Анкилостомоз при целиакии (NainCeD-3)

Это многоцентровое, многонациональное, рандомизированное, двойное слепое исследование фазы 1b с односторонней слепой группой и открытой расширенной фазой, плацебо-контролируемое клиническое исследование, оценивающее безопасность и предсказуемость увеличения потребления глютена для активации глютеновой болезни (CeD) в ( а) небольшая когорта людей с КЭД, контролируемых диетой, получавших плацебо (n=10), и в (b) когортах после низкого (L3-10; n=40) и среднего (L3-20; n=10) доза инокулята анкилостомы.

Цель 1 и 2/Клиническое исследование: первичным результатом будет безопасность эскалации 30-недельной провокации глютеном у людей, ранее не получавших анкилостомоз, или инфицированных анкилостомозом людей с церебральной дисплазией после средневысокой дозы анкилостомозной инфекции, оцениваемой по изменению высоты ворсинок двенадцатиперстной кишки на глубину крипт соотношение (V:C) до испытания (неделя -2) и после заражения (неделя 42). Это будет бинарная переменная, определяемая как безопасная, если провокация глютеном завершена и отношение V:C >2,0 и его значение отличается от исходного уровня менее чем на 20%, или не пройдена, если выпадение происходит до завершения провокации глютеном или V: Отношение C <2,0 или его изменение по сравнению с исходным уровнем >20%.

Вторичные результаты включают безопасность анкилостомоза низкой и средней интенсивности в промежуточных (12 недель и 24 недели) конечных точках эскалации глютеновой провокации, оцениваемой по частоте нежелательных явлений, серьезных нежелательных явлений, а также по общему состоянию здоровья. Вторичные показатели исхода включают изменения соотношения V:C от исходного уровня до промежуточных конечных точек, прогрессирование через успешные этапы испытаний с глютеном, включая либеральную диету, количество интраэпителиальных лимфоцитов слизистой оболочки, индекс симптомов глютеновой болезни (опросник CSI), показатель качества жизни при глютеновой болезни (Celiac-Quality Score). вопросник QOL) и уровень сывороточного иммуноглобулина A (IgA) тканевой трансглутаминазы (tTG) во всех когортах.

Цели 3 и 4/Связанные измерения клеток in vitro и исследования стимуляции слизистой оболочки ex vivo. Связанные исследования предназначены для более полного изучения иммунологических процессов, лежащих в основе клинических результатов, и использования ткани слизистой оболочки, собранной сверх клинических требований, для тестирования отдельных компонентов. секретов анкилостомы, которые, по нашему мнению, имеют большой потенциал в качестве будущих методов лечения. Эти эксперименты сложны и часто зависят от качества ткани и собранных клеток.

Процедура исследования: после получения письменного информированного согласия во время скринингового визита и до включения участников в исследование может потребоваться проведение некоторых гематологических исследований для подтверждения соответствия требованиям. Участники будут рандомизированы для получения личинок анкилостомы (L3-10 или L3-20), взвешенных в 2-3 каплях воды, нанесенных на кожу и покрытых легкой повязкой, или соусом Tabasco® в растворе (компаратор плацебо). Перед прививкой каждый участник заполнит анкету QOL, представит свежий образец кала, проведет забор крови и биопсию двенадцатиперстной кишки. После этого каждую неделю в течение всего периода участия будут представляться пищевой дневник и анкета CSI. В назначенное время глютен будет вводиться в увеличивающихся объемах. Также будут собраны образцы крови, кала и биопсии, а также анкета QOL. Чтобы лучше оценить независимое влияние L3 на иммунитет хозяина, когорта L3-20 будет подвергнута эндоскопии на 12-й неделе вместо вмешательства на 36-й неделе.

