Vergleichsversuch zwischen zwei Repellent-Produkten und einer positiven Kontrolle gegen Culicoides Nubeculosus-Mücken

Mücken, Mücken und andere stechende Insekten sind Überträger extrem wichtiger Krankheiten wie Malaria, Gelbfieber, Filariose und vieler Viren und können auch von großem Belästigungswert sein. Die Verwendung von Repellent-Produkten kann einen zusätzlichen persönlichen Schutz vor der Übertragung von Krankheiten und lästigen Bissen bieten. Neue wirksame Repellentien würden eine zusätzliche Möglichkeit zum Schutz vor stechenden Insekten bieten. Ziel dieser Studie ist es, die Wirksamkeit von zwei bereitgestellten topisch angewendeten Insektenschutzmitteln und einer Positivkontrolle gegen Culicoides nubeculosus zu bestimmen. Culicoides nubeculosus ist eine häufige Gnitzenart aus der Familie der Ceratopogonidae. Culicoides-Mücken sind kleine Stechfliegen, die auf der ganzen Welt zu finden sind und hauptsächlich in feuchten, feuchten, schlammigen Lebensräumen brüten. Um ihre Eier zu entwickeln, benötigen weibliche Culicoides eine Blutmahlzeit von warmblütigen Wirbeltieren, meistens einem domestizierten Tier und Menschen. Culicoides sind an der Übertragung mehrerer zoonotischer Krankheiten wie dem Blauzungenvirus, der Afrikanischen Pferdepest und dem Rinderephemerfieber beteiligt, und ihre Bisse können schmerzhaft sein und sowohl bei Menschen als auch bei Nutztieren unangenehme Reizungen verursachen.

Dies ist eine monozentrische, einarmige Studie, bei der alle Teilnehmer zwei Formulierungen mit PMD und ein positives Kontrollprodukt mit Picaridin testen. Die Kontrolle für jeden Test ist ein unbehandelter Arm. Es wird keine Verblindung oder Randomisierung verwendet, da die Ergebnismaße auf dem Verhalten der Mücken basieren. Repellent-Produkttests finden in einer Laborumgebung mit 7 Teilnehmern (vorzugsweise ausgewogen zwischen den Geschlechtern) statt. Jeder Teilnehmer testet sowohl PMD-Formulierungen als auch ein positives Kontrollprodukt.

Die Freiwilligen erhalten ihre Zustimmung, bevor Screening-Verfahren durchgeführt werden. Freiwillige, die die Zulassungskriterien nicht erfüllen, werden ausgeschlossen. Um die Empfindlichkeit bei jenen Freiwilligen zu beurteilen, die angeben, nicht empfindlich auf Insektenstiche zu reagieren, erhalten die Freiwilligen einen Bisstest mit der für den Test verwendeten Mückenart. Teilnehmer können jederzeit ohne Angabe von Gründen aufhören. Die bis zum Zeitpunkt des Widerrufs gesammelten Daten werden für die Analyse der Studie verwendet, es sei denn, der Teilnehmer verlangt, dass seine Daten nicht verwendet werden. In diesem Fall werden sie aus der Datenbank entfernt. Teilnehmer können auch nach Ermessen des leitenden Prüfarztes entfernt werden, wenn die fortgesetzte Teilnahme die Sicherheit des Teilnehmers beeinträchtigen könnte oder wenn sich eine Erkrankung entwickelt, die die Studienteilnahme beeinträchtigen könnte.

Alle unerwünschten Ereignisse und schwerwiegenden unerwünschten Ereignisse sollten gemeldet werden. Alle Fragen zur Meldung unerwünschter Ereignisse sollten in erster Instanz an den leitenden Prüfarzt gerichtet werden.

