Kiertävien mikroRNA:iden tunnistaminen nuorten idiopaattisessa skolioosissa (IMIRSA)

MATERIAALIT JA MENETELMÄT: 1) Laskimoverinäytteen ottaminen potilailta, joilla on AIS tai kontrolleja, ja sen jälkeen plasman erottaminen; 2) Verenkierron kokonais-RNA:n eristäminen AIS-potilaiden plasmasta (Kit Invitrogen: Total RNA Isolation Reagent) ja mikroRNA-näytteiden valmistus (TaqMan™ MicroRNA Reverse Transcription Kit); 3) MikroRNA:n ilmentymisprofiilien analyysi mikrosirutekniikalla (Taqman Advanced miRNAs Human CardA + B); 4) Sääntelemättömien mikroRNA:iden validointi yksittäisellä qRT-PCR-määrityksellä ja laskennallisilla toiminnallisilla analyyseillä; ja 5) In vitro -tutkimukset luun uudelleenmuotoilun mekanismeissa tunnistettujen mikroRNA:iden molekyyliroolin tutkimiseksi.

Ilmoittautumismenettelyt:

Potilaat, jotka katsotaan kelpoisiksi, otetaan mukaan tutkimukseen saatuaan kirjallisen tietoisen suostumuksen. Terveet koehenkilöt (verrokkiryhmä) rekrytoidaan vapaaehtoisesti Rizzoli Orthopedic Instituten verkkosivuilla (www.ior.it) julkaistulla ilmoituksella. "Uutiset" -osio.

Tiedonkeruu: Kliiniset tiedot haetaan potilaan lähdeasiakirjan avulla. Toimitetaan protokollakohtainen CRF, joka raportoi analyysien tulokset. CRF vaaditaan, ja se tulee täyttää jokaisesta sisällytetystä aiheesta.

Etiikka: Kliinisen tutkimuksen protokolla ja sen asiakirjat lähetetään ennen tutkimuksen aloittamista kunkin osallistuvan maan toimivaltaisille viranomaisille ja eettisille toimikunnalle hyväksyttäväksi. Vastuullinen tutkija varmistaa, että tämä tutkimus tehdään joko viimeisimmän Helsingin julistuksen sekä kaikkien kliinisiä tutkimuksia ja potilassuojelua koskevien kansainvälisten ja paikallisten lakien mukaisesti. Protokolla on kirjoitettu, ja tutkimus suoritetaan ICH:n harmonisoidun kolmipuolisen hyvän kliinisen käytännön periaatteiden mukaisesti (viite: http://www.emea.eu.int/pdfs/human/ich/013595en.pdf) ).

Tietoinen suostumus: Tutkija ilmoittaa kaikille potilaille tutkimuksen tavoitteista, mahdollisista riskeistä ja hyödyistä, joita tutkimukseen osallistuminen voi saada. Tutkijan on ilmoitettava selvästi, että potilas voi vapaasti kieltäytyä osallistumasta tutkimukseen ja että hän voi peruuttaa suostumuksensa milloin tahansa ja mistä tahansa syystä. Potilaille tiedotetaan heidän henkilötietojensa tiukasta luottamuksellisuudesta, mutta potilastiedot voivat tarkastaa tutkimusta varten muut valtuutetut henkilöt kuin heidän hoitava lääkärinsä. Tietoon perustuvan suostumuksen menettelyn on oltava ICH:n hyvän kliinisen käytännön ohjeiden mukainen. Tämä tarkoittaa, että "potilaan tai potilaan laillisesti hyväksyttävän edustajan tulee allekirjoittaa ja päivättävä kirjallinen tietoinen suostumuslomake".

Tutkijan tulee myös allekirjoittaa Ilmoitettu suostumuslomake ja säilyttää alkuperäiskappale paikan päällä ja kopio alkuperäisestä on luovutettava potilaalle.

