Hakenwurmtherapie bei Zöliakie (NainCeD-3)

Diese Studie ist eine multizentrische, multinationale, randomisierte, doppelblinde, placebokontrollierte, klinische Studie der Phase 1b mit einfach verblindetem Arm und offener Verlängerungsphase zur Bewertung der Sicherheit und Vorhersagbarkeit eines eskalierenden Glutenkonsums zur Aktivierung der Zöliakie (CeD) in ( a) eine kleine Kohorte von Menschen mit diätgesteuerter CeD, die mit einem Placebo behandelt wurden (n=10), und in (b) Kohorten nach niedriger (L3-10; n=40) und mittlerer (L3-20; n=10) Hakenwurm-Inokula dosieren.

Ziel 1 und 2/Klinische Studie: Das primäre Ergebnis wird die Sicherheit einer eskalierenden 30-wöchigen Glutenprovokation bei Hakenwurm-naiven oder Hakenwurm-infizierten Personen mit CeD nach einer Hakenwurminfektion mit mittlerer bis hoher Dosis sein, bewertet durch die Änderung der Zottenhöhe des Zwölffingerdarms zur Kryptentiefe Verhältnis (V:C) zwischen Vorversuch (Woche -2) und Nachbelastung (Woche 42). Dies ist eine binäre Variable, die als sicher definiert wird, wenn die Glutenprovokation abgeschlossen ist und das V:C-Verhältnis > 2,0 ist und sich der Wert um <20 % gegenüber der Grundlinie ändert, oder fehlschlägt, wenn ein Abbruch vor Abschluss der Glutenprovokation auftritt, oder V: Das C-Verhältnis beträgt < 2,0 oder seine Veränderung gegenüber dem Ausgangswert beträgt > 20 %.

Zu den sekundären Endpunkten gehört die Sicherheit einer Hakenwurminfektion niedriger und mittlerer Intensität bei mittleren (12 Wochen und 24 Wochen) Endpunkten einer eskalierenden Glutenprovokation, bewertet anhand des Auftretens unerwünschter Ereignisse, schwerwiegender unerwünschter Ereignisse sowie des allgemeinen Gesundheitszustands. Zu den sekundären Ergebnisparametern gehören Änderungen des V:C-Verhältnisses vom Ausgangswert bis zu den intermediären Endpunkten, Progression durch erfolgreiche Glutenbelastungsphasen der Studie, einschließlich einer liberalen Ernährung, intraepitheliale Lymphozytenzahl in der Schleimhaut, Zöliakie-Symptomindex (CSI-Fragebogen), Zöliakie-Quality-of-Life-Score ( QOL-Fragebogen) und der Serum-Immunglobulin-A (IgA)-Gewebe-Transglutaminase (tTG)-Spiegel aller Kohorten.

Ziele 3 und 4/Verbundene In-vitro-Zellmessungen und Ex-vivo-Untersuchungen zur Schleimhautstimulation: Die damit verbundenen Studien sind darauf ausgelegt, die immunologischen Prozesse, die die klinischen Ergebnisse untermauern, umfassender zu untersuchen und Schleimhautgewebe zu nutzen, das über die klinischen Anforderungen hinaus gesammelt wurde, um einzelne Komponenten zu testen von Hakenwurmsekreten, von denen wir glauben, dass sie ein großes Potenzial für zukünftige Therapien haben. Diese Experimente sind komplex und hängen oft von der Qualität des Gewebes und der gesammelten Zellen ab.

Studienablauf: Nach Erhalt der schriftlichen Einverständniserklärung beim Screening-Besuch und vor der Einschreibung können die Teilnehmer einige hämatologische Untersuchungen benötigen, um die Eignung zu bestätigen. Die Teilnehmer werden randomisiert und erhalten Hakenwurmlarven (L3-10 oder L3-20), die in 2-3 Tropfen Wasser suspendiert sind, auf die Haut aufgetragen und mit einem leichten Verband bedeckt werden, oder Tabasco®-Sauce in Lösung (Placebo-Vergleichspräparat). Vor der Impfung füllt jeder Teilnehmer einen QOL-Fragebogen aus, reicht eine frische Kotprobe ein und unterzieht sich einer Blutentnahme und einer Zwölffingerdarmbiopsie. Danach werden für die Dauer der Teilnahme jede Woche ein Ernährungstagebuch und ein CSI-Fragebogen eingereicht. Zu festgelegten Zeiten wird Gluten in steigenden Mengen eingeführt. Blut-, Kot- und Biopsieproben sowie ein QOL-Fragebogen werden ebenfalls gesammelt. Um die unabhängige Wirkung von L3 auf die Wirtsimmunität besser beurteilen zu können, wird die L3-20-Kohorte in Woche 12 anstelle der Intervention in Woche 36 einer Endoskopie unterzogen.