Die Mücken werden aus insektizidempfindlichen Referenzstämmen gewonnen, die am Pirbright Institute (Institute for Animal Health) gehalten werden. Sie werden bei 22–24°C, 80–90 % relativer Feuchtigkeit und einer Photoperiode von 12:12 Stunden gehalten. Weibliche Mücken sind wirtssuchend, im einheitlichen Alter und 3-8 Tage nach dem Auflaufen. Aktive Wirt suchende Weibchen werden ausgewählt, um eine gute Reaktion der Testmücken unter Verwendung eines Aspirators oder eines geeigneten Luftstromgeräts sicherzustellen. Vor Beginn jedes Tests führt der Teilnehmer einen nackten (Kontroll-)linken Arm für 1 Minute in den Käfig ein, um die Beißaktivität der Mücken zu beurteilen. In den Tests werden nur Käfige verwendet, in denen mindestens 10 Mücken innerhalb einer Minute landen. Dasselbe Verfahren wird verwendet, um zu beurteilen, ob Freiwillige für die Mücken attraktiv sind. Die Anzahl der Mücken, die nach 1 Minute den Arm sondieren oder beißen, wird gezählt und aufgezeichnet (um Bissratendaten des Kontrolltests für den Endpunkt Schutzwirksamkeit bereitzustellen) und der Arm aus dem Käfig entfernt. Unmittelbar danach wird der rechte (behandelte) Arm für 1 Minute in den Käfig eingeführt. Die Anzahl der Mücken, die nach 1 Minute den Arm sondieren oder beißen, wird gezählt und aufgezeichnet. Eine weitere Stunde nach dem Auftragen des Repellent-Produkts wird der linke Arm (Kontrolle) des Probanden erneut in den Käfig eingeführt. Die Anzahl der Mücken, die nach 1 Minute den Arm sondieren oder beißen, wird gezählt und aufgezeichnet, und der Arm wird aus dem Käfig entfernt. Wenn während dieses 1-Minuten-Tests weniger als 10 Mücken auf dem unbehandelten Arm landen, wird der Käfig mit neuen Mücken aufgefrischt und der Test wiederholt. Unmittelbar danach wird der rechte (behandelte) Arm erneut für 1 Minute in den Käfig eingeführt. Die Anzahl der Mücken, die nach 1 Minute den Arm sondieren oder beißen, wird gezählt und aufgezeichnet. Dieses Verfahren wird während des gesamten Tests in stündlichen Abständen wiederholt.

Die Produkte werden am Unterarm zwischen Handgelenk und Ellbogen aufgetragen. Die Unterarmoberfläche der Freiwilligen wird anhand des nachstehenden WHO-Protokolls zum Testen von Hautabwehrmitteln geschätzt:

Fläche = 1⁄(2 ) (C_W+C_E ) X D_EW

Wobei CW der Umfang des Handgelenks ist; CE ist der Umfang des Ellbogens; und DEW ist der Abstand zwischen Handgelenk und Ellbogen in Zentimetern (cm). Die Dosis wird in µl/cm2 ausgedrückt. Die entsprechende Dosis wird dann mit einer Mikropipette oder einer Waage abgemessen und mit einem behandschuhten Finger auf den Arm aufgetragen.

Die Teilnehmer werden innerhalb von 72 Stunden nach dem Test nachbeobachtet, um mögliche Nebenwirkungen oder Reaktionen auf die Bisse und/oder Produkte zu beurteilen.

Mit Ausnahme des Freiwilligenfragebogens, der vom Teilnehmer ausgefüllt wird, werden alle gesammelten Daten in den Fallberichtsformularen (CRF) aufgezeichnet und von der Person, die den CRF ausfüllt, unterzeichnet. Das CRF wird als Quelldaten betrachtet. Zu erhebende Daten sind: Teilnehmernummer und Datum des Besuchs auf jeder Seite, Bestätigung der Einverständniserklärung, Geburtsdatum, Einzelheiten zur Berechtigung, Einzelheiten zum Bisstest (Mückenart, Zeitpunkt, 10-Minuten- und 72-Stunden-Bewertungen), Testbesuche (Berechtigungs-Checkliste , Unterarmmessung, Produktdetails, Produktanwendungsdetails, Arm-in-Käfig-Testdaten (Zeit, Fitness-Check, Anzahl Mücken, die den Kontrollarm untersuchen, Anzahl Mücken, die den behandelten Arm untersuchen)) und Überwachung unerwünschter Ereignisse. Die Daten werden doppelt eingegeben und überprüft, um die Richtigkeit zu gewährleisten. CRFs werden verschlossen aufbewahrt. Informationen in der Datenbank für jeden Test werden mit einer relevanten SOP, Risikobewertung, Vertrag und Dateien der statistischen Analyse und dem Speicherort der Berichtskopie verknüpft.