P.Acnes-Koloniezahl nach subdermalem Cefazolin

Zweck Der Zweck der Studie ist es zu überprüfen, ob die subdermale Injektion von Antibiotika intraoperativ die bakterielle Belastung im Unterhautgewebe im Verlauf einer offenen Schulteroperation reduziert.

Nullhypothese Es wird keine Veränderung in der Koloniezahl von P.acnes nach Verabreichung von subdermalen Antibiotika geben.

Rechtfertigung. P. Acnes ist die häufigste Ursache für Schulterinfektionen. Die Inzidenz einer postoperativen Schultergelenksinfektion variiert zwischen 4 und 18 %. Der P.acnes-Organismus ist ein Gram-positiver, weitgehend anaerober, aber aerotoleranter Kommensale der tiefen Hautfollikel, und eine Standard-Hautpräparation kann die Talgdrüsenfollikel unzureichend durchdringen. In einer Studie von Levy et al. wurde außerdem gezeigt, dass 41,8 % der Patienten vor der Implantation von Komponenten ein positives Biopsie- oder Aspiratergebnis für P.acnes hatten. Diese Studie wird bestimmen, ob die intraoperative subdermale Verabreichung von Antibiotika die bakterielle Belastung und damit die Inzidenz von Schultergelenksinfektionen reduziert. Cefazolin wurde gewählt, weil Cephalosporine und Penicilline die niedrigste minimale Hemmkonzentration (MIC) gegen P.acnes aufweisen. Es gibt eine geringere Inzidenz von Allergien gegen Cephalosporine als gegen Penicilline. Diese Studie hat das Potenzial, die klinische Praxis weltweit zu verändern.

Ziele Das spezifische Ergebnis besteht darin, die Anzahl der Bakterienzellen auf beiden Seiten einer Operationswunde zu vergleichen und festzustellen, ob subkutane Antibiotika auf einer Seite die subkutanen Zellzahlen über verschiedene Zeitverläufe während der Operation reduzieren.

Untersuchungsmethode. Die gezielte Rekrutierung umfasst 20 Patienten in dieser Pilotstudie. Diese Zahl wurde ermittelt, nachdem die Aussagekraft der Studie, die Signifikanzniveaus und der erwartete Rückgang der Besiedelung mit P.acnes-Zahlen nach der Verwendung lokaler Antibiotika bestimmt wurden. Es ist auch eine Zahl, die schnell erreicht werden kann und es uns ermöglicht, zu beurteilen, ob es einen beobachteten Unterschied zwischen den Gruppen gibt, und dadurch die Machbarkeit einer größeren Studie abzuschätzen.

Die Patienten erhalten 30 Minuten vor der Inzision und dem chirurgischen Eingriff präoperative Antibiotika nach Behandlungsstandard. Die Haut wird auch mit einer auf Chlorhexidinalkohol basierenden Lösung vorbereitet, wie es in der Einrichtung des Prüfers üblich ist. Die Ermittler teilen den normalen chirurgischen Einschnitt in drei gleichmäßige Abschnitte auf beiden Seiten des Einschnitts und bilden so sechs Segmente. Eine Seite der Wunde wird mit drei Aliquots von 3 ml injiziert, wobei eine Konzentration von 100 mg/ml Cefazolin verwendet wird. Dies entspricht 900 mg subkutanem Cefazolin-Antibiotikum. Es gibt keine spezifischen Wirksamkeitskriterien für Mittel in diesem Setting, die standardisiert und von einer offiziellen Aufsichtsbehörde genehmigt wurden. Wir haben diese Menge basierend auf der sicheren und weit verbreiteten Anwendung dieser Konzentration auf systemische Weise sowie unter Berücksichtigung der leicht verfügbaren Konzentrationen ausgewählt. Es ist keine Studie bekannt, die einen Schaden beim Einbringen von Antibiotika in das Weichgewebe beschreibt, z. Vancomycin, das topisch in Gelenkprothesen als Prophylaxe gegen Infektionen verwendet wird, und die weit verbreitete Verwendung von intramuskulären (IM) Penicillinprodukten. Subkutanes Cefazolin hat sich in einem Schweinemodell als sicher erwiesen, während es höhere kutane Konzentrationen liefert als bei einer vergleichbaren systemischen Verabreichung. Subkutanes Ceftriaxon ist in Frankreich zur Anwendung zugelassen und wird zunehmend von geriatrischen Bevölkerungsgruppen sowie von Ärzten für Infektionskrankheiten eingesetzt. Es gibt veröffentlichte Beweise für die sichere Verabreichung von Cefazolin in Tumeszenzanästhesie-Antibiotika-Verabreichung gemischt mit Lidocain, Epinephrin und Natriumbicarbonat.

