Kahden karkotetuotteen ja Culicoides Nubeculosus Midgesin positiivisen kontrollin vertailukoe

Hyttyset, kääpiöt ja muut purevat hyönteiset ovat äärimmäisen tärkeiden sairauksien, kuten malarian, keltakuumeen, filariaasin ja monien virusten levittäjiä, ja niillä voi myös olla suuri haitallinen arvo. Karkotetuotteiden käyttö voi tarjota henkilökohtaista lisäsuojaa taudin leviämiseltä ja haitallisilta puremilta. Uudet tehokkaat karkotteet tarjoaisivat lisävaihtoehdon purevia hyönteisiä vastaan. Tämän tutkimuksen tavoitteena on määrittää kahden paikallisesti levitettävän hyönteiskarkotteen ja yhden positiivisen kontrollin tehokkuus Culicoides nubeculosusta vastaan. Culicoides nubeculosus on yleinen kääpiölaji, joka kuuluu Ceratopogonidae-heimoon. Culicoides-kääpiöt ovat pieniä purevia kärpäsiä, joita tavataan kaikkialla maailmassa ja ne lisääntyvät pääasiassa kosteissa, kosteissa ja mutaisissa elinympäristöissä. Munien kehittämiseksi Culicoides-naaraspuoliset naaraat tarvitsevat lämminveristen selkärankaisten, useimmiten kesyeläinten ja ihmisten verijauhon. Culicoides on osallisena useiden zoonoositautien, kuten bluetongue-viruksen, afrikkalaisen hevosruton ja naudan lyhytaikaisen kuumeen, leviämiseen, ja niiden puremat voivat olla tuskallisia ja voivat aiheuttaa epämiellyttävää ärsytystä sekä ihmisille että karjalle.

Tämä on yhden keskuksen, yhden haaran tutkimus, jossa kaikki osallistujat testaavat kahta PMD:tä sisältävää formulaatiota ja positiivista kontrollituotetta, joka sisältää pikaridiinia. Jokaisen testin kontrollina on hoitamaton käsivarsi. Sokkoutusta tai satunnaistamista ei käytetä, koska tulosmittaukset perustuvat kääpiökäyttäytymiseen. Karkotettavien tuotteiden testaus suoritetaan laboratorioympäristössä, jossa on 7 osallistujaa (mieluiten tasapuolisesti sukupuoli). Jokainen osallistuja testaa sekä PMD-formulaatiot että positiivisen kontrollituotteen.

Vapaaehtoiset saavat suostumuksensa ennen minkäänlaisia ​​seulontatoimenpiteitä. Vapaaehtoiset, jotka eivät täytä kelpoisuusehtoja, suljetaan pois. Niiden vapaaehtoisten herkkyyden arvioimiseksi, jotka eivät väitä olevansa herkkiä hyönteisten puremille, vapaaehtoisille tehdään puremotie, jossa käytetään testaukseen käytettyjä kääpiöitä. Osallistujat voivat keskeyttää milloin tahansa ilmoittamatta syytä peruutukselle. Peruuttamiseen asti kerättyjä tietoja käytetään tutkimuksen analysoinnissa, ellei osallistuja pyydä, että hänen tietojaan ei käytetä, jolloin ne poistetaan tietokannasta. Osallistujat voidaan myös poistaa päätutkijan harkinnan mukaan, jos osallistumisen jatkaminen voi vaikuttaa osallistujan turvallisuuteen tai jos jokin tila, joka saattaa häiritä tutkimukseen osallistumista, kehittyy.

Kaikki haittatapahtumat ja vakavat haittatapahtumat on raportoitava. Kaikki haittatapahtumien raportointiin liittyvät kysymykset tulee ensisijaisesti osoittaa johtavalle tutkijalle.

