Количество колоний P.Acnes после подкожного введения цефазолина

Цель Целью исследования является изучение того, снижает ли интраоперационное подкожное введение антибиотиков бактериальную нагрузку в подкожной клетчатке во время открытой операции на плече.

Нулевая гипотеза После введения подкожных антибиотиков количество колоний P.acnes не изменится.

Обоснование. П. Угри являются наиболее распространенной причиной инфекции плечевого сустава. Частота послеоперационной инфекции плечевого сустава колеблется от 4 до 18%. Микроорганизм P.acnes является грамположительным, в значительной степени анаэробным, но аэротолерантным комменсалом глубоких кожных фолликулов, и стандартный препарат кожи может неадекватно проникать в сально-волосяные фолликулы. В исследовании Levy et al. также было показано, что у 41,8% пациентов был положительный результат биопсии или аспирата на P.acnes до имплантации компонентов. Это исследование определит, снижает ли интраоперационное подкожное введение антибиотиков бактериальную нагрузку и, в свою очередь, частоту инфекций плечевого сустава. Цефазолин был выбран потому, что цефалоспорины и пенициллины имеют самую низкую минимальную ингибирующую концентрацию (МПК) в отношении P.acnes. Аллергия на цефалоспорины встречается реже, чем на пенициллины. Это исследование может изменить клиническую практику во всем мире.

Цели Конкретным результатом является сравнение количества бактериальных клеток на обеих сторонах хирургической раны и определение того, снижает ли подкожное введение антибиотиков на одной стороне количество подкожных клеток в течение различных периодов времени на протяжении всей операции.

Метод исследования. Целевой набор 20 пациентов в этом пилотном исследовании. Эта цифра была получена после определения мощности исследования, уровней значимости и ожидаемого снижения числа колоний P.acnes после применения местных антибиотиков. Это также число, которое может быть достигнуто быстро, что позволяет нам оценить, есть ли наблюдаемая разница между группами, и тем самым оценить осуществимость более крупного испытания.

Пациенты будут получать стандартную предоперационную антибиотикотерапию за 30 минут до разреза и хирургического вмешательства. Кожу также обрабатывают спиртовым раствором хлоргексидина, как это принято в исследовательском учреждении. Исследователи разделят обычный хирургический разрез на три равных участка по обе стороны от разреза, таким образом, образуя шесть сегментов. В одну сторону раны будут введены три аликвоты по 3 мл с использованием концентрации 100 мг/мл цефазолина. Это соответствует 900 мг подкожного антибиотика цефазолина. Нет конкретных критериев эффективности для агентов в этих условиях, которые были бы стандартизированы и одобрены официальным надзорным органом. Мы выбрали это количество, основываясь на безопасном и широко распространенном системном использовании этой концентрации, а также помня о легкодоступных концентрациях. Нет известных исследований, описывающих какой-либо вред от введения антибиотиков в мягкие ткани, т.е. ванкомицин, используемый местно в протезах суставов в качестве профилактики инфекции, а также широкое использование внутримышечных (в/м) препаратов пенициллина. Подкожное введение цефазолина было продемонстрировано как безопасное на свиной модели при доставке более высоких кожных концентраций, чем при сравнительном системном введении. Цефтриаксон для подкожного введения одобрен для применения во Франции и все чаще используется для лечения пожилых людей, а также практикующими врачами-инфекционистами. Имеются опубликованные данные о безопасном применении цефазолина при тумесцентной анестезии с доставкой антибиотиков в смеси с лидокаином, адреналином и бикарбонатом натрия.

Стандартные образцы из всех шести секций будут отобраны с использованием одноразового 6-миллиметрового биопсийного перфоратора Mitex перед инокуляцией, и этот процесс будет повторен через 60 минут. Образцы будут отправлены в микробиологическую лабораторию, где будет проведен подсчет колоний и проведены долгосрочные культуры, т. е. 3 недели.

В хирургии обычным делом являются инъекции подкожных веществ, и нередко берутся биопсии. Единственным потенциальным побочным эффектом является аллергия на цефалоспорины, которая должна быть определена до операции и является частью критериев исключения. Ожидаемого повышения частоты инфекций или кровотечений не ожидается.

Сбор, обработка и хранение Образцы должны быть помечены соответствующими идентификаторами пациента и четко обозначены с указанием места сбора и отправлены в лабораторию для обработки как можно скорее. Биоптаты тканей будут отправлены либо в анаэробной транспортной среде, либо в стерильном контейнере с кусочком стерильной марли, смоченной небактериостатическим физиологическим раствором, или, если кусок достаточно большой, всего несколькими каплями небактериостатического средства в контейнере для предотвращения повреждения ткани. от высыхания.

Обработка тканей Все манипуляции с образцами будут проводиться в Кабинете биологической безопасности и обрабатываться как можно скорее. Ткани будут инокулированы в среду для максимального извлечения Propionibacterium acnes, которая будет включать чашки с 5% агаром с овечьей кровью и шоколадным агаром, а также бульон с тиогликолятом (THIO), инкубированный в атмосфере 5% углекислого газа (CO2) при 35°С. Агары с бруцеллой и колумбийской наладиксовой кислотой (CNA) будут инкубироваться в анаэробных условиях при температуре 35°С.

Стерильными щипцами ткань переносится на стерильную чашку Петри. Используя одноразовый стерильный скальпель, ткань будет нарезана на достаточно мелкие кусочки, чтобы инокулировать все необходимые среды. Несколько кусочков ткани будут добавлены в бульон THIO. Остальные среды будут инокулированы в порядке от наименее селективного к наиболее селективному: чашка с кровяным агаром, чашка с шоколадным агаром, агар для бруцелл и CNA.

Наконец, «приготовления касания» для мазков по Граму будут выполняться путем осторожного касания свежего кусочка ткани на предметных стеклах микроскопа. Этот кусок ткани будет выброшен, так как теперь он потенциально заражен.

Исследование тканей

Все среды будут инкубироваться в течение 5 дней и считываться ежедневно. Бульон выдерживают в течение 21 дня и исследуют через 7, 14 и 21 день после начальных 5-дневных показаний. Нет необходимости наблюдать за пациентами в течение 2 лет, так как мы хотим определить только изменение интраоперационного количества колоний, которое может быть определено в течение 21 дня и может быть связано со снижением инфекции.

Весь бактериальный рост будет исследоваться в соответствии с обычными лабораторными процедурами для идентификации и тестирования на чувствительность к противомикробным препаратам.

Результаты будут своевременно сообщены исследователям.

Статистический анализ. Образцы будут сравниваться с любой стороны раны в течение соответствующих периодов времени. Средние значения будут получены и проанализированы с использованием парного t-критерия.