Jokaisen tutkimukseen osallistuvan laitoksen toimivaltaisen eettisen toimikunnan on validoitava paikalliset tietoon perustuvat suostumusasiakirjat ennen kuin tutkimus voidaan avata. Korostetaan, että osallistuminen on vapaaehtoista ja että potilas voi kieltäytyä jatkosta tutkimukseen milloin tahansa. Tämä ei vaikuta potilaan myöhempään hoitoon.

Ihmisen biologisen materiaalin (HBM) keräämisen yleiset periaatteet: Ihmisen biologisen materiaalin (HBM) kerääminen sisältää biologisen materiaalin, biologisen jäännösmateriaalin tai johdannaisten keräämisen ja varastoinnin eettisten ja teknisten vaatimusten mukaisesti. Biologinen materiaali (verinäytteet) keskitetään ja varastoidaan Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli-Siciliaan, Bagheriaan (Palermo). Sieltä biologista materiaalia käytetään ja varastoidaan näyteominaisuuksien ja sovellettavien määräysten mukaisesti.

Verestä saatu plasma ja kiertävä kokonais-RNA säilytetään steriileissä säiliöissä (haukka, putket, eppendorf) pakastimessa -80 °C:n lämpötilassa Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli Siciliassa.

Seuraavia periaatteita sovelletaan HBM:n varastointiin: (a) Istituto Ortopedico Rizzolilla on nimetty henkilö, joka vastaa keräyksestä, ja se toimii viestintäpisteenä; (b) Kerätty HBM on dokumentoitava, eli jäljellä oleva määrä ja sen sijainti. toimii viestintäpisteenä; ja c) Biologisen materiaalin varastointi ja käyttö tapahtuu hyvän laboratoriokäytännön (GLP) standardien ja sovellettavan lainsäädännön mukaisesti.

Luottamuksellisuus: Kliinisten tutkimusten tietojen luottamuksellisuuden varmistamiseksi kansallisten ja eurooppalaisten sovellettavien määräysten mukaisesti tiedot ovat vain tutkimuksen sponsorin ja sen nimeämien, seuranta-/auditointimenettelyjen, tutkijan ja yhteistyökumppaneiden sekä kunkin vastaavan laitoksen eettisen komitean saatavilla. sivusto ja terveysviranomainen. Tutkija ja laitos sallivat pääsyn tietoihin ja lähdedokumentaatioihin terveysviranomaisen seurantaa, auditointia, eettisen toimikunnan tarkastusta ja tarkastuksia varten, mutta säilyttävät aina kohteen henkilötietojen luottamuksellisuuden sovellettavan asetuksen mukaisesti.

Tutkijan tulee taata, että potilaan anonyymiys säilyy koko ajan ja hänen henkilöllisyytensä on suojattava luvattomilta henkilöiltä ja laitoksilta.

Kaikki tutkimukseen osallistuvat potilaat tunnistetaan numerokoodilla, joten tunnistettavia henkilötietoja ei kerätä. Tutkijalla on oltava ja säilytettävä potilasrekisteri, jossa on potilaan henkilötiedot: etu-, sukunimi, osoite ja vastaava tunnistekoodi tutkimukseen, tämä rekisteri säilytetään tutkijatiedostossa.

Julkaisupolitiikka ja tietojen omistus: Tutkimuksen päätutkija on vastuussa loppuraportista, julkaisun julkaisemisesta kaikki kerätyt tiedot pöytäkirjassa kuvatulla tavalla ja varmistaa, että tiedot raportoidaan vastuullisesti ja johdonmukaisesti. Erityisesti tästä tutkimuksesta saatujen tietojen julkaiseminen tapahtuu saaduista tuloksista riippumatta. Tietojen siirtäminen tai levittäminen tieteellisten julkaisujen ja/tai konferensseissa, kongresseissa ja seminaareissa esittelyn kautta tapahtuu yksinomaan niiden puhtaasti tilastollisen käsittelyn jälkeen tai täysin nimettömässä muodossa. Kaikki tutkimustiedot ovat sponsorin omistuksessa.