Recuento de colonias de P.Acnes después de cefazolina subdérmica

Propósito El propósito del estudio es revisar si la inyección subdérmica de antibióticos intraoperatoriamente reduce la carga bacteriana en el tejido subcutáneo durante el curso de una operación abierta de hombro.

Hipótesis nula No habrá cambios en el recuento de colonias de P.acnes después de la administración de antibióticos subdérmicos.

Justificación. P. Acnes es la causa más común de infección del hombro. La incidencia de infección postoperatoria de la articulación del hombro varía del 4 al 18%. El organismo P.acnes es un Gram positivo, en gran parte anaeróbico pero aerotolerante, comensal de los folículos cutáneos profundos y la preparación estándar de la piel puede penetrar inadecuadamente en los folículos pilosebáceos. También se ha demostrado en un estudio de Levy et al. que el 41,8 % de los pacientes tenían un resultado positivo de biopsia o aspirado para P.acnes antes de la implantación de los componentes. Este estudio determinará si la administración intraoperatoria de antibióticos subdérmicos reduce la carga bacteriana y, a su vez, reduce la incidencia de infección de la articulación del hombro. Se ha elegido la cefazolina porque las cefalosporinas y las penicilinas tienen la concentración inhibitoria mínima (MIC) más baja contra P. acnes. Hay una menor incidencia de alergia a las cefalosporinas que a las penicilinas. Este estudio tiene el potencial de cambiar la práctica clínica en todo el mundo.

Objetivos El resultado específico es comparar el recuento de células bacterianas en ambos lados de una herida quirúrgica y determinar si los antibióticos subcutáneos en un solo lado reducen los recuentos de células subcutáneas durante varios períodos de tiempo durante la operación.

Método de investigación. El reclutamiento objetivo es de 20 pacientes en este estudio piloto. Se ha llegado a esta cifra después de determinar el poder del estudio, los niveles de significación y la caída anticipada en la colonización del recuento de P.acnes después del uso de antibióticos locales. También es un número que se puede lograr rápidamente, lo que nos permite evaluar si existe una diferencia observada entre los grupos y, por lo tanto, evaluar la viabilidad de un ensayo más grande.

Los pacientes recibirán los antibióticos preoperatorios estándar de atención 30 minutos antes de la incisión y la intervención quirúrgica. También se preparará la piel con una solución a base de alcohol de clorhexidina como es estándar en la institución del investigador. Los investigadores dividirán la incisión quirúrgica normal en tres secciones iguales a cada lado de la incisión, formando así seis segmentos. Se inyectará en un lado de la herida tres alícuotas de 3 mL utilizando una concentración de 100 mg/mL de cefazolina. Esto equivale a 900 mg de antibiótico cefazolina subcutáneo. No existen criterios de eficacia específicos para los agentes en este entorno que hayan sido estandarizados y aprobados por una agencia de supervisión oficial. Hemos seleccionado esta cantidad basándonos en el uso seguro y generalizado de esta concentración de manera sistémica, además de ser conscientes de las concentraciones fácilmente disponibles. No hay ningún estudio conocido que describa ningún daño por la introducción de antibióticos en el tejido blando, p. vancomicina utilizada tópicamente en articulaciones protésicas como profilaxis contra infecciones, y el uso generalizado de productos de penicilina intramuscular (IM). Se ha demostrado que la cefazolina subcutánea es segura en un modelo porcino mientras administra concentraciones cutáneas más altas que con la administración sistémica comparativa. La ceftriaxona subcutánea está aprobada para su uso en Francia y su uso es cada vez mayor para las poblaciones geriátricas, así como para los profesionales de enfermedades infecciosas. Existe evidencia publicada de la administración segura de cefazolina en la administración de antibióticos de anestesia tumescente mezclada con lidocaína, epinefrina y bicarbonato de sodio.

Las muestras estandarizadas de las seis secciones se tomarán con un punzón de biopsia desechable Mitex de 6 mm antes de la inoculación y este proceso se repetirá a los 60 minutos. Las muestras se enviarán al laboratorio de microbiología donde se obtendrá el recuento de colonias y se realizarán cultivos a largo plazo, es decir, 3 semanas.

Es rutinario en cirugía inyectar sustancias subcutáneas y no pocas veces se toman biopsias. El único efecto secundario potencial es la alergia a las cefalosporinas, que se habría determinado antes de la operación y forma parte de los criterios de exclusión. No se espera un aumento en la incidencia de infección o sangrado.

Recolección, manipulación y almacenamiento Las muestras se etiquetarán con los identificadores de pacientes apropiados y se etiquetarán claramente en cuanto al sitio de recolección, y se enviarán al laboratorio de inmediato para su procesamiento lo antes posible. Las biopsias de tejido se enviarán en medios de transporte anaeróbicos o en un recipiente estéril con un trozo de gasa estéril humedecida con solución salina no bacteriostática, o si la pieza es lo suficientemente grande, solo unas gotas de no bacteriostático en el recipiente para evitar que el tejido de la desecación.

Procesamiento de tejidos Todas las manipulaciones de muestras se llevarán a cabo en la cabina de seguridad biológica y se procesarán lo antes posible. Los tejidos se inocularán en medios para maximizar la recuperación de Propionibacterium acnes, que incluirá placas de agar chocolate y sangre de oveja al 5 % y caldo de tioglicolato (THIO) incubado en dióxido de carbono (CO2) al 5 % a 35 °C. Los agares de ácido naladixico (CNA) de Brucella y Columbia se incubarán en condiciones anaerobias a 35 grados Celsius.

Con fórceps estériles, el tejido se transferirá a una placa de Petri estéril. Usando un bisturí estéril desechable, el tejido se cortará en suficientes trozos pequeños para inocular todos los medios necesarios. Se agregarán varias piezas de tejido al caldo THIO. El resto de los medios se inocularán en orden de menos selectivo a más selectivo: la placa de agar sangre, la placa de agar chocolate, Brucella y agar CNA.

Por último, se realizarán "preparaciones táctiles" para los frotis de Gram tocando suavemente un trozo de tejido fresco en los portaobjetos del microscopio. Este trozo de tejido se desechará ya que ahora está potencialmente contaminado.

Investigación de tejidos

Todos los medios se incubarán durante 5 días y se leerán diariamente. El caldo se mantendrá durante 21 días y se examinará a los 7, 14 y 21 días después de las lecturas iniciales de 5 días. No es necesario realizar un seguimiento de los pacientes durante 2 años, ya que solo buscamos determinar el cambio en el recuento de colonias intraoperatorias, que se puede determinar dentro de los 21 días y puede estar relacionado con una reducción de la infección.

Todo el crecimiento bacteriano se investigará según los procedimientos habituales de laboratorio para la identificación y las pruebas de susceptibilidad a los antimicrobianos.

Los resultados se informarán a los investigadores del estudio de manera oportuna.

Análisis estadístico. Las muestras se compararán con cualquier lado de la herida durante los períodos de tiempo respectivos. Los promedios de conteo se obtendrán y analizarán usando una prueba t pareada.