Tutkimus potilaiden immuunivasteen tilan arvioimiseksi ennen ja jälkeen viskeraalisen leishmaniaasin hoidon

ImmStat@Cure suoritetaan neljässä leishmaniaasin hoitokeskuksessa Itä-Afrikassa; Endeemisten sairauksien instituutti, Khartumin yliopisto, Khartoum, Sudan, Gondarin yliopisto, Gondar, Etiopia, Amudat Hospital, Amudat, Uganda ja Kimalelin ja Chemolingotin terveyskeskukset Baringon piirikunnassa Keniassa.

Tutkimuksen ensisijaisena tavoitteena on arvioida viskeraalisen leishmaniaasin potilaiden systeemisiä ja ihon immuunivasteita ja loiskuormitusta ennen hoitoa ja sen jälkeen.

Toissijaiset tavoitteet ovat:

1. Tunnistaa systeemiset ja paikalliset immuunikorrelaatiot hoidon tuloksesta
2. Arvioida loisen genotyyppiä suhteessa immuunivasteen ominaisuuksiin
3. Vertaa immunologisia ja parasitologisia tietoja kussakin paikassa ja määrittää mahdolliset korrelaatiot PKDL:n etenemisestä

Tulokset sisältävät tietoa immuunisolujen fenotyypeistä ja toiminnasta perifeerisessä veressä ja kudoksessa, määritettynä immunologian standardimenetelmillä (esim. virtaussytometria, transkriptomiikka ja histopatologia) ja loisten kvantitointi (esim. PCR, histopatologia). Potilasryhmien sekä potilaiden ja kontrollien välillä analysoidaan tietoja laadullisesti ja määrällisesti.

Neljäkymmentä potilasta, joilla on diagnosoitu VL kustakin paikasta, otetaan mukaan tutkimukseen. Potilaiden tulee olla halukkaita ja kyettävä noudattamaan tutkimusmenetelmiä ja antamaan kirjallinen tietoinen suostumus. Kaikilla potilailla on kliinisesti ja parasitologisesti vahvistettu viskeraalinen leishmaniaasi (VL) ja he saavat yhden kierroksen natriumstibglukonaatti/paramomysiini (SSG/PM) -hoitoa normaalin kliinisen käytännön ja alueellisten ohjeiden mukaisesti. Kustakin maasta tutkitaan myös 30 tervettä endeemistä kontrollia.

Potilaiden kohdalla VL varmistetaan tunnistamalla visuaalisesti loiset värjäytyneistä kudosnäytteistöistä suositellun diagnostisen käytännön mukaisesti (käyttämällä luuytimen, pernan tai imusolmukkeiden aspiraatioita kliinisen tarpeen mukaan ja paikallisten toimenpiteiden mukaisesti). Loiset eristetään jäännöskudoksen aspiraatista ja genotyypitetään. Jos kudoksen aspiraatio ei ole suositeltu tai parhaillaan suoritettava diagnostinen toimenpide, loiset eristetään mahdollisuuksien mukaan verestä ja diagnoosi vahvistetaan PCR:llä.

Tutkimus vaatii kaksi lisäverenottoa, joista toinen otetaan ennen hoitoa ja toinen hoidon lopussa.

Tutkimus vaatii myös kaksi 3 mm:n ihobiopsiaa (otettu kaulan/olkapäästä), yksi ennen hoidon alkua ja toinen hoidon lopussa. Biopsiat otetaan paikallispuudutuksessa. Potilaita, jotka kieltäytyvät ihobiopsioista, voidaan edelleen värvätä tutkimukseen.

Terveistä verrokkeista otetaan 23 ml verta yhdellä kertaa diagnostisia tarkoituksia varten ja veren antamiseksi immunologisiin analyyseihin.