P.Acnes kolonitelling etter subdermalt cefazolin

Formål Formålet med studien er å vurdere om subdermal injeksjon av antibiotika intraoperativt reduserer bakteriebelastningen i subkutan vev i løpet av en åpen skulderoperasjon.

Nullhypotese Det vil ikke være noen endring i koloniantallet av P.acnes etter administrering av subdermale antibiotika.

Berettigelse. P. Aknes er den vanligste årsaken til skulderinfeksjon. Forekomsten av postoperativ skulderleddsinfeksjon varierer fra 4-18 %. P.acnes-organismen er en grampositiv, stort sett anaerob, men aerotolerant commensal av de dype hudfolliklene og standard hudforberedelse kan utilstrekkelig penetrere de pilosebaceous folliklene. Det er også vist i en studie av Levy et al at 41,8 % av pasientene hadde et positivt biopsi- eller aspirasjonsresultat for P.acnes før implantasjon av komponenter. Denne studien vil avgjøre om intraoperativ subdermal antibiotikaadministrasjon reduserer bakteriemengden og i sin tur redusere forekomsten av skulderleddinfeksjon. Cefazolin er valgt fordi cefalosporiner og penicilliner har den laveste minste hemmende konsentrasjonen (MIC) mot P.acnes. Det er lavere forekomst av allergi mot cefalosporiner enn penicilliner. Denne studien har potensial til å endre klinisk praksis over hele verden.

Mål Det spesifikke resultatet er å sammenligne bakteriecelletallet på hver side av et operasjonssår og bestemme om subkutane antibiotika på en enkelt side reduserer subkutane celletall over ulike tidsforløp gjennom operasjonen.

Forskningsmetode. Målrettet rekruttering er 20 pasienter i denne pilotstudien. Dette tallet er kommet frem til etter å ha bestemt studiens kraft, signifikansnivåer og det forventede fallet i P.acnes teller kolonisering etter bruk av lokale antibiotika. Det er også et tall som kan oppnås raskt, slik at vi kan vurdere om det er en observert forskjell mellom gruppene og dermed måle muligheten for et større forsøk.

Pasientene vil motta standard preoperativ antibiotika 30 minutter før snitt og kirurgisk inngrep. Huden vil også bli preppet med en klorheksidinalkoholbasert løsning som er standard ved etterforskerens institusjon. Etterforskerne vil dele det normale kirurgiske snittet i tre jevne seksjoner på hver side av snittet, og dermed danne seks segmenter. Den ene siden av såret vil bli injisert med tre alikvoter på 3 ml med en konsentrasjon på 100 mg/ml cefazolin. Dette tilsvarer 900 mg subkutant cefazolinantibiotikum. Det er ingen spesifikke effektivitetskriterier for midler i denne innstillingen som er standardisert og godkjent av et offisielt tilsynsorgan. Vi har valgt denne mengden basert på sikker og utbredt bruk av denne konsentrasjonen på en systemisk måte, i tillegg til å være oppmerksom på de lett tilgjengelige konsentrasjonene. Det er ingen kjent studie som beskriver noen skade ved innføring av antibiotika i bløtvevet, f.eks. vankomycin brukt topisk i leddproteser som profylakse mot infeksjon, og utstrakt bruk av intramuskulære (IM) penicillinprodukter. Subkutant cefazolin har vist seg å være trygt i en svinemodell mens det gir høyere kutane konsentrasjoner enn ved sammenlignende systemisk administrering. Subkutan ceftriakson er godkjent for bruk i Frankrike og er av økende bruk for geriatriske populasjoner så vel som av infeksjonsmedisinere. Det er publisert bevis på sikker administrering av cefazolin ved svulmende anestesitilførsel av antibiotika blandet med lidokain, epinefrin og natriumbikarbonat.

Standardiserte prøver fra alle seks seksjonene vil bli tatt med en 6 mm Mitex-biopsistanse før inokulering, og denne prosessen vil bli gjentatt ved 60-minutters-merket. Prøvene vil bli sendt til mikrobiologilaboratoriet hvor kolonitelling vil bli innhentet og langtidskulturer, dvs. 3 uker vil bli utført.

Det er rutine i kirurgi å injisere subkutane stoffer og ikke sjelden tas det biopsier. Den eneste potensielle bivirkningen er allergi mot cefalosporiner, som ville blitt bestemt preoperativt og er en del av eksklusjonskriteriene. Det vil ikke være forventet økt forekomst av infeksjon eller blødning.

Innsamling, håndtering og oppbevaring Prøver vil bli merket med passende pasientidentifikatorer og tydelig merket med hensyn til innsamlingsstedet, og sendes umiddelbart til laboratoriet for behandling så snart som mulig. Vevsbiopsier sendes enten i anaerobe transportmedier eller i en steril beholder med et stykke sterilt gasbind fuktet med ikke-bakteriostatisk saltvann, eller hvis stykket er stort nok, bare noen få dråper ikke-bakteriostatisk i beholderen for å forhindre vevet fra uttørking.

Vevsbehandling Alle prøvemanipulasjoner vil bli utført i det biologiske sikkerhetsskapet og behandlet så snart som mulig. Vev vil bli inokulert til media for å maksimere utvinningen av Propionibacterium acnes som vil inkludere en 5 % saueblodagar og sjokoladeagarplater og tioglykolat (THIO) buljong inkubert under 5 % karbondioksid (CO2) ved 35 Celsius. Brucella og Columbia Naladixic acid (CNA) agarer vil bli inkubert under anaerobe forhold ved 35 Celsius.

Med steril pinsett vil vevet overføres til en steril Petri-plate. Ved å bruke en steril engangsskalpell kuttes vevet i nok små biter til å inokulere alle nødvendige medier. Flere stykker vev vil bli tilsatt THIO-buljongen. De resterende mediene vil bli inokulert hvis rekkefølgen er minst selektiv til den mest selektive: blodagarplaten, sjokoladeagarplaten, Brucella og CNA-agaren.

Til slutt vil "touch preps" for gram-utstryk bli utført ved å forsiktig berøre et friskt stykke vev på objektglassene. Dette vevet vil bli kastet ettersom det nå er potensielt forurenset.

Vevsundersøkelse

Alle medier vil bli inkubert i 5 dager og lest daglig. Buljongen holdes i 21 dager og undersøkes 7, 14 og 21 dager etter de første 5 dagers avlesningene. Det er ikke nødvendig å følge pasientene opp i 2 år, da vi kun ønsker å bestemme endring i antall intraoperative kolonier som kan bestemmes innen 21 dager og kan være knyttet til en reduksjon i infeksjon.

All bakterievekst vil bli undersøkt i henhold til vanlige laboratorieprosedyrer for identifikasjon og antimikrobiell mottakelighetstesting.

Resultatene vil bli rapportert til studieforskerne i tide

Statistisk analyse. Prøver vil bli sammenlignet med hver side av såret over de respektive tidsperiodene. Tellegjennomsnitt vil bli innhentet og analysert ved hjelp av en paret t-test.