Terapia de anquilostomiasis para la enfermedad celíaca (NainCeD-3)

Este ensayo es un ensayo clínico de Fase 1b, multicéntrico, multinacional, aleatorizado, doble ciego con brazo simple ciego y fase de extensión de etiqueta abierta, controlado con placebo, que evalúa la seguridad y la previsibilidad de un consumo creciente de gluten para activar la enfermedad celíaca (CeD) en ( a) una pequeña cohorte de personas con CeD controlada por dieta tratada con un placebo (n=10), y en (b) cohortes después de baja (L3-10; n=40) y media (L3-20; n=10) dosis de inóculos de anquilostomiasis.

Objetivo 1 y 2/Estudio clínico: el resultado principal será la seguridad de un desafío de gluten creciente de 30 semanas en personas sin experiencia con anquilostomiasis o infectados con anquilostomiasis con CeD después de una infección por anquilostomiasis en dosis media-alta, evaluada por el cambio de la altura de las vellosidades duodenales a la profundidad de la cripta relación (V:C) entre pre-prueba (semana -2) y post-desafío (semana 42). Esta será una variable binaria definida como segura si se completa el desafío con gluten y la relación V:C > 2.0 y hay un cambio <20 % en su valor con respecto al valor inicial o falla si el abandono se produce antes de completar el desafío con gluten o V: La relación C es <2,0 o su cambio con respecto al valor inicial es >20 %.

Los resultados secundarios incluyen la seguridad de la anquilostomiasis de intensidad baja y media en los puntos finales intermedios (12 semanas y 24 semanas) de un desafío de gluten en aumento, evaluado por la incidencia de eventos adversos, eventos adversos graves y la salud general. Las medidas de resultado secundarias incluyen cambios en la relación V:C desde el inicio hasta los puntos finales intermedios, progresión a través de las fases exitosas de desafío con gluten del ensayo que incluyen una dieta liberal, recuento de linfocitos intraepiteliales en la mucosa, índice de síntomas celíacos (cuestionario CSI), puntuación de calidad de vida celíaca ( QOL) y el nivel de transglutaminasa tisular (tTG) de inmunoglobulina A (IgA) sérica de todas las cohortes.

Objetivos 3 y 4/Medidas de células in vitro asociadas e investigaciones de estimulación de la mucosa ex vivo: los estudios asociados están diseñados para explorar más a fondo los procesos inmunológicos que sustentan los resultados clínicos y para aprovechar el tejido de la mucosa recolectado en exceso de los requisitos clínicos para probar componentes individuales. de secreciones de anquilostomiasis que creemos tienen un gran potencial como futuras terapias. Estos experimentos son complejos y, a menudo, dependen de la calidad del tejido y de las células recolectadas.

Procedimiento del estudio: después de obtener el consentimiento informado por escrito en la visita de selección y antes de la inscripción, es posible que los participantes necesiten algún estudio hematológico para confirmar la elegibilidad. Los participantes serán aleatorizados para recibir larvas de anquilostomiasis (L3-10 o L3-20) suspendidas en 2-3 gotas de agua aplicadas sobre la piel y cubiertas con un apósito ligero o salsa Tabasco® en solución (comparador de placebo). Antes de la inoculación, cada participante completará un cuestionario de calidad de vida, enviará una muestra fecal fresca y se someterá a una extracción de sangre y una biopsia duodenal. A partir de entonces, cada semana durante la duración de la participación, se enviará un diario de alimentos y un cuestionario CSI. En momentos designados, el gluten se introducirá en volúmenes crecientes. También se recolectarán muestras de sangre, heces y biopsias, y un cuestionario de calidad de vida. Para evaluar mejor el efecto independiente de L3 sobre la inmunidad del huésped, la cohorte L3-20 se someterá a una endoscopia en la semana 12 en lugar de la intervención de la semana 36.

