Thérapie ankylostome pour la maladie coeliaque (NainCeD-3)

Cet essai est un essai clinique de phase 1b multicentrique, multinational, randomisé, en double aveugle avec un bras en simple aveugle et une phase d'extension en ouvert, contrôlé par placebo, évaluant l'innocuité et la prévisibilité d'une consommation croissante de gluten pour activer la maladie coeliaque (CeD) en ( a) une petite cohorte de personnes atteintes de DEC diététique traitées avec un placebo (n = 10), et dans (b) des cohortes suivant faible (L3-10 ; n = 40) et moyen (L3-20 ; n = 10) doser les inoculums d'ankylostomes.

Objectif 1 et 2/Étude clinique : le résultat principal sera l'innocuité d'une provocation croissante au gluten sur 30 semaines chez les personnes naïves d'ankylostome ou infectées par l'ankylostome atteintes de TEC à la suite d'une infection par l'ankylostomiase à dose moyenne à élevée, évaluée par le changement de la hauteur des villosités duodénales en profondeur de la crypte rapport (V:C) entre le pré-essai (semaine -2) et le post-provocation (semaine 42). Il s'agira d'une variable binaire définie comme sûre si la provocation au gluten est terminée et le rapport V:C> 2,0 et qu'il y a un changement <20 % de sa valeur par rapport à la ligne de base ou un échec si l'abandon se produit avant la fin de la provocation au gluten ou V : Le rapport C est < 2,0 ou son changement par rapport à la ligne de base est > 20 %.

Les critères de jugement secondaires incluent l'innocuité de l'ankylostomiase d'intensité faible et moyenne aux critères d'évaluation intermédiaires (12 semaines et 24 semaines) d'une provocation croissante au gluten, évaluée par l'incidence des événements indésirables, les événements indésirables graves ainsi que l'état de santé général. Les critères de jugement secondaires comprennent les modifications du rapport V:C entre le départ et les critères d'évaluation intermédiaires, la progression dans les phases de provocation au gluten réussies de l'essai, y compris un régime libéral, le nombre de lymphocytes intraépithéliaux muqueux, l'indice des symptômes coeliaques (questionnaire CSI), le score de qualité de vie coeliaque ( QOL) et le taux sérique d'immunoglobuline A (IgA) transglutaminase tissulaire (tTG) de toutes les cohortes.

Objectifs 3 et 4/Mesures cellulaires in vitro associées et investigations ex vivo sur la stimulation des muqueuses : les études associées sont conçues pour explorer plus en détail les processus immunologiques qui sous-tendent les résultats cliniques et tirer parti des tissus muqueux collectés au-delà des exigences cliniques pour tester des composants individuels des sécrétions d'ankylostomes qui, selon nous, ont un grand potentiel en tant que futures thérapies. Ces expériences sont complexes et dépendent souvent de la qualité des tissus et des cellules prélevées.

Procédure de l'étude : Après l'obtention du consentement éclairé écrit lors de la visite de dépistage et avant l'inscription, les participants peuvent avoir besoin de certains travaux hématologiques pour confirmer leur admissibilité. Les participants seront randomisés pour recevoir des larves d'ankylostomes (L3-10 ou L3-20) en suspension dans 2-3 gouttes d'eau appliquées sur la peau et recouvertes d'un pansement léger, ou de sauce Tabasco® en solution (Comparateur Placebo). Avant l'inoculation, chaque participant remplira un questionnaire sur la qualité de vie, soumettra un échantillon fécal frais et subira une prise de sang et une biopsie duodénale. Par la suite, chaque semaine pendant toute la durée de la participation, un journal alimentaire et un questionnaire CSI seront soumis. À des moments désignés, le gluten sera introduit en volumes croissants. Des prélèvements sanguins, fécaux et de biopsie, ainsi qu'un questionnaire QOL seront également collectés. Pour mieux évaluer l'effet indépendant de L3 sur l'immunité de l'hôte, la cohorte L3-20 subira une endoscopie à la semaine 12 au lieu de l'intervention de la semaine 36.

