Conteggio delle colonie di P.Acnes dopo la cefazolina sottocutanea

Scopo Lo scopo dello studio è verificare se l'iniezione sottocutanea di antibiotici intraoperatoriamente riduce la carica batterica nel tessuto sottocutaneo durante il corso di un'operazione di spalla aperta.

Ipotesi nulla Non vi sarà alcun cambiamento nella conta delle colonie di P.acnes in seguito alla somministrazione di antibiotici subdermici.

Giustificazione. P. Acnes è la causa più comune di infezione della spalla. L'incidenza dell'infezione postoperatoria dell'articolazione della spalla varia dal 4 al 18%. L'organismo P.acnes è un commensale Gram-positivo, ampiamente anaerobico ma aerotollerante dei follicoli cutanei profondi e la preparazione standard della pelle può penetrare in modo inadeguato nei follicoli pilosebacei. È stato anche dimostrato in uno studio di Levy et al che il 41,8% dei pazienti aveva una biopsia o un risultato dell'aspirato positivo per P.acnes prima dell'impianto dei componenti. Questo studio determinerà se la somministrazione intraoperatoria di antibiotici subdermici riduce la carica batterica e, a sua volta, riduce l'incidenza dell'infezione dell'articolazione della spalla. La cefazolina è stata scelta perché le cefalosporine e le penicilline hanno la più bassa concentrazione minima inibente (MIC) contro P.acnes. C'è una minore incidenza di allergia alle cefalosporine rispetto alle penicilline. Questo studio ha il potenziale per cambiare la pratica clinica in tutto il mondo.

Obiettivi Il risultato specifico consiste nel confrontare la conta delle cellule batteriche su entrambi i lati di una ferita chirurgica e determinare se gli antibiotici sottocutanei su un solo lato riducono la conta delle cellule sottocutanee in vari periodi di tempo durante l'operazione.

Metodo di ricerca. Il reclutamento mirato è di 20 pazienti in questo studio pilota. Questa cifra è stata raggiunta dopo aver determinato la potenza dello studio, i livelli di significatività e il previsto calo della colonizzazione del conteggio di P.acnes dopo l'uso di antibiotici locali. È anche un numero che può essere raggiunto rapidamente, consentendoci di valutare se esiste una differenza osservata tra i gruppi e quindi valutare la fattibilità di uno studio più ampio.

I pazienti riceveranno lo standard di cura antibiotici preoperatori 30 minuti prima dell'incisione e dell'intervento chirurgico. La pelle verrà anche preparata utilizzando una soluzione a base di alcool di clorexidina come è standard presso l'istituto dello sperimentatore. Gli investigatori divideranno la normale incisione chirurgica in tre sezioni pari su entrambi i lati dell'incisione, formando così sei segmenti. Un lato della ferita verrà iniettato con tre aliquote di 3 ml utilizzando una concentrazione di 100 mg/ml di cefazolina. Ciò equivale a 900 mg di antibiotico cefazolina sottocutaneo. Non ci sono criteri di efficacia specifici per gli agenti in questa impostazione che sono stati standardizzati e approvati da un'agenzia di supervisione ufficiale. Abbiamo selezionato questa quantità in base all'uso sicuro e diffuso di questa concentrazione in modo sistemico, oltre a essere consapevoli delle concentrazioni prontamente disponibili. Non esiste uno studio noto che descriva alcun danno derivante dall'introduzione di antibiotici nei tessuti molli, ad es. la vancomicina utilizzata localmente nelle protesi articolari come profilassi contro le infezioni e l'uso diffuso di prodotti a base di penicillina intramuscolare (IM). La cefazolina per via sottocutanea si è dimostrata sicura in un modello suino mentre fornisce concentrazioni cutanee più elevate rispetto alla somministrazione sistemica comparativa. Il ceftriaxone sottocutaneo è approvato per l'uso in Francia ed è di uso crescente per le popolazioni geriatriche e per i professionisti delle malattie infettive. Esistono prove pubblicate di una somministrazione sicura di cefazolina nella somministrazione di antibiotici per anestesia tumescente miscelata con lidocaina, epinefrina e bicarbonato di sodio.

I campioni standardizzati di tutte e sei le sezioni verranno prelevati utilizzando un punch per biopsia Mitex monouso da 6 mm prima dell'inoculazione e questo processo verrà ripetuto dopo 60 minuti. I campioni verranno inviati al laboratorio di microbiologia dove verrà ottenuto il conteggio delle colonie e verranno eseguite colture a lungo termine, ovvero 3 settimane.

È di routine in chirurgia iniettare sostanze sottocutanee e non di rado vengono prelevate biopsie. L'unico potenziale effetto collaterale è l'allergia alle cefalosporine, che sarebbe stata determinata prima dell'intervento e fa parte dei criteri di esclusione. Non si prevede un aumento dell'incidenza di infezione o sanguinamento.

Prelievo, manipolazione e conservazione I campioni saranno etichettati con appropriati identificativi del paziente e chiaramente etichettati in merito al sito di prelievo e inviati immediatamente al laboratorio per l'elaborazione il prima possibile. Le biopsie tissutali verranno inviate in terreno di trasporto anaerobico o in un contenitore sterile con un pezzo di garza sterile inumidita con soluzione salina non batteriostatica, o se il pezzo è abbastanza grande, solo poche gocce di non batteriostatico nel contenitore per prevenire il tessuto da disseccamento.

Elaborazione dei tessuti Tutte le manipolazioni dei campioni verranno eseguite nella cabina di sicurezza biologica e processate il prima possibile. I tessuti saranno inoculati nei terreni per massimizzare il recupero di Propionibacterium acnes che includerà un 5% di agar sangue di montone e piastre di agar cioccolato e brodo tioglicolato (THIO) incubato sotto il 5% di anidride carbonica (CO2) a 35 gradi Celsius. Gli agar Brucella e Columbia Naladixic acid (CNA) saranno incubati in condizioni anaerobiche a 35 gradi Celsius.

Con una pinza sterile, il tessuto verrà trasferito su una piastra di Petri sterile. Usando un bisturi sterile usa e getta, il tessuto verrà tagliato in pezzi abbastanza piccoli da inoculare tutti i terreni necessari. Diversi pezzi di tessuto verranno aggiunti al brodo THIO. I restanti terreni saranno inoculati in ordine dal meno selettivo al più selettivo: piastra di agar sangue, piastra di agar cioccolato, Brucella e agar CNA.

Infine, la "preparazione del tocco" per gli strisci di grammo verrà eseguita toccando delicatamente un pezzo di tessuto fresco sui vetrini del microscopio. Questo pezzo di tessuto verrà scartato poiché ora è potenzialmente contaminato.

Indagine sui tessuti

Tutti i media saranno incubati per 5 giorni e letti giornalmente. Il brodo verrà conservato per 21 giorni ed esaminato a 7, 14 e 21 giorni dopo le letture iniziali di 5 giorni. Non è necessario seguire i pazienti per 2 anni poiché stiamo solo cercando di determinare il cambiamento nella conta delle colonie intraoperatorie che può essere determinato entro 21 giorni e può essere collegato a una riduzione dell'infezione.

Tutta la crescita batterica sarà studiata secondo le consuete procedure di laboratorio per l'identificazione e il test di sensibilità antimicrobica.

I risultati saranno segnalati agli investigatori dello studio in modo tempestivo

Analisi statistica. I campioni verranno confrontati con entrambi i lati della ferita nei rispettivi periodi di tempo. Le medie dei conteggi saranno ottenute e analizzate utilizzando un paired t-test.