Kääpiöt saadaan hyönteismyrkkyille herkistä vertailukannoista, joita pidetään Pirbright Institutessa (Institute for Animal Health). Niitä pidetään 22-24 °C:ssa, 80-90 %:n suhteellisessa kosteudessa 12:12 tunnin valojaksolla. Naaraskääpiöt ovat isäntähakuisia, tasa-ikäisiä ja 3-8 päivää itämisen jälkeen. Aktiiviset isäntää etsivät naaraat valitaan varmistamaan testikääpiöiden hyvä vaste käyttämällä imulaitetta tai sopivaa ilmavirtauslaitetta. Ennen kunkin testin alkua osallistuja työntää paljaan (kontrolli) vasemman käsivarren häkkiin 1 minuutiksi arvioidakseen kääpiöiden puremisaktiivisuutta. Testeissä käytetään vain häkkejä, joissa vähintään 10 kääpiötä laskeutuu minuutin sisällä. Tätä samaa menettelyä käytetään arvioitaessa, ovatko vapaaehtoiset houkuttelevia kääpiöille. Käsivartta 1 minuutin kuluttua tutkivien tai purevien kääpiöiden lukumäärä lasketaan ja kirjataan (suojaustehokkuuden päätepisteen kontrollitestin puremisnopeustietojen saamiseksi) ja käsi poistetaan häkistä. Välittömästi tämän jälkeen oikea (käsitelty) käsivarsi työnnetään häkkiin 1 minuutiksi. Käsivartta tutkivien tai purevien kääpiöiden lukumäärä 1 minuutin kuluttua lasketaan ja kirjataan. Vielä tunti karkotustuotteen levittämisen jälkeen vapaaehtoisen vasen käsi (kontrolli) työnnetään jälleen häkkiin. Käsivartta tutkivien tai purevien kääpiöiden lukumäärä 1 minuutin kuluttua lasketaan ja kirjataan ja käsi poistetaan häkistä. Jos vähemmän kuin 10 kääpiötä laskeutuu käsittelemättömään käsivarteen tämän 1 minuutin testin aikana, häkki päivitetään uusilla kääpiöillä ja testi toistetaan. Välittömästi sen jälkeen oikea (käsitelty) käsi työnnetään jälleen häkkiin 1 minuutiksi. Käsivartta tutkivien tai purevien kääpiöiden lukumäärä 1 minuutin kuluttua lasketaan ja kirjataan. Tämä toimenpide toistetaan tunnin välein koko testin ajan.

Tuotteet levitetään kyynärvarteen ranteen ja kyynärpään väliin. Vapaaehtoisten kyynärvarren pinta-ala on arvioitu käyttämällä alla olevaa WHO-protokollaa ihokarkotteiden testaamiseen:

Pinta-ala=1⁄(2) (C_W+C_E ) X D_EW

missä CW on ranteen ympärysmitta; CE on kyynärpään ympärysmitta; ja KASTE on ranteen ja kyynärpään välinen etäisyys senttimetreinä (cm). Annos ilmaistaan ​​käyttämällä µl/cm2. Sopiva annos mitataan sitten mikropipetillä tai vaa'alla ja levitetään käsivarteen hansikassormella.

Osallistujia seurataan 72 tunnin kuluessa testistä, jotta voidaan arvioida mahdolliset puremiin ja/tai tuotteisiin liittyvät sivuvaikutukset tai reaktiot.

Lukuun ottamatta vapaaehtoiskyselyä, jonka osallistuja täyttää, kaikki kerätyt tiedot kirjataan tapausraporttilomakkeille (CRF) ja CRF:n täyttäjä allekirjoittaa ne. CRF:ää pidetään lähdetietona. Kerättävät tiedot ovat: osallistujan numero ja käyntipäivä jokaisella sivulla, tietoisen suostumuksen vahvistus, syntymäaika, kelpoisuustiedot, purentatestin tiedot (kääpilaji, ajoitus, 10 min ja 72 tunnin arvioinnit), testikäynnit (kelpoisuuden tarkistuslista) , kyynärvarren mittaus, tuotetiedot, tuotteen sovelluksen tiedot, käsivarren testaustiedot (aika, kuntotarkastus, kääpiöiden lukumäärä, koetin käsivarsi, kääpiöiden lukumäärä, käsitelty käsivarsi)) ja haittatapahtumien seuranta. Tiedot syötetään kahteen kertaan ja tarkistetaan tarkkuuden varmistamiseksi. CRF:t säilytetään lukitussa varastossa. Kunkin testin tietokannassa olevat tiedot linkitetään asiaankuuluvaan SOP:hen, riskinarviointiin, sopimukseen sekä tilastollisen analyysin tiedostoihin ja raportin kopion sijaintiin.