Paramètres de sécurité/analyse : Des évaluations générales de la santé, un examen physique et des signes vitaux seront obtenus lors du dépistage et par la suite lors de visites cliniques désignées (ou en fonction des symptômes, au besoin). L'incidence et la gravité des événements indésirables et graves, y compris les preuves d'intolérance au gluten et de complications liées à l'ankylostome des participants, seront évaluées formellement au moyen de questionnaires structurés (CSI hebdomadaire et qualité de vie aux heures désignées) qui seront examinés par l'infirmière de recherche désignée et de manière informelle par le biais du personnel initié par le participant. contact avec une infirmière de recherche ou un clinicien. De plus, le sang pour la sécurité clinique et les résultats histologiques seront examinés simultanément (par une infirmière de recherche désignée ou un chercheur désigné) pour l'incidence et la gravité des anomalies de laboratoire. Les résultats sanguins et les scores de symptômes seront codés dans un format ré-identifiable avant d'être ajoutés à une base de données sécurisée et à accès restreint. Tests sanguins de dépistage pour inclure un test de grossesse sérique lors du dépistage (un test positif exclura le participant de l'essai) et un test de grossesse urinaire si une grossesse est suspectée tout au long de l'essai. La progression sur 12 mois vers un régime libéral sera surveillée par le tTG évalué mensuellement, avec une évaluation mensuelle du CSI et un contact avec les participants.

Paramètres de laboratoire/analyse : analyse de sang : numération globulaire complète (CBC), titre d'IgA-tTG, fonctions hépatique et rénale et tests de fer et un test de grossesse sérique de dépistage seront effectués à Sullivan Nicolaides Pathology (SNP) en Australie et aux laboratoires de santé de Canterbury en Nouvelle-Zélande. A partir du sang résiduel, les cellules mononucléaires du sang périphérique seront récoltées (lorsque les circonstances le permettent) et le sérum sera stocké.

Analyse fécale : les échantillons seront collectés dans des sacs de collecte anaérobies avec une aliquote à transférer dans un bocal en plastique à bouchon vissé fourni, tous deux à congeler à -20 °C pour un stockage et un transport à court terme, et stockés à -80 °C pendant longtemps. terme désignant l'analyse quantitative par réaction en chaîne par polymérase (qPCR) d'œufs de parasites à effectuer par un personnel nommé non aveugle supervisé par le professeur James McCarthy au QIMR Berghofer Medical Research Institute, les résultats devant rester en aveugle pour tous les autres membres du personnel de l'essai. Des échantillons fécaux seront également stockés pour de futures analyses des communautés bactériennes (le microbiote).

Analyse de la muqueuse : des biopsies duodénales (14 biopsies par pincement, conformément aux essais précédents) seront effectuées par un gastro-entérologue agréé au niveau national et à l'essai, assisté d'un sédationniste dans un établissement agréé. Quatre biopsies seront engagées pour l'histologie conventionnelle. Pour garantir la standardisation, la pince à biopsie à utiliser sera Boston Scientific Radial Jaw® 4 - 2,8 mm. Des coupes de tissus inclus en paraffine (3 μm) seront colorées avec H&E et anti-cluster de différenciation 3 (anti-CD3). L'histopathologie clinique sera supervisée par un spécialiste en pathologie gastro-intestinale (A/Prof. Andrew Clouston) et rapporté simultanément à des fins cliniques. Les meilleures images de terrain représentatives de chaque cas seront sélectionnées par le professeur Clouston, puis codées dans un format ré-identifiable avant d'être ajoutées à une base de données sécurisée et à accès restreint, puis notées pour les lymphocytes intraépithéliaux (IEL) % et V: C par un seul pathologiste (Dr. Greg Miller). À chaque instant, deux quatre échantillons de tissu de biopsie seront stockés à -80 °C dans une solution de stabilisation de glycérolARN à 10 % pour l'expression future des gènes et les analyses du microbiote.

Volume sanguin total : 50 ml par prélèvement x 6 de la semaine moins 4 à la semaine 42. 10 ml par mois pendant 12 mois. Total 420 ml sur 2 ans.

Détermination de la taille de l'échantillon : La consommation de gluten est toxique lorsqu'elle est consommée par des personnes atteintes de DEC. Contrairement à un essai conventionnel testant une intervention pour inverser la maladie, cet essai repose sur la toxicité du gluten pour favoriser l'activité de la maladie. L'essai évalue principalement la sécurité de l'exposition au gluten dans le CED chez les participants infectés par l'ankylostome. Le défi croissant du gluten proposé est sans précédent, et bien que la consommation libérale de gluten soit consommée par de nombreuses personnes atteintes de CeD, soit par ignorance du diagnostic, soit par décision consciente de ne pas se conformer aux conseils médicaux, il est prévu que ce défi affectera négativement les contrôles placebo non protégés. Conformément à cette préoccupation, la cohorte de contrôle a été maintenue petite. L'étude comprendra 60 participants, dont 10 dans le groupe témoin, 40 dans le groupe ankylostome à faible dose (L3-10) et 10 dans le groupe ankylostome à dose moyenne (L3-20).