Hookworm-hoito keliakiaan (NainCeD-3)

Tämä tutkimus on vaiheen 1b monikeskustutkimus, monikansallinen, satunnaistettu, kaksoissokkoutettu yksisokkokäsivarsi ja avoin laajennusvaihe, lumekontrolloitu kliininen tutkimus, jossa arvioidaan turvallisuutta ja ennustettavuutta gluteenin kulutuksen kasvussa aktivoidakseen keliakian (CeD) vuonna ( a) pieni ryhmä ihmisiä, joilla on ruokavalion mukainen CeD, joita hoidettiin lumelääkevalmisteella (n=10), ja (b) kohortissa, jotka seuraavat matalaa (L3-10; n=40) ja keskitasoa (L3-20; n=10) annos koukkumatorokotetta.

Tavoitteet 1 ja 2 / Kliininen tutkimus: Ensisijainen tulos on lisääntyvän 30 viikon gluteenialtistuksen turvallisuus potilailla, jotka eivät ole aiemmin saaneet haukkamatotartuntaa tai hakamatotartunnan saaneet ihmiset, joilla on CeD keskisuuren annoksen hakamatoinfektion jälkeen, arvioituna pohjukaissuolen villon korkeuden muutoksella kryptan syvyyteen suhde (V:C) ennen koetta (viikko -2) ja post-altistus (viikko 42). Tämä on binäärimuuttuja, joka määritellään turvalliseksi, jos gluteenialtistus on suoritettu ja V:C-suhde >2,0 ja sen arvossa on <20 % muutos lähtötasosta tai epäonnistuu, jos keskeyttäminen tapahtuu ennen gluteenialtistuksen päättymistä tai V: C-suhde on <2,0 tai sen muutos lähtötasosta on >20 %.

Toissijaisiin tuloksiin kuuluvat matala- ja keskiintensiteetin hakamatoinfektion turvallisuus lisääntyvän gluteenialtistuksen välivaiheissa (12 viikkoa ja 24 viikkoa) arvioituna haittatapahtumien, vakavien haittatapahtumien sekä yleisen terveyden perusteella. Toissijaisia ​​tulosmittauksia ovat muutokset V:C-suhteessa lähtötilanteesta välipäätepisteisiin, eteneminen tutkimuksen onnistuneiden gluteenialtistusvaiheiden läpi, mukaan lukien vapaa ruokavalio, limakalvon intraepiteelin lymfosyyttien määrä, keliakian oireindeksi (CSI-kysely), keliakia-elämänlaatupisteet ( QOL-kysely) ja seerumin immunoglobuliini A:n (IgA) kudostransglutaminaasi (tTG) taso kaikissa kohortteissa.

Tavoitteet 3 ja 4/Aiheeseen liittyvät in vitro solumittaukset ja ex vivo limakalvostimulaatiotutkimukset: Liitännäistutkimukset on suunniteltu tutkimaan täydellisemmin kliinisten tulosten taustalla olevia immunologisia prosesseja ja hyödyntämään kliinisten vaatimusten yli kerättyä limakalvokudosta yksittäisten komponenttien testaamiseen. koukkumadon eritteitä, joilla uskomme olevan suuri potentiaali tulevaisuuden hoitoina. Nämä kokeet ovat monimutkaisia ​​ja riippuvat usein kudoksen ja kerättyjen solujen laadusta.

Tutkimusmenettely: Kun seulontakäynnillä on saatu kirjallinen tietoinen suostumus ja ennen ilmoittautumista, osallistujat saattavat vaatia hematologista työtä kelpoisuuden vahvistamiseksi. Osallistujat satunnaistetaan saamaan hakamadon toukkia (L3-10 tai L3-20) suspendoituna 2-3 pisaraan vettä iholle levitettynä ja kevyellä sidoksella peitettynä, tai Tabasco®-kastiketta liuoksessa (Placebo Comparator). Ennen rokottamista jokainen osallistuja täyttää QOL-kyselylomakkeen, lähettää tuoreen ulostenäytteen, ja hänelle tehdään verikoe ja pohjukaissuolen biopsia. Sen jälkeen joka viikko osallistumisen ajan lähetetään ruokapäiväkirja ja CSI-kyselylomake. Gluteenia lisätään määrättyinä aikoina kasvavina määrinä. Lisäksi kerätään veri-, uloste- ja biopsiakeräyksiä sekä QOL-kysely. L3:n riippumattoman vaikutuksen isäntäimmuniteettiin arvioimiseksi paremmin L3-20-kohortille tehdään endoskopia viikolla 12 viikon 36 intervention sijasta.

