Badanie oceniające stan odpowiedzi immunologicznej u pacjentów przed i po leczeniu leiszmaniozy trzewnej

ImmStat@Cure zostanie przeprowadzony w 4 ośrodkach leczenia leiszmaniozy w Afryce Wschodniej; Institute for Endemic Diseases, University of Chartum, Chartum, Sudan, University of Gondar, Gonder, Etiopia, Amudat Hospital, Amudat, Uganda oraz Kimalel i Chemolingot Health Centres, Baringo County, Kenia.

Głównym celem pracy jest ocena ogólnoustrojowych i skórnych odpowiedzi immunologicznych oraz obciążenia pasożytami u pacjentów przed i po zakończeniu leczenia leiszmaniozy trzewnej.

Cele drugorzędne to:

1. Identyfikacja ogólnoustrojowych i lokalnych korelatów immunologicznych wyników leczenia
2. Ocena genotypu pasożyta w odniesieniu do charakterystyki odpowiedzi immunologicznej
3. Aby porównać dane immunologiczne i parazytologiczne w każdym miejscu i określić możliwe korelaty progresji do PKDL

Wyniki obejmują dane dotyczące fenotypów i funkcji komórek odpornościowych we krwi obwodowej i tkankach, określone za pomocą standardowych metod stosowanych w immunologii (np. cytometria przepływowa, transkryptomika i histopatologia) oraz oznaczanie ilościowe pasożytów (np. PCR, histopatologia). Przeprowadzona zostanie jakościowa i ilościowa analiza danych w kohortach pacjentów oraz między pacjentami a grupą kontrolną.

Do badania zostanie włączonych czterdziestu pacjentów, u których zdiagnozowano VL z każdego ośrodka. Pacjenci muszą być chętni i zdolni do przestrzegania procedur badania oraz do wyrażenia pisemnej świadomej zgody. Wszyscy pacjenci zostaną klinicznie i parazytologicznie potwierdzeni jako chorzy na leiszmaniozę trzewną (VL) i otrzymają jedną rundę leczenia stiglukonianem sodu/paramomycyną (SSG/PM) zgodnie ze zwykłą praktyką kliniczną i regionalnymi wytycznymi. Z każdego kraju przebadanych zostanie również trzydzieści zdrowych kontroli endemicznych.

W przypadku pacjentów potwierdzenie VL zostanie wykonane poprzez wizualną identyfikację pasożytów w wybarwionych rozmazach tkankowych zgodnie z zalecaną praktyką diagnostyczną (przy użyciu aspiratów szpiku kostnego, śledziony lub węzłów chłonnych zgodnie ze wskazaniami klinicznymi i zgodnie z lokalnymi procedurami). Pasożyty zostaną wyizolowane z aspiratu pozostałej tkanki i poddane genotypowaniu. Tam, gdzie aspiracja tkanki nie jest zalecaną lub obecnie wykonywaną procedurą diagnostyczną, pasożyty zostaną w miarę możliwości wyizolowane z krwi, a diagnoza potwierdzona metodą PCR.

Badanie wymaga dwóch dodatkowych pobrań krwi, jednego pobranego przed leczeniem, a drugiego po zakończeniu leczenia.

Badanie wymaga również dwóch 3-milimetrowych biopsji skóry (pobranych z tyłu szyi/ramion), jednej pobranej przed rozpoczęciem leczenia, a drugiej po zakończeniu leczenia. Biopsje będą pobierane w znieczuleniu miejscowym. Pacjenci odmawiający biopsji skóry mogą nadal być rekrutowani do badania.

W przypadku osób zdrowych jednorazowo zostanie pobrane 23 ml krwi w celach diagnostycznych oraz w celu dostarczenia krwi do analiz immunologicznych.