Contagem de colônias de P.Acnes após cefazolina subdérmica

Objetivo O objetivo do estudo é revisar se a injeção subdérmica de antibióticos no intraoperatório reduz a carga bacteriana no tecido subcutâneo durante uma operação de ombro aberto.

Hipótese Nula Não haverá alteração na contagem de colônias de P.acnes após a administração de antibióticos subdérmicos.

Justificação. P. Acnes é a causa mais comum de infecção no ombro. A incidência de infecção pós-operatória da articulação do ombro varia de 4 a 18%. O organismo P.acnes é um comensal Gram positivo, amplamente anaeróbico, mas aerotolerante dos folículos profundos da pele e a preparação padrão da pele pode penetrar inadequadamente nos folículos pilossebáceos. Também foi demonstrado em um estudo de Levy et al que 41,8% dos pacientes tiveram uma biópsia ou resultado de aspirado positivo para P.acnes antes da implantação dos componentes. Este estudo determinará se a administração intraoperatória de antibiótico subdérmico reduz a carga bacteriana e, por sua vez, reduz a incidência de infecção da articulação do ombro. A cefazolina foi escolhida porque as cefalosporinas e as penicilinas têm a menor concentração inibitória mínima (CIM) contra P.acnes. Há uma menor incidência de alergia às cefalosporinas do que às penicilinas. Este estudo tem o potencial de mudar a prática clínica em todo o mundo.

Objetivos O resultado específico é comparar a contagem de células bacterianas em ambos os lados de uma ferida cirúrgica e determinar se os antibióticos subcutâneos em um único lado reduzem a contagem de células subcutâneas em vários períodos de tempo durante a operação.

Método de pesquisa. O recrutamento direcionado é de 20 pacientes neste estudo piloto. Este número foi obtido após determinar o poder do estudo, os níveis de significância e a queda antecipada na contagem de colonização de P.acnes após o uso de antibióticos locais. É também um número que pode ser alcançado rapidamente, permitindo avaliar se há uma diferença observada entre os grupos e, assim, avaliar a viabilidade de um estudo maior.

Os pacientes receberão o padrão de antibióticos pré-operatórios 30 minutos antes da incisão e intervenção cirúrgica. A pele também será preparada usando uma solução à base de álcool de clorexidina como é padrão na instituição do investigador. Os investigadores irão dividir a incisão cirúrgica normal em três seções iguais em cada lado da incisão, formando assim seis segmentos. Um lado da ferida será injetado com três alíquotas de 3 mL usando uma concentração de 100mg/mL de cefazolina. Isso equivale a 900 mg de antibiótico cefazolina subcutâneo. Não há critérios de eficácia específicos para agentes nesse cenário que tenham sido padronizados e aprovados por uma agência de supervisão oficial. Selecionamos essa quantidade com base no uso seguro e generalizado dessa concentração de maneira sistêmica, além de estarmos atentos às concentrações prontamente disponíveis. Não há nenhum estudo conhecido que descreva qualquer dano na introdução de antibióticos nos tecidos moles, por ex. vancomicina usada topicamente em articulações protéticas como profilaxia contra infecções e o uso generalizado de produtos de penicilina intramuscular (IM). A cefazolina subcutânea demonstrou ser segura em um modelo suíno, ao mesmo tempo em que administra concentrações cutâneas mais altas do que com a administração sistêmica comparativa. A ceftriaxona subcutânea é aprovada para uso na França e é de uso crescente em populações geriátricas, bem como por profissionais de doenças infecciosas. Existem evidências publicadas da administração segura de cefazolina em anestesia tumescente com administração de antibióticos misturados com lidocaína, epinefrina e bicarbonato de sódio.

Amostras padronizadas de todas as seis seções serão coletadas usando um punção de biópsia Mitex descartável de 6 mm antes da inoculação e esse processo será repetido na marca de 60 minutos. As amostras serão enviadas para o laboratório de microbiologia onde será obtida a contagem de colônias e serão realizadas culturas de longa duração, ou seja, 3 semanas.

É rotina em cirurgia injetar substâncias subcutâneas e não raramente biópsias são feitas. O único efeito colateral potencial é a alergia às cefalosporinas, que teria sido determinada no pré-operatório e faz parte dos critérios de exclusão. Não haverá incidência aumentada esperada de infecção ou sangramento.

Coleta, Manuseio e Armazenamento As amostras serão rotuladas com identificadores de paciente apropriados e claramente rotuladas quanto ao local de coleta, e enviadas ao laboratório imediatamente para processamento o mais rápido possível. As biópsias de tecido serão enviadas em meio de transporte anaeróbico ou em um recipiente estéril com um pedaço de gaze estéril umedecido com soro fisiológico não bacteriostático ou, se o pedaço for grande o suficiente, apenas algumas gotas de não bacteriostático no recipiente para evitar que o tecido da dessecação.

Processamento de tecidos Todas as manipulações de amostras serão realizadas na cabine de segurança biológica e processadas o mais rápido possível. Os tecidos serão inoculados em meios para maximizar a recuperação de Propionibacterium acnes, que incluirá 5% de ágar sangue de ovelha e placas de ágar chocolate e caldo de tioglicolato (THIO) incubado sob 5% de dióxido de carbono (CO2) a 35 Celsius. Os ágars Brucella e Columbia Ácido Naladíxico (CNA) serão incubados em condições anaeróbicas a 35 Celsius.

Com pinça estéril, o tecido será transferido para uma placa de Petri estéril. Usando um bisturi estéril descartável, o tecido será cortado em pedaços pequenos o suficiente para inocular todos os meios necessários. Vários pedaços de tecido serão adicionados ao caldo THIO. Os demais meios serão inoculados na ordem do menos seletivo para o mais seletivo: placa de ágar sangue, placa de ágar chocolate, ágar Brucella e CNA.

Por fim, "preparações de toque" para os esfregaços de grama serão realizadas tocando suavemente um pedaço de tecido fresco nas lâminas do microscópio. Este pedaço de tecido será descartado, pois agora está potencialmente contaminado.

Investigação de Tecidos

Todos os meios serão incubados por 5 dias e lidos diariamente. O caldo será retido por 21 dias e examinado aos 7, 14 e 21 dias após as leituras iniciais de 5 dias. Não há necessidade de acompanhar os pacientes por 2 anos, pois estamos apenas procurando determinar a alteração nas contagens de colônias intraoperatórias, que podem ser determinadas em 21 dias e podem estar ligadas a uma redução na infecção.

Todo crescimento bacteriano será investigado de acordo com os procedimentos laboratoriais usuais para identificação e teste de suscetibilidade antimicrobiana.

Os resultados serão relatados aos investigadores do estudo em tempo hábil

Análise Estatística. As amostras serão comparadas com ambos os lados da ferida durante os respectivos períodos de tempo. Médias de contagem serão obtidas e analisadas usando um teste t pareado.