P. Acnes Colony Count na subdermale cefazoline

Doel Het doel van de studie is na te gaan of de subdermale injectie van antibiotica intraoperatief de bacteriële belasting in het onderhuidse weefsel vermindert tijdens een open schouderoperatie.

Nulhypothese Er zal geen verandering zijn in het aantal kolonies van P.acnes na toediening van subdermale antibiotica.

Rechtvaardiging. P. Acnes is de meest voorkomende oorzaak van schouderontsteking. De incidentie van postoperatieve schoudergewrichtsinfectie varieert van 4-18%. Het P.acnes-organisme is een Gram-positieve, grotendeels anaerobe maar aerotolerante commensaal van de diepe huidfollikels en een standaard huidpreparaat kan onvoldoende doordringen in de haarzakjes. In een studie van Levy et al is ook aangetoond dat 41,8% van de patiënten een positief biopsie- of aspiraatresultaat had voor P.acnes voorafgaand aan implantatie van componenten. Deze studie zal bepalen of intraoperatieve subdermale toediening van antibiotica de bacteriële belasting vermindert en op zijn beurt de incidentie van schoudergewrichtinfecties vermindert. Er is gekozen voor cefazoline omdat cefalosporines en penicillines de laagste minimale remmende concentratie (MIC) hebben tegen P.acnes. Er is een lagere incidentie van allergie voor cefalosporines dan voor penicillines. Deze studie heeft het potentieel om de klinische praktijk wereldwijd te veranderen.

Doelstellingen Het specifieke resultaat is het vergelijken van het aantal bacteriën aan weerszijden van een chirurgische wond en te bepalen of subcutane antibiotica aan één kant het aantal onderhuidse cellen vermindert gedurende verschillende tijdsverlopen gedurende de operatie.

Onderzoeksmethode. Gerichte werving is 20 patiënten in deze pilootstudie. Dit cijfer is tot stand gekomen na het bepalen van de power van de studie, de significantieniveaus en de verwachte daling van de kolonisatie van het aantal P.acnes na het gebruik van lokale antibiotica. Het is ook een getal dat snel kan worden bereikt, waardoor we kunnen beoordelen of er een waargenomen verschil is tussen de groepen en daarmee de haalbaarheid van een grotere proef kunnen peilen.

De patiënten krijgen 30 minuten voorafgaand aan de incisie en chirurgische ingreep de standaard preoperatieve antibiotica. De huid zal ook worden geprepareerd met behulp van een oplossing op basis van chloorhexidinealcohol, zoals standaard in de instelling van de onderzoeker. De onderzoekers verdelen de normale chirurgische incisie in drie gelijke delen aan weerszijden van de incisie, waardoor er zes segmenten ontstaan. Eén zijde van de wond wordt geïnjecteerd met drie aliquots van 3 ml met een concentratie van 100 mg/ml cefazoline. Dit komt overeen met 900 mg subcutaan antibioticum cefazoline. Er zijn geen specifieke werkzaamheidscriteria voor middelen in deze setting die zijn gestandaardiseerd en goedgekeurd door een officiële toezichthoudende instantie. We hebben deze hoeveelheid geselecteerd op basis van veilig en wijdverspreid gebruik van deze concentratie op een systemische manier en rekening houdend met de gemakkelijk verkrijgbare concentraties. Er is geen studie bekend die enige schade beschrijft bij het inbrengen van antibiotica in het zachte weefsel, b.v. vancomycine topisch gebruikt in prothetische gewrichten als profylaxe tegen infectie, en het wijdverbreide gebruik van intramusculaire (IM) penicillineproducten. In een varkensmodel is aangetoond dat subcutane cefazoline veilig is en hogere cutane concentraties oplevert dan bij vergelijkende systemische toediening. Subcutaan ceftriaxon is goedgekeurd voor gebruik in Frankrijk en wordt steeds vaker gebruikt door geriatrische populaties en door beoefenaars van besmettelijke ziekten. Er is gepubliceerd bewijs van veilige toediening van cefazoline bij tumescente anesthesie-antibioticumtoediening gemengd met lidocaïne, epinefrine en natriumbicarbonaat.