Turvallisuusparametrit/analyysi: Yleiset terveysarviot, fyysinen tarkastus ja elintärkeät merkit hankitaan seulonnassa ja sen jälkeen määrätyillä klinikkakäynneillä (tai oireiden perusteella tarpeen mukaan). Haitallisten ja vakavien tapahtumien ilmaantuvuus ja vakavuus, mukaan lukien todisteet osallistujien gluteeni-intoleranssista ja hakamatoon liittyvistä komplikaatioista, arvioidaan muodollisesti jäsenneltyjen kyselylomakkeiden avulla (CSI viikoittain ja QOL määrättyinä aikoina), jotka nimetty tutkimussairaanhoitaja tarkastaa ja epävirallisesti osallistujan aloitteesta henkilökohtaisesti. ota yhteyttä tutkimussairaanhoitajaan tai kliinikkoon. Myös kliinisen turvallisuuden ja histologisten tulosten verta tarkastetaan samanaikaisesti (valtuutettu tutkimussairaanhoitaja tai nimetty tutkija) laboratoriopoikkeavuuksien esiintyvyyden ja vakavuuden suhteen. Veritulokset ja oireiden pisteet koodataan uudelleen tunnistettavaan muotoon, ennen kuin ne lisätään suojattuun ja rajoitettuun tietokantaan. Seulontaveritestit, joihin sisältyy seerumin raskaustesti seulonnassa (positiivinen testi sulkee Osallistujaa pois tutkimuksesta) ja virtsaraskaustesti, jos raskautta epäillään koko tutkimuksen ajan. 12 kuukauden etenemistä vapaaseen ruokavalioon seurataan tTG:llä, joka arvioidaan kuukausittain, kuukausittaisen CSI-arvioinnin ja osallistujakontaktien avulla.

Laboratorioparametrit/analyysi: Verianalyysi: Täydellinen verenkuva (CBC), IgA-tTG-titteri, maksan ja munuaisten toiminta- ja rautakestit sekä seerumin raskaustesti suoritetaan Sullivan Nicolaides Pathologyssa (SNP) Australiassa ja Canterbury Health Laboratoriesissa Uusi Seelanti. Jäljelle jääneestä verestä kerätään perifeerisen veren mononukleaarisoluja (kun olosuhteet sen sallivat) ja seerumia varastoidaan.

Ulosteanalyysi: Näytteet kerätään anaerobisiin keräyspusseihin, joista osa siirretään mukana toimitettuun kierrekorkiseen muovipurkkiin, jotka molemmat pakastetaan -20 °C:ssa lyhytaikaista varastointia ja kuljetusta varten ja säilytetään -80 °C:ssa pitkään. termi loisten munasolujen kvantitatiiviselle polymeraasiketjureaktion (qPCR) analyysille, jonka suorittavat nimetyt, sokeuttamattomat henkilöt, joita valvoo professori James McCarthy QIMR Berghofer Medical Research Institutesta, ja tulokset säilyvät sokeina kaikille muille koehenkilöstölle. Ulostenäytteitä säilytetään myös tulevaa bakteeriyhteisöjen (mikrobiota) analysointia varten.

Limakalvoanalyysi: Pohjukaissuolen biopsiat (14 nipistysbiopsiaa, aiempien kokeiden mukainen) ottaa kansallisesti ja kokeeseen akkreditoitu gastroenterologi, jota tukee rauhoittava lääkäri akkreditoidussa laitoksessa. Tavanomaista histologiaa varten otetaan neljä biopsiaa. Standardoinnin varmistamiseksi biopsiapihdit ovat Boston Scientific Radial Jaw® 4 - 2,8 mm. Parafiiniin upotetut kudosleikkeet (3 μm) värjätään H&E:llä ja erilaistumisklusterilla 3 (anti-CD3). Kliinistä histopatologiaa valvoo maha-suolikanavan patologian asiantuntija (A/Prof. Andrew Clouston) ja raportoitu samanaikaisesti kliinisiin tarkoituksiin. Professori Clouston valitsee kustakin tapauksesta parhaat edustavat kenttäkuvat, koodaa ne sitten uudelleen tunnistettavissa olevaan muotoon ennen kuin ne lisätään rajoitettuun ja suojattuun tietokantaan, ja myöhemmin pisteytetään intraepiteliaalisten lymfosyyttien (IEL) % ja V:C osalta yhdellä kertaa. patologi (Dr. Greg Miller). Jokaisena ajankohtana säilytetään kaksi neljää biopsian kudosnäytettä -80 °C:ssa 10-prosenttisessa glyseroli-RNA:n stabilointiliuoksessa tulevaa geeniekspressiota ja mikrobiota-analyysejä varten.

Kokonaisveren tilavuus: 50 ml per keräys x 6 viikosta miinus 4 viikkoon 42. 10 ml kuukaudessa 12 kuukauden ajan. Yhteensä 420 ml 2 vuoden aikana.

Näytteen koon määritys: Gluteenin kulutus on myrkyllistä CeD:tä sairastavien ihmisten kuluttamana. Toisin kuin perinteisessä kokeessa, jossa testataan interventiota taudin kääntämiseksi, tämä tutkimus perustuu gluteenitoksisuuteen edistääkseen taudin aktiivisuutta. Kokeessa arvioidaan ensisijaisesti gluteenialtistuksen turvallisuutta CeD:ssä hakamatotartunnan saaneilla osallistujilla. Ehdotettu lisääntyvä gluteenihaaste on ennennäkemätön, ja vaikka monet CeD-potilaat kuluttavat liberaalia gluteenia joko tietämättömyydestä diagnoosista tai tietoisesta päätöksestä olla noudattamatta lääkärin ohjeita, tämän haasteen odotetaan vaikuttavan haitallisesti suojaamattomiin lumekontrolleihin. Tämän huolen mukaisesti kontrollikohortti on pidetty pienenä. Tutkimukseen osallistuu 60 osallistujaa, joista 10 on kontrolliryhmässä, 40 pieniannoksisessa hakamatoryhmässä (L3-10) ja 10 keskiannoksen hakamatoryhmässä (L3-20).