Uno studio per valutare lo stato di risposta immunitaria nei pazienti prima e dopo il trattamento per la leishmaniosi viscerale

ImmStat@Cure sarà intrapreso in 4 centri di trattamento per la leishmaniosi nell'Africa orientale; l'Istituto per le malattie endemiche, Università di Khartoum, Khartoum, Sudan, l'Università di Gondar, Gondar, Etiopia, Amudat Hospital, Amudat, Uganda e Kimalel e Chemolingot Health Centres, Baringo County, Kenya.

L'obiettivo primario dello studio è valutare le risposte immunitarie sistemiche e cutanee e il carico parassitario nei pazienti prima e alla fine del trattamento per la leishmaniosi viscerale.

Obiettivi secondari sono:

1. Identificare i correlati immunitari sistemici e locali dell'esito del trattamento
2. Valutare il genotipo del parassita in relazione alle caratteristiche della risposta immunitaria
3. Confrontare i dati immunologici e parassitologici in ogni sito e determinare possibili correlazioni della progressione a PKDL

I risultati includono dati sui fenotipi e sulla funzione delle cellule immunitarie nel sangue e nei tessuti periferici, determinati utilizzando metodi standard in immunologia (ad es. citometria a flusso, trascrittomica e istopatologia) e quantificazione del parassita (ad es. PCR, istopatologia). Ci sarà un'analisi qualitativa e quantitativa dei dati tra le coorti di pazienti e tra pazienti e controlli.

Saranno inclusi nello studio quaranta pazienti con diagnosi di VL da ciascun sito. I pazienti devono essere disposti e in grado di aderire alle procedure dello studio e di dare il consenso informato scritto. Tutti i pazienti saranno clinicamente e parassitologicamente confermati come affetti da leishmaniosi viscerale (VL) e riceveranno un ciclo di trattamento con stibgluconato di sodio/paramomicina (SSG/PM) secondo la normale pratica clinica e le linee guida regionali. Saranno inoltre studiati trenta controlli endemici sani per ciascun paese.

Per i pazienti, la conferma di VL sarà effettuata mediante identificazione visiva dei parassiti in strisci di tessuto colorato secondo la pratica diagnostica raccomandata (utilizzando aspirati di midollo osseo, milza o linfonodo come clinicamente indicato e secondo le procedure locali). I parassiti saranno isolati dall'aspirato tissutale residuo e genotipizzati. Laddove l'aspirato tissutale non sia una procedura diagnostica raccomandata o attualmente eseguita, i parassiti saranno isolati ove possibile dal sangue e la diagnosi confermata dalla PCR.

Lo studio richiede due ulteriori prelievi di sangue, uno effettuato prima del trattamento e il secondo effettuato alla fine del trattamento.

Lo studio richiede anche due biopsie cutanee da 3 mm (prese dalla parte posteriore del collo/spalla), una prelevata prima dell'inizio del trattamento e la seconda prelevata alla fine del trattamento. Le biopsie saranno prelevate in anestesia locale. I pazienti che rifiutano le biopsie cutanee possono ancora essere reclutati nello studio.

Per i controlli sani, verranno prelevati 23 ml di sangue in un'unica occasione, per scopi diagnostici e per fornire sangue per analisi immunologiche.