Gestandaardiseerde monsters van alle zes secties zullen vóór inoculatie worden bemonsterd met behulp van een wegwerpbare 6 mm Mitex-biopsiepons en dit proces zal na 60 minuten worden herhaald. De monsters worden naar het microbiologisch laboratorium gestuurd, waar het aantal kolonies wordt bepaald en langdurige kweken, d.w.z. gedurende 3 weken, worden uitgevoerd.

Bij operaties is het routine om onderhuidse substanties te injecteren en niet zelden worden er biopsieën genomen. De enige mogelijke bijwerking is allergie voor cefalosporines, die preoperatief zou zijn vastgesteld en deel uitmaakt van de uitsluitingscriteria. Er zal geen verhoogde incidentie van infectie of bloeding worden verwacht.

Afname, hantering en opslag Specimens worden geëtiketteerd met de juiste identificatiegegevens voor de patiënt en duidelijk gelabeld met betrekking tot de plaats van afname, en worden onmiddellijk naar het laboratorium gestuurd voor verwerking zo snel mogelijk. Weefselbiopten worden verzonden in anaerobe transportmedia of in een steriele container met een stuk steriel gaas bevochtigd met niet-bacteriostatische zoutoplossing, of als het stuk groot genoeg is, slechts een paar druppels niet-bacteriostatisch gaas in de container om te voorkomen dat het weefsel van uitdroging.

Weefselverwerking Alle monstermanipulaties worden uitgevoerd in het Biologisch Veiligheidskabinet en zo spoedig mogelijk verwerkt. Weefsels zullen worden geïnoculeerd op media om het herstel van Propionibacterium acnes te maximaliseren, waaronder een 5% schapenbloed-agar en chocolade-agarplaten en thioglycollaat (THIO) bouillon geïncubeerd onder 5% koolstofdioxide (CO2) bij 35 graden Celsius. Brucella en Columbia Naladixic acid (CNA) agars zullen worden geïncubeerd in anaerobe omstandigheden bij 35 graden Celsius.

Met een steriele pincet wordt het weefsel overgebracht naar een steriele petrischaal. Met behulp van een steriel wegwerpmesje wordt het weefsel in voldoende kleine stukjes gehakt om alle benodigde media te inoculeren. Aan THIO-bouillon worden verschillende stukjes weefsel toegevoegd. De overige media worden geïnoculeerd in volgorde van minst selectief tot meest selectief: de bloedagarplaat, chocoladeagarplaat, Brucella en CNA-agar.

Ten slotte zullen "touch preps" voor de gram-uitstrijkjes worden uitgevoerd door voorzichtig een vers stuk weefsel op de microscoopglaasjes aan te raken. Dit stuk weefsel wordt weggegooid omdat het nu mogelijk besmet is.

Weefsel onderzoek

Alle media worden 5 dagen geïncubeerd en dagelijks gelezen. De bouillon wordt 21 dagen bewaard en 7, 14 en 21 dagen na de eerste 5 dagen gelezen. Het is niet nodig om de patiënten gedurende 2 jaar te volgen, aangezien we alleen kijken naar veranderingen in het aantal intra-operatieve kolonies, die binnen 21 dagen kunnen worden bepaald en mogelijk in verband worden gebracht met een vermindering van de infectie.

Alle bacteriegroei zal worden onderzocht volgens de gebruikelijke laboratoriumprocedures voor identificatie en testen op antimicrobiële gevoeligheid.

De resultaten zullen tijdig aan de onderzoekers van het onderzoek worden gerapporteerd

Statistische analyse. Monsters zullen worden vergeleken met beide kanten van de wond gedurende de respectieve tijdsperioden. Telgemiddelden worden verkregen en geanalyseerd met behulp van een gepaarde t-toets.