Parámetros/análisis de seguridad: se obtendrán evaluaciones generales de salud, examen físico y signos vitales en la selección y, posteriormente, en las visitas clínicas designadas (o en función de los síntomas, según sea necesario). La incidencia y la gravedad de los Eventos adversos y graves, incluida la evidencia de intolerancia al gluten y las complicaciones relacionadas con la anquilostomiasis de los Participantes, se evaluarán formalmente a través de cuestionarios estructurados (CSI semanal y QOL en los momentos designados) para ser examinados por la enfermera de investigación designada e informalmente a través del personal iniciado por el Participante. contacto con una enfermera de investigación o un médico. Además, la sangre para la seguridad clínica y los resultados histológicos se analizarán al mismo tiempo (por una enfermera de investigación designada o un investigador designado) para determinar la incidencia y la gravedad de las anomalías de laboratorio. Los resultados de sangre y las puntuaciones de los síntomas se codificarán en un formato reidentificable antes de agregarlos a una base de datos segura y de acceso restringido. Pruebas de detección de sangre para incluir una prueba de embarazo en suero en la selección (una prueba positiva excluirá al participante de participar en el ensayo) y una prueba de embarazo en orina si se sospecha un embarazo durante todo el ensayo. La progresión de 12 meses a una dieta liberal será monitoreada por tTG evaluado mensualmente, con evaluación mensual de CSI y contacto con el Participante.

Parámetros/análisis de laboratorio: Análisis de sangre: hemograma completo (CBC), título de IgA-tTG, función hepática y renal y pruebas de hierro y una prueba de detección de embarazo en suero se realizarán en Sullivan Nicolaides Pathology (SNP) en Australia y Canterbury Health Laboratories en Nueva Zelanda. De la sangre residual, se recolectarán células mononucleares de sangre periférica (cuando las circunstancias lo permitan) y se almacenará el suero.

Análisis fecal: las muestras se recolectarán en bolsas de recolección anaerobia con una alícuota para transferir a un frasco de plástico con tapa de rosca provisto, ambos para congelar a -20 ° C para almacenamiento y transporte a corto plazo, y almacenar a -80 ° C a largo plazo. término para el análisis de la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa (qPCR) de huevos de parásitos a ser realizado por personal no cegado supervisado por el Prof. James McCarthy en el Instituto de Investigación Médica QIMR Berghofer, con los resultados para permanecer cegados a todo el resto del personal del ensayo. Las muestras fecales también se almacenarán para futuros análisis de comunidades bacterianas (la microbiota).

Análisis de la mucosa: las biopsias duodenales (14 biopsias por pellizco, de acuerdo con los ensayos anteriores) serán tomadas por un gastroenterólogo acreditado a nivel nacional y en ensayos con el apoyo de un sedante en un centro acreditado. Se realizarán cuatro biopsias para histología convencional. Para garantizar la estandarización, las pinzas de biopsia que se utilizarán serán Boston Scientific Radial Jaw® 4 - 2,8 mm. Las secciones de tejido incluidas en parafina (3 μm) se tiñerán con H&E y anti-cluster de diferenciación 3 (anti-CD3). La histopatología clínica será supervisada por un especialista en patología gastrointestinal (A/Prof. Andrew Clouston) y se informó al mismo tiempo con fines clínicos. El profesor Clouston seleccionará las mejores imágenes de campo representativas de cada caso, luego las codificará en un formato reidentificable antes de agregarlas a una base de datos segura y de acceso restringido, y luego las calificará para los linfocitos intraepiteliales (IEL)% y V:C por un solo patólogo (Dr. Greg Miller). En cada momento, se almacenarán dos muestras de tejido de biopsia a -80 °C en una solución de estabilización de ARN con glicerol al 10 % para futuros análisis de microbiota y expresión génica.

Volumen de sangre total: 50 ml por colección x 6 desde la semana menos 4 hasta la semana 42. 10 ml por mes durante 12 meses. Total 420 ml durante 2 años.

Determinación del tamaño de la muestra: El consumo de gluten es tóxico cuando lo consumen personas con CeD. A diferencia de un ensayo convencional que prueba una intervención para revertir la enfermedad, este ensayo se basa en la toxicidad del gluten para promover la actividad de la enfermedad. El ensayo evalúa principalmente la seguridad de la exposición al gluten en CeD en participantes infectados con anquilostomiasis. El desafío creciente del gluten propuesto no tiene precedentes, y aunque muchas personas con CeD consumen un consumo liberal de gluten, ya sea por ignorancia del diagnóstico o por una decisión consciente de no cumplir con el consejo médico, se anticipa que este desafío afectará negativamente a los controles de placebo sin protección. De acuerdo con esta preocupación, la cohorte de control se ha mantenido pequeña. El estudio constará de 60 participantes, con 10 en el grupo de control, 40 en el grupo de anquilostomiasis de dosis baja (L3-10) y 10 en el grupo de anquilostomiasis de dosis media (L3-20).