Standardisierte Proben aus allen sechs Abschnitten werden vor der Inokulation mit einer 6-mm-Mitex-Biopsie-Einwegstanze entnommen, und dieser Vorgang wird nach 60 Minuten wiederholt. Die Proben werden an das Mikrobiologielabor geschickt, wo die Koloniezahl bestimmt und Langzeitkulturen, d. h. 3 Wochen, durchgeführt werden.

In der Chirurgie ist es Routine, subkutane Substanzen zu injizieren und nicht selten werden Biopsien entnommen. Die einzige mögliche Nebenwirkung ist eine Allergie gegen Cephalosporine, die präoperativ bestimmt worden wäre und zu den Ausschlusskriterien gehört. Es wird keine erhöhte Inzidenz von Infektionen oder Blutungen erwartet.

Entnahme, Handhabung und Lagerung Die Proben werden mit geeigneten Patientenkennungen und eindeutig mit dem Ort der Entnahme gekennzeichnet und so schnell wie möglich sofort zur Verarbeitung an das Labor geschickt. Gewebebiopsien werden entweder in anaeroben Transportmedien oder in einem sterilen Behälter mit einem Stück steriler Gaze verschickt, die mit nicht bakteriostatischer Kochsalzlösung angefeuchtet ist, oder, wenn das Stück groß genug ist, nur ein paar Tropfen nicht bakteriostatischer in den Behälter, um das Gewebe zu verhindern vor Austrocknung.

Gewebeverarbeitung Alle Probenmanipulationen werden in der biologischen Sicherheitswerkbank durchgeführt und so schnell wie möglich verarbeitet. Die Gewebe werden auf Medien geimpft, um die Gewinnung von Propionibacterium acnes zu maximieren, die 5 % Schafblut-Agar und Schokoladenagarplatten und Thioglykolat (THIO)-Brühe umfassen, die unter 5 % Kohlendioxid (CO2) bei 35 ° C inkubiert wird. Brucella- und Columbia-Naladixinsäure (CNA)-Agar werden unter anaeroben Bedingungen bei 35 °C inkubiert.

Mit einer sterilen Pinzette wird das Gewebe auf eine sterile Petrischale übertragen. Unter Verwendung eines sterilen Einwegskalpells wird das Gewebe in ausreichend kleine Stücke zerhackt, um alle erforderlichen Medien zu inokulieren. Der THIO-Brühe werden mehrere Gewebestücke hinzugefügt. Die verbleibenden Medien werden in der Reihenfolge vom am wenigsten bis zum selektivsten inokuliert: Blutagarplatte, Schokoladenagarplatte, Brucella- und CNA-Agar.

Schließlich werden "Berührungsvorbereitungen" für die Gram-Abstriche durchgeführt, indem ein frisches Stück Gewebe sanft auf den Objektträgern berührt wird. Dieses Stück Gewebe wird verworfen, da es jetzt möglicherweise kontaminiert ist.

Gewebeuntersuchung

Alle Medien werden für 5 Tage inkubiert und täglich gelesen. Die Brühe wird 21 Tage lang aufbewahrt und 7, 14 und 21 Tage nach den ersten 5-tägigen Ablesungen untersucht. Es ist nicht erforderlich, die Patienten 2 Jahre lang zu beobachten, da wir nur versuchen, die Veränderung der intraoperativen Koloniezahl zu bestimmen, die innerhalb von 21 Tagen bestimmt werden kann und mit einer Verringerung der Infektion in Verbindung gebracht werden kann.

Das gesamte Bakterienwachstum wird gemäß den üblichen Laborverfahren zur Identifizierung und zum Test auf antimikrobielle Empfindlichkeit untersucht.

Die Ergebnisse werden den Prüfärzten der Studie zeitnah mitgeteilt

Statistische Analyse. Proben werden mit beiden Seiten der Wunde über die jeweiligen Zeiträume verglichen. Zählmittelwerte werden erhalten und unter Verwendung eines gepaarten t-Tests analysiert.