Параметры/анализ безопасности. Общая оценка состояния здоровья, физикальное обследование и основные показатели жизнедеятельности будут получены во время скрининга, а затем во время назначенных визитов в клинику (или, при необходимости, по симптомам). Частота и тяжесть Неблагоприятных и Серьезных Явлений, включая доказательства непереносимости глютена и осложнений, связанных с анкилостомами у Участников, будут оцениваться официально с помощью структурированных анкет (еженедельно CSI и QOL в назначенное время), которые будут тщательно проверяться назначенной медсестрой-исследователем, и неофициально через личное участие, инициированное Участником. связаться с медсестрой-исследователем или клиницистом. Кроме того, кровь на предмет клинической безопасности и гистологических результатов будет тщательно изучаться одновременно (назначенной медсестрой-исследователем или назначенным исследователем) на предмет частоты и тяжести лабораторных отклонений. Результаты крови и оценки симптомов будут закодированы в повторно идентифицируемом формате перед добавлением в защищенную базу данных с ограниченным доступом. Скрининговые анализы крови, включая сывороточный тест на беременность при скрининге (положительный результат исключает участие Участника в исследовании) и анализ мочи на беременность, если беременность подозревается на протяжении всего исследования. 12-месячный переход к либеральной диете будет контролироваться ежемесячно оцениваемым tTG, с ежемесячной оценкой CSI и контактом с участником.

Лабораторные параметры/анализ: Анализ крови: общий анализ крови (CBC), титр IgA-tTG, анализы функции печени и почек, анализы на железо и скрининговый сывороточный тест на беременность будут выполняться в Sullivan Nicolaides Pathology (SNP) в Австралии и Canterbury Health Laboratories в Новая Зеландия. Из остаточной крови собирают мононуклеарные клетки периферической крови (когда позволяют обстоятельства), а сыворотку сохраняют.

Анализ фекалий: Образцы будут собраны в пакеты для анаэробного сбора с аликвотой, которая будет перенесена в прилагаемую пластиковую банку с завинчивающейся крышкой, обе должны быть заморожены при температуре -20°C для краткосрочного хранения и транспортировки, а также храниться при температуре -80°C в течение длительного времени. термин для анализа количественной полимеразной цепной реакции (кПЦР) яиц паразитов, который должен выполнять назначенный неслепой персонал под руководством профессора Джеймса Маккарти из Медицинского исследовательского института QIMR Berghofer, при этом результаты остаются скрытыми для всего другого персонала, проводящего испытания. Образцы фекалий также будут храниться для будущего анализа бактериальных сообществ (микробиоты).

Анализ слизистой оболочки: биопсии двенадцатиперстной кишки (14 щипковых биопсий, в соответствии с предыдущими испытаниями) будут взяты гастроэнтерологом, аккредитованным на национальном уровне и в клинических испытаниях, при поддержке седативного врача в аккредитованном учреждении. Четыре биопсии будут совершены для обычной гистологии. Для обеспечения стандартизации будут использоваться щипцы для биопсии Boston Scientific Radial Jaw® 4–2,8 мм. Срезы ткани, залитые парафином (3 мкм), будут окрашены H&E и анти-кластером дифференцировки 3 (анти-CD3). Клиническую гистопатологию будет контролировать специалист по патологии желудочно-кишечного тракта (A/Prof. Эндрю Клоустон) и сообщалось одновременно для клинических целей. Лучшие репрезентативные изображения поля из каждого случая будут выбраны профессором Клустоном, затем закодированы в повторно идентифицируемом формате перед добавлением в защищенную базу данных с ограниченным доступом, а затем оценены для внутриэпителиальных лимфоцитов (IEL)% и V:C с помощью одного патологоанатом (д. Грег Миллер). В каждый момент времени два образца биопсийной ткани будут храниться при температуре -80 ° C в стабилизирующем растворе 10% глицерина РНК для будущей экспрессии генов и анализа микробиоты.

Общий объем крови: 50 мл на сбор x 6 с недели минус 4 до недели 42. 10 мл в месяц в течение 12 месяцев. Всего 420 мл за 2 года.

Определение размера выборки: потребление глютена токсично для людей с церебральной дисфункцией. В отличие от обычного испытания, проверяющего вмешательство, направленное на излечение болезни, это испытание основано на токсичности глютена для повышения активности болезни. В исследовании в первую очередь оценивается безопасность воздействия глютена при ЦЭД на участников, инфицированных анкилостомозом. Предложенная эскалация глютена является беспрецедентной, и хотя многие люди с КЭД потребляют обильное потребление глютена либо из-за незнания диагноза, либо из-за сознательного решения не следовать медицинским советам, ожидается, что эта проблема неблагоприятно повлияет на незащищенные плацебо-контроли. В соответствии с этой проблемой контрольная когорта была небольшой. В исследовании примут участие 60 человек, 10 из которых входят в контрольную группу, 40 — в группу с низкой дозой анкилостомы (L3-10) и 10 — в группу со средней дозой анкилостомы (L3-20).