Sicherheitsparameter/-analyse: Allgemeine Gesundheitsbeurteilungen, körperliche Untersuchung und Vitalfunktionen werden beim Screening und danach bei bestimmten Klinikbesuchen (oder je nach Bedarf symptomgesteuert) erhoben. Inzidenz und Schweregrad von unerwünschten und schwerwiegenden Ereignissen, einschließlich Anzeichen von Glutenunverträglichkeit und Hakenwurm-bedingten Komplikationen der Teilnehmer, werden formell durch strukturierte Fragebögen (CSI wöchentlich und QOL zu den festgelegten Zeiten) bewertet, die von der zuständigen Forschungskrankenschwester und informell vom vom Teilnehmer initiierten Personal geprüft werden Kontakt mit einer Forschungskrankenschwester oder einem Kliniker. Außerdem werden Blut auf klinische Sicherheit und histologische Ergebnisse gleichzeitig (von einer ausgewiesenen Forschungskrankenschwester oder einem ausgewiesenen Forscher) auf Häufigkeit und Schweregrad von Laboranomalien untersucht. Blutergebnisse und Symptombewertungen werden in einem wieder identifizierbaren Format kodiert, bevor sie einer zugangsbeschränkten und sicheren Datenbank hinzugefügt werden. Screening-Bluttests, um einen Serum-Schwangerschaftstest beim Screening (ein positiver Test schließt die Teilnehmerin von der Teilnahme an der Studie aus) und einen Urin-Schwangerschaftstest einzuschließen, wenn während der gesamten Studie eine Schwangerschaft vermutet wird. Der 12-monatige Übergang zu einer liberalen Ernährung wird von tTG überwacht, die monatlich ausgewertet wird, mit monatlicher CSI-Evaluierung und Teilnehmerkontakt.

Laborparameter/Analyse: Blutanalyse: Vollständiges Blutbild (CBC), IgA-tTG-Titer, Leber- und Nierenfunktions- und Eisentests sowie ein Screening-Serum-Schwangerschaftstest werden bei Sullivan Nicolaides Pathology (SNP) in Australien und Canterbury Health Laboratories in Australien durchgeführt Neuseeland. Aus dem Restblut werden periphere mononukleäre Blutzellen entnommen (wenn die Umstände dies zulassen) und Serum wird gelagert.

Kotanalyse: Die Proben werden in anaeroben Sammelbeuteln gesammelt, wobei ein Aliquot in ein bereitgestelltes Plastikgefäß mit Schraubverschluss überführt wird, um beide bei -20 °C für die kurzfristige Lagerung und den Transport einzufrieren und bei -80 °C lange zu lagern. Begriff für die quantitative Polymerase-Kettenreaktionsanalyse (qPCR) von Parasiteneiern, die von nominiertem, nicht verblindetem Personal unter der Aufsicht von Prof. James McCarthy am QIMR Berghofer Medical Research Institute durchgeführt wird, wobei die Ergebnisse für alle anderen Studienmitarbeiter verblindet bleiben. Kotproben werden auch für zukünftige Analysen von Bakteriengemeinschaften (der Mikrobiota) aufbewahrt.

Schleimhautanalyse: Zwölffingerdarmbiopsien (14 Pinch-Biopsien, im Einklang mit früheren Studien) werden von einem national und für die Studie akkreditierten Gastroenterologen durchgeführt, der von einem Sedierer in einer akkreditierten Einrichtung unterstützt wird. Für die konventionelle Histologie werden vier Biopsien durchgeführt. Um die Standardisierung sicherzustellen, wird als Biopsiezange die Boston Scientific Radial Jaw® 4 - 2,8 mm verwendet. In Paraffin eingebettete Gewebeschnitte (3 μm) werden mit H&E und Anti-Cluster der Differenzierung 3 (Anti-CD3) gefärbt. Die klinische Histopathologie wird von einem Facharzt für Gastrointestinalpathologie (A/Prof. Andrew Clouston) und gleichzeitig für klinische Zwecke berichtet. Die besten repräsentativen Feldbilder aus jedem Fall werden von Prof. Clouston ausgewählt, dann in einem wieder identifizierbaren Format kodiert, bevor sie einer zugangsbeschränkten und sicheren Datenbank hinzugefügt werden, und später von einem einzigen auf intraepitheliale Lymphozyten (IEL) % und V:C bewertet Pathologe (Dr. Gregor Müller). Zu jedem Zeitpunkt werden zwei vier Biopsie-Gewebeproben bei -80 °C in 10 % GlycerolRNA-Stabilisierungslösung für zukünftige Genexpressions- und Mikrobiota-Analysen gelagert.

Gesamtblutvolumen: 50 ml pro Entnahme x 6 von Woche minus 4 bis Woche 42. 10 ml pro Monat für 12 Monate. Insgesamt 420 ml über 2 Jahre.

Bestimmung der Stichprobengröße: Der Verzehr von Gluten ist giftig, wenn er von Menschen mit CeD konsumiert wird. Im Gegensatz zu einer herkömmlichen Studie, in der eine Intervention zur Umkehrung von Krankheiten getestet wird, stützt sich diese Studie auf die Toxizität von Gluten, um die Krankheitsaktivität zu fördern. Die Studie bewertet in erster Linie die Sicherheit einer Glutenexposition bei CeD bei Hakenwurm-infizierten Teilnehmern. Die vorgeschlagene eskalierende Glutenherausforderung ist beispiellos, und während viele Menschen mit CeD einen großzügigen Glutenkonsum konsumieren, entweder aus Unkenntnis der Diagnose oder aus einer bewussten Entscheidung, den medizinischen Rat nicht zu befolgen, wird erwartet, dass diese Herausforderung die ungeschützten Placebokontrollen nachteilig beeinflussen wird. In Übereinstimmung mit dieser Sorge wurde die Kontrollkohorte klein gehalten. Die Studie wird aus 60 Teilnehmern bestehen, davon 10 in der Kontrollgruppe, 40 in der Hakenwurmgruppe mit niedriger Dosis (L3-10) und 10 in der Hakenwurmgruppe mit mittlerer Dosis (L3-20).