P.Acnes-pesäkkeiden lukumäärä ihonalaisen kefatsoliinin jälkeen

Tarkoitus Tutkimuksen tarkoituksena on selvittää, vähentääkö ihonalainen antibioottien injektio intraoperatiivisesti ihonalaisen kudoksen bakteerikuormitusta avoimen olkapääleikkauksen aikana.

Nollahypoteesi P.acnes-pesäkkeiden määrässä ei tapahdu muutoksia ihonalaisten antibioottien antamisen jälkeen.

Perustelut. P. Aknes on yleisin olkapäätulehduksen syy. Leikkauksen jälkeisten olkaniveltulehdusten ilmaantuvuus vaihtelee 4-18 %. P.acnes-organismi on grampositiivinen, suurelta osin anaerobinen, mutta aerotolerantti syvistä ihotuppeleista koostuva yhteisvaikutus, ja tavallinen ihon valmistelu voi tunkeutua puutteellisesti pilosebaceous follikkeleihin. Levy et al.:n tutkimuksessa on myös osoitettu, että 41,8 %:lla potilaista oli positiivinen biopsia- tai aspiraattitulos P.acnesin suhteen ennen komponenttien implantointia. Tässä tutkimuksessa selvitetään, vähentääkö intraoperatiivinen subdermaalinen antibioottien anto bakteerikuormaa ja puolestaan ​​vähentääkö olkaniveltulehdusten ilmaantuvuutta. Kefatsoliini on valittu, koska kefalosporiinit ja penisilliineillä on alhaisin P.acnes-inhibiittoripitoisuus (MIC). Kefalosporiineille on vähemmän allergioita kuin penisilliineille. Tällä tutkimuksella on potentiaalia muuttaa kliinistä käytäntöä maailmanlaajuisesti.

Tavoitteet Tarkoituksena on verrata bakteerisolujen määrää leikkaushaavan kummallakin puolella ja määrittää, vähentävätkö ihonalaiset antibiootit yhdellä puolella ihonalaisten solujen määrää eri aikavälein leikkauksen aikana.

Tutkimusmenetelmä. Kohdennettu rekrytointi on 20 potilasta tässä pilottitutkimuksessa. Tämä luku on saatu, kun on määritetty tutkimuksen teho, merkitsevyystasot ja odotettu P.acnes-määrän kolonisaation lasku paikallisten antibioottien käytön jälkeen. Se on myös nopeasti saavutettavissa oleva luku, jonka avulla voimme arvioida, onko ryhmien välillä havaittu eroa, ja siten arvioida suuremman kokeilun toteutettavuutta.

Potilaat saavat normaalin hoidon preoperatiivisia antibiootteja 30 minuuttia ennen viiltoa ja leikkausta. Iho preparoidaan myös käyttämällä klooriheksidiinialkoholipohjaista liuosta, kuten tutkijalaitoksessa on vakiona. Tutkijat jakavat normaalin kirurgisen viillon kolmeen tasaiseen osaan viillon kummallakin puolella, jolloin muodostuu kuusi segmenttiä. Haavan toiselle puolelle injektoidaan kolme 3 ml:n erää käyttäen kefatsoliinipitoisuutta 100 mg/ml. Tämä vastaa 900 mg:aa ihonalaista kefatsoliiniantibioottia. Tässä ympäristössä oleville aineille ei ole erityisiä tehokkuuskriteerejä, jotka on standardoitu ja virallisen valvontaviraston hyväksymä. Olemme valinneet tämän määrän tämän pitoisuuden turvallisen ja laajalle levinneen systeemisen käytön perusteella sekä huomioiden helposti saatavilla olevat pitoisuudet. Ei ole tiedossa tutkimusta, joka kuvaisi haittoja antibioottien viemisestä pehmytkudokseen, esim. vankomysiini, jota käytetään paikallisesti proteettisissa nivelissä infektioiden ehkäisyyn ja lihaksensisäisten (IM) penisilliinituotteiden laajaan käyttöön. Ihonalaisen kefatsoliinin on osoitettu olevan turvallinen sikamallissa, vaikka se antaa suurempia pitoisuuksia iholle kuin vertaileva systeeminen anto. Ihonalainen keftriaksoni on hyväksytty käytettäväksi Ranskassa, ja sitä käytetään yhä enemmän vanhuksilla sekä tartuntatautien harjoittajilla. On julkaistu näyttöä kefatsoliinin turvallisesta antamisesta tummuvan anestesian antibioottien annostelussa lidokaiinin, epinefriinin ja natriumbikarbonaatin kanssa.

Standardoiduista näytteistä kaikista kuudesta osastosta otetaan näytteet kertakäyttöisellä 6 mm Mitex-biopsialla ennen inokulaatiota, ja tämä prosessi toistetaan 60 minuutin kohdalla. Näytteet lähetetään mikrobiologian laboratorioon, jossa mitataan pesäkemäärä ja tehdään pitkäaikaiset eli 3 viikon viljelyt.

Leikkauksessa rutiininomaisesti pistetään ihonalaisia ​​aineita, ja harvoin otetaan biopsiat. Ainoa mahdollinen sivuvaikutus on allergia kefalosporiineille, joka olisi määritetty ennen leikkausta ja kuuluu poissulkemiskriteereihin. Infektioiden tai verenvuodon ilmaantuvuuden ei odoteta lisääntyvän.

Keräys, käsittely ja varastointi Näytteet merkitään asianmukaisilla potilastunnisteilla ja selvästi keräyspaikalla ja lähetetään välittömästi laboratorioon käsittelyä varten niin pian kuin mahdollista. Kudosbiopsiat lähetetään joko anaerobisessa kuljetusväliaineessa tai steriilissä astiassa, jossa on steriili sideharso, joka on kostutettu ei-bakteriostaattisella suolaliuoksella, tai jos pala on riittävän suuri, astiaan vain muutama tippa ei-bakteriostaattista ainetta kudoksen estämiseksi. kuivumisesta.

Kudosten käsittely Kaikki näytteiden käsittelyt suoritetaan Biological Safety Cabinetissa ja käsitellään mahdollisimman pian. Kudokset siirrostetaan alustaan ​​Propionibacterium acnesin talteenoton maksimoimiseksi. Propionibacterium acnes sisältää 5 % lampaanveriagar- ja suklaa-agarmaljoja ja tioglykolaatti (THIO) -lientä, jota inkuboidaan 5 % hiilidioksidin (CO2) alla 35 celsiusasteessa. Brucella- ja Columbia Naladixic acid (CNA)-agarit inkuboidaan anaerobisissa olosuhteissa 35 celsiusasteessa.

Steriilillä pihdeillä kudos siirretään steriilille Petri-levylle. Kertakäyttöisellä steriilillä veitsellä kudos leikataan niin pieniksi paloiksi, että kaikki tarvittava väliaine rokotetaan. Useita kudospaloja lisätään THIO-liemeen. Jäljelle jääneet väliaineet ympätään vähiten selektiivisimmän ja selektiivisimmän järjestyksessä: veri-agar-levy, suklaa-agar-levy, Brucella ja CNA-agar.

Lopuksi "kosketusvalmistelut" grammanäytteitä varten suoritetaan koskettamalla varovasti tuoretta kudospalaa mikroskoopin objektilaseille. Tämä kudospala heitetään pois, koska se on nyt mahdollisesti saastunut.

Kudostutkimus

Kaikki mediat inkuboidaan 5 päivää ja luetaan päivittäin. Liemi säilytetään 21 päivää ja tutkitaan 7, 14 ja 21 päivän kuluttua ensimmäisten 5 päivän lukemista. Potilaita ei tarvitse seurata 2 vuoden ajan, koska pyrimme vain määrittämään leikkauksensisäisten pesäkkeiden lukumäärän muutoksen, joka voidaan määrittää 21 päivän kuluessa ja joka voi liittyä infektion vähenemiseen.

Kaikki bakteerien kasvu tutkitaan tavallisilla laboratoriomenetelmillä tunnistamista ja antimikrobisen herkkyyden testausta varten.

Tulokset raportoidaan tutkimuksen tutkijoille hyvissä ajoin

Tilastollinen analyysi. Näytteitä verrataan haavan kummallekin puolelle vastaavien ajanjaksojen aikana. Laskentakeskiarvot saadaan ja analysoidaan käyttämällä parillista t-testiä.