomi e vengono prelevati campioni di sangue. Le visite dei pazienti vengono effettuate in ambulatorio come parte della normale routine.

Vengono esaminati componenti allergenici specifici disponibili in commercio (Thermo Fisher Scientific Phadia) (IgE e IgG4), nonché IgA, IgA1 e IgA2. I componenti allergenici del latte vaccino sono: alfa-lattoalbumina, beta-lattoglobulina, caseina, lattoferrina e sieroalbumina bovina, mentre i componenti allergenici dell'uovo sono: ovomucoide, ovoalbumina, conalbumina e lisozima.

I leucociti mononucleati vengono isolati dai campioni di sangue e coltivati ​​in incubatore a 37°C 10^6 cellule per millilitro di terreno RPMI (Roswell Park Memorial Institute Medium) contenente il 5% di plasma autologo e componenti allergenici del latte vaccino: alfa-lattoalbumina, beta-lattoglobulina , albumina di siero bovino, caseina e lattoferrina, o componenti allergenici dell'uovo: ovomucoide, ovoalbumina, conalbumina e lisozima. Il mitogeno viene utilizzato come controllo positivo e il mezzo senza stimolazione come controllo negativo. I componenti allergenici del latte e delle uova vengono puliti con colonne Detoxi-Gel Endotoxin Removal Gel (Thermo Scientific Pierce Chemicals) per rimuovere gli effetti delle endotossine durante la stimolazione cellulare. La linfoproliferazione viene studiata utilizzando tre campioni paralleli e l'espressione delle citochine viene studiata utilizzando due campioni paralleli (Luminex/Lincoplex: interleuchina-4 (IL-4), IL-5, IL-10, IL-12, IL-13, IL-17, IL-18, IL-22, IL-23, IL-27, interferone gamma (IFN-γ), fattore di necrosi tumorale (TNF) e fattore di crescita trasformante beta (TGF-β)).

Considerazioni etiche

Lo studio segue le istruzioni e i regolamenti utilizzati nella ricerca biomedica. Il comitato etico dell'Università di Turku ha approvato lo studio il 15 febbraio 2011. Ogni partecipante darà il consenso informato scritto. La partecipazione alla ricerca è volontaria e può essere sospesa senza alcun motivo in qualsiasi momento durante lo studio e il rifiuto o l'interruzione non influirà sull'altro trattamento del paziente. I campioni dei pazienti ei dati raccolti vengono elaborati e conservati secondo le istruzioni e le normative utilizzate nella ricerca biomedica.

Preventivo, calendario e risultati

Le visite dei pazienti vengono effettuate in ambulatori nell'ambito della normale accoglienza dei pazienti allergici e non comportano costi aggiuntivi per i pazienti. Le spese relative agli studi sulla risposta immunitaria mediata da anticorpi e cellulo-mediata sono coperte da finanziamenti esterni. Lo studio inizierà nell'autunno 2014 e prevede di essere completato nella primavera del 2016. I risultati saranno pubblicati su riviste scientifiche internazionali.