Nombre de colonies de P. Acnes après la céfazoline sous-cutanée

But Le but de l'étude est d'examiner si l'injection sous-cutanée d'antibiotiques peropératoire réduit la charge bactérienne dans le tissu sous-cutané au cours d'une opération ouverte de l'épaule.

Hypothèse nulle Il n'y aura aucun changement dans le nombre de colonies de P. acnes suite à l'administration d'antibiotiques sous-cutanés.

Justification. P. Acnes est la cause la plus fréquente d'infection de l'épaule. L'incidence de l'infection post-opératoire de l'articulation de l'épaule varie de 4 à 18 %. L'organisme P. acnes est un commensal Gram positif, largement anaérobie mais aérotolérant des follicules cutanés profonds et une préparation cutanée standard peut pénétrer de manière inadéquate dans les follicules pilo-sébacés. Il a également été démontré dans une étude de Levy et al que 41,8 % des patients avaient un résultat de biopsie ou d'aspiration positif pour P. acnes avant l'implantation des composants. Cette étude déterminera si l'administration peropératoire d'antibiotiques sous-cutanés réduit la charge bactérienne et, par conséquent, réduit l'incidence des infections de l'articulation de l'épaule. La céfazoline a été choisie parce que les céphalosporines et les pénicillines ont la plus faible concentration minimale inhibitrice (CMI) contre P. acnes. L'incidence d'allergie aux céphalosporines est plus faible qu'aux pénicillines. Cette étude a le potentiel de changer la pratique clinique dans le monde entier.

Objectifs Le résultat spécifique est de comparer le nombre de cellules bactériennes de chaque côté d'une plaie chirurgicale et de déterminer si les antibiotiques sous-cutanés d'un seul côté réduisent le nombre de cellules sous-cutanées sur différentes durées tout au long de l'opération.

Méthode de recherche. Le recrutement ciblé est de 20 patients dans cette étude pilote. Ce chiffre a été obtenu après avoir déterminé la puissance de l'étude, les niveaux de signification et la baisse anticipée de la colonisation du nombre de P. acnes après l'utilisation d'antibiotiques locaux. C'est aussi un nombre qui peut être atteint rapidement, permettant d'évaluer s'il y a une différence observée entre les groupes et ainsi d'évaluer la faisabilité d'un essai plus large.

Les patients recevront les antibiotiques préopératoires standard 30 minutes avant l'incision et l'intervention chirurgicale. La peau sera également préparée à l'aide d'une solution à base d'alcool de chlorhexidine, comme c'est le cas dans l'établissement de l'investigateur. Les enquêteurs diviseront l'incision chirurgicale normale en trois sections égales de chaque côté de l'incision, formant ainsi six segments. Un côté de la plaie sera injecté avec trois aliquotes de 3 mL en utilisant une concentration de 100 mg/mL de céfazoline. Cela équivaut à 900 mg d'antibiotique céfazoline sous-cutané. Il n'y a pas de critères d'efficacité spécifiques pour les agents dans ce contexte qui ont été normalisés et approuvés par une agence de surveillance officielle. Nous avons sélectionné cette quantité sur la base d'une utilisation sûre et généralisée de cette concentration de manière systémique, tout en tenant compte des concentrations facilement disponibles. Il n'existe aucune étude connue décrivant un quelconque effet nocif lors de l'introduction d'antibiotiques dans les tissus mous, par ex. la vancomycine utilisée localement dans les prothèses articulaires comme prophylaxie contre l'infection, et l'utilisation généralisée de produits à base de pénicilline intramusculaire (IM). La céfazoline sous-cutanée s'est avérée sûre dans un modèle porcin tout en délivrant des concentrations cutanées plus élevées qu'avec une administration systémique comparative. La ceftriaxone sous-cutanée est approuvée en France et est de plus en plus utilisée pour les populations gériatriques ainsi que par les infectiologues. Il existe des preuves publiées de l'administration sûre de la céfazoline dans l'administration d'antibiotiques d'anesthésie tumescente mélangée à de la lidocaïne, de l'épinéphrine et du bicarbonate de sodium.

Des échantillons standardisés des six sections seront échantillonnés à l'aide d'un poinçon de biopsie Mitex jetable de 6 mm avant l'inoculation et ce processus sera répété à la marque de 60 minutes. Les échantillons seront envoyés au laboratoire de microbiologie où le comptage des colonies sera obtenu et des cultures à long terme, c'est-à-dire 3 semaines, seront effectuées.

Il est courant en chirurgie d'injecter des substances sous-cutanées et il n'est pas rare que des biopsies soient effectuées. Le seul effet secondaire potentiel est l'allergie aux céphalosporines, qui aurait été déterminée en préopératoire et fait partie des critères d'exclusion. Il n'y aura pas d'incidence accrue prévue d'infection ou de saignement.

Collecte, manipulation et stockage Les échantillons seront étiquetés avec les identifiants de patient appropriés et clairement étiquetés quant au site de collecte, et envoyés immédiatement au laboratoire pour traitement dès que possible. Les biopsies tissulaires seront envoyées soit dans un milieu de transport anaérobie, soit dans un récipient stérile avec un morceau de gaze stérile humidifiée avec une solution saline non bactériostatique, ou si le morceau est assez grand, juste quelques gouttes de non bactériostatique dans le récipient pour empêcher le tissu de la dessiccation.

Traitement des tissus Toutes les manipulations d'échantillons seront effectuées dans l'enceinte de sécurité biologique et traitées dès que possible. Les tissus seront inoculés aux milieux pour maximiser la récupération de Propionibacterium acnes qui comprendra une gélose au sang de mouton à 5 % et des plaques de gélose au chocolat et un bouillon au thioglycolate (THIO) incubé sous 5 % de dioxyde de carbone (CO2) à 35 °C. Les géloses Brucella et Columbia à l'acide naladixique (CNA) seront incubées dans des conditions anaérobies à 35 degrés Celsius.

Avec des pinces stériles, le tissu sera transféré sur une plaque de Pétri stérile. À l'aide d'un scalpel stérile jetable, le tissu sera coupé en suffisamment de petits morceaux pour inoculer tous les milieux requis. Plusieurs morceaux de tissu seront ajoutés au bouillon THIO. Les milieux restants seront ensemencés dans l'ordre du moins sélectif au plus sélectif : la plaque de gélose au sang, la plaque de gélose au chocolat, la gélose Brucella et CNA.

Enfin, les "préparations tactiles" pour les frottis de gramme seront effectuées en touchant doucement un nouveau morceau de tissu sur les lames de microscope. Ce morceau de tissu sera jeté car il est maintenant potentiellement contaminé.

Enquête sur les tissus

Tous les milieux seront incubés pendant 5 jours et lus quotidiennement. Le bouillon sera conservé pendant 21 jours et examiné à 7, 14 et 21 jours après les lectures initiales de 5 jours. Il n'est pas nécessaire de suivre les patients pendant 2 ans car nous cherchons uniquement à déterminer les changements dans le nombre de colonies peropératoires qui peuvent être déterminés dans les 21 jours et peuvent être liés à une réduction de l'infection.

Toute croissance bactérienne sera étudiée selon les procédures habituelles de laboratoire pour l'identification et les tests de sensibilité aux antimicrobiens.

Les résultats seront communiqués aux enquêteurs de l'étude en temps opportun

Analyses statistiques. Les échantillons seront comparés avec chaque côté de la plaie au cours des périodes de temps respectives. Les moyennes de comptage seront obtenues et analysées à l'aide d